| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-32页 |
| ·黄酮类化合物的研究概况 | 第10-24页 |
| ·黄酮类化合物的结构与种类 | 第10-11页 |
| ·黄酮类化合物的生物活性 | 第11-15页 |
| ·黄酮类化合物的生物合成 | 第15-24页 |
| ·CHS基因的研究进展 | 第24-28页 |
| ·CHS基因的分离与结构 | 第24-25页 |
| ·CHS反应机理 | 第25页 |
| ·CHS基因的表达特性 | 第25-26页 |
| ·CHS基因的进化 | 第26页 |
| ·CHS在基因工程中的应用 | 第26-28页 |
| ·黄芩的研究进展 | 第28-32页 |
| ·黄芩的化学成分及药理作用 | 第28-29页 |
| ·生物技术在植物黄芩中的应用 | 第29-30页 |
| ·今后研究方向展望 | 第30-32页 |
| 第2章 引言 | 第32-34页 |
| ·研究目的与意义 | 第32页 |
| ·研究内容 | 第32-34页 |
| 第3章 粘毛黄芩CHS基因正反义植物表达载体的构建 | 第34-50页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·菌种和质粒 | 第34页 |
| ·试剂 | 第34-35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·PCR扩增引物序列 | 第35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-41页 |
| ·正反义中间表达载体的构建 | 第35-39页 |
| ·正反义中间表达载体导入农杆菌LBA4404 | 第39-40页 |
| ·CHS基因正反义植物表达载体的构建路线 | 第40-41页 |
| ·实验结果与分析 | 第41-48页 |
| ·正反义目的基因的PCR扩增 | 第41页 |
| ·pMD18-schs和pMD18-achs的获得及chs的生物信息学分析 | 第41-44页 |
| ·pMD18-schs、pMD18-achs质粒和pCAMBIAl3O4~+质粒的双酶切 | 第44-45页 |
| ·pCAMBIAl3O~4+-schs和pCAMBIA13O4~+-achs的获得 | 第45-47页 |
| ·正反义中间表达载体导入农杆菌LBA4404 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第4章 粘毛黄芩CHS基因的遗传转化与分子检测 | 第50-64页 |
| ·实验材料 | 第50-52页 |
| ·植物材料 | 第50页 |
| ·生化试剂 | 第50页 |
| ·培养基 | 第50-51页 |
| ·主要试剂的配制 | 第51-52页 |
| ·主要仪器设备 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-56页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第52-53页 |
| ·转基因烟草的分子检测 | 第53-56页 |
| ·实验结果与分析 | 第56-61页 |
| ·转基因烟草的获得 | 第56-58页 |
| ·转基因烟草的GUS组织化学分析 | 第58-59页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第59-60页 |
| ·转基因烟草的RT-PCR检测 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| 第5章 转基因烟草总黄酮和芦丁含量的测定 | 第64-70页 |
| ·实验材料 | 第64页 |
| ·植物材料 | 第64页 |
| ·试剂 | 第64页 |
| ·主要仪器设备 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-65页 |
| ·总黄酮的提取 | 第64页 |
| ·总黄酮含量的测定 | 第64-65页 |
| ·芦丁含量的测定 | 第65页 |
| ·实验结果与分析 | 第65-69页 |
| ·总黄酮含量的测定 | 第65-67页 |
| ·芦丁含量的测定 | 第67-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| 第6章 结论与建议 | 第70-72页 |
| ·CHS基因正反义植物表达载体的构建 | 第70页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404介导的CHS基因转化烟草及分子检测 | 第70页 |
| ·转基因烟草总黄酮和芦丁含量的测定 | 第70页 |
| ·下一步工作建议 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-82页 |
| 附录 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 在学期间所发表的文章 | 第86页 |