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芒果畸形病病原菌鉴定与病原菌的GFP基因标记

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
1 前言第10-17页
   ·芒果畸形病研究综述第10-15页
     ·我国芒果产业的经济重要性第10页
     ·芒果畸形病症状、分布、危害、病原及发病规律第10-15页
       ·症状第10-12页
       ·分布与危害第12页
       ·病原菌第12-14页
       ·发病规律第14页
       ·芒果畸形病的防治措施第14-15页
   ·绿色荧光蛋白(GFP)在真菌研究中的应用第15-16页
   ·本研究的目的意义和主要研究内容第16-17页
     ·本研究的目的意义第16页
     ·主要研究内容第16-17页
2 材料与方法第17-31页
   ·芒果畸形病病原菌的分离鉴定第17-24页
     ·样品采集、病原菌分离、纯化与保存第17页
     ·科赫法则验证第17页
     ·病原菌的形态学鉴定第17页
     ·分子生物学方法鉴定第17-24页
       ·病原菌DNA的提取方法第17-18页
       ·病原菌ITS序列扩增与分析第18-19页
       ·病原菌β-微管蛋白基因序列扩增与分析第19-20页
       ·病原菌种的特异性PCR扩增鉴定第20-21页
       ·克隆转化第21-22页
       ·转化子的菌液PCR检测第22-24页
   ·芒果畸形病病原菌的生物学特性第24-26页
     ·供试菌株第24页
     ·环境条件对芒果畸形病病原菌生长的影响第24页
       ·温度对菌落生长的影响第24页
       ·pH值对菌落生长的影响第24页
       ·光照对菌落生长的影响第24页
     ·碳源、氮源对菌落生长的影响第24-25页
       ·碳源对菌落生长的影响第24页
       ·氮源对菌落生长的影响第24-25页
     ·环境条件对芒果畸形病原菌分生孢子的影响第25-26页
       ·温度对病原菌分生孢子萌发的影响第25页
       ·pH值对病原菌分生孢子萌发的影响第25页
       ·分生孢子的致死温度和时间第25-26页
   ·绿色荧光蛋白基因转化芒果畸形病病原菌的研究第26-31页
     ·材料第26页
     ·主要试剂第26-27页
     ·培养基第27页
     ·质粒提取第27-28页
     ·供试菌株对潮霉素B(Hm B)的敏感性测定第28页
     ·原生质体的制备和PEG介导原生质体转化第28页
       ·原生质体的制备第28页
       ·PEG介导原生质体转化第28页
     ·转化子的菌落观察和荧光检测第28-29页
     ·GFP标记菌株的PCR鉴定和种特异性引物PCR鉴定第29-30页
       ·GFP标记菌株的PCR鉴定第29-30页
       ·种特异性引物PCR鉴定第30页
     ·GFP标记菌株的致病性测定第30-31页
3 结果与分析第31-44页
   ·芒果畸形病病原菌的分离鉴定第31-35页
     ·样品采集、病原物分离、纯化与保存第31页
     ·柯赫法则验证结果第31-32页
     ·病原菌形态特征第32-34页
     ·病原菌ITS和β-微管蛋白基因序列及种特异性PCR结果第34-35页
       ·ITS序列第34页
       ·β-微管蛋白基因序列第34页
       ·种特异性PCR鉴定第34-35页
   ·芒果畸形病病原菌的生物特征试验结果第35-40页
     ·环境条件对菌落生长的影响第35页
       ·温度对病原菌菌丝体生长的影响第35页
       ·pH值对病原菌菌丝体生长的影响第35页
       ·光照对病原菌菌丝体生长的影响第35页
     ·碳源、氮源对病原菌菌丝体生长的影响第35-36页
       ·碳源对病原菌菌丝体生长的影响第35-36页
       ·氮源对病原菌菌丝体生长的影响第36页
     ·环境条件对芒果畸形病病原菌分生孢子的影响第36-40页
       ·不同温度对孢子萌发的影响第36页
       ·不同pH值对孢子萌发的影响第36页
       ·分生孢子的致死温度和时间第36-40页
   ·绿色荧光蛋白基因转化芒果畸形病病原菌的结果第40-44页
     ·供试菌株对潮霉素的敏感性第40-41页
     ·原生质体的生产情况观察第41页
     ·转化子菌落观察和荧光检测结果第41页
     ·GFP标记菌株PCR和种特异性引物PCR鉴定结果第41-43页
     ·转化子致病性测定结果第43-44页
4 结论与讨论第44-47页
   ·结论第44-45页
   ·讨论第45-47页
参考文献第47-52页
致谢第52页

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