鱼源Fab噬菌体抗体库的筛选、鉴定及抗SAs抗体的可溶性表达
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-17页 |
| ·噬菌体抗体库技术 | 第11-12页 |
| ·噬菌体抗体库表达载体系统 | 第12页 |
| ·抗体库分类 | 第12-13页 |
| ·噬菌体抗体库技术的特点 | 第13-14页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第14-15页 |
| ·噬菌体抗体库技术的应用 | 第15-16页 |
| ·噬菌体抗体库技术在水产养殖上的应用价值 | 第16-17页 |
| 2 研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 3 材料与方法 | 第18-27页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·菌株 | 第18-19页 |
| ·工具酶、Marker及试剂盒 | 第19页 |
| ·主要试剂和培养基 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-27页 |
| ·辅助噬菌体敏感宿主菌的制备 | 第20页 |
| ·辅助噬菌体的扩增 | 第20-21页 |
| ·辅助噬菌体滴度测定 | 第21页 |
| ·抗体库的扩增 | 第21页 |
| ·包被板的制备 | 第21页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第21-22页 |
| ·单克隆噬菌体抗体的制备 | 第22页 |
| ·噬菌体单抗的ELISA鉴定 | 第22页 |
| ·ELISA阳性的噬菌粒的酶切鉴定 | 第22-23页 |
| ·Fab段的可溶性表达载体构建 | 第23-24页 |
| ·感受态大肠杆菌的制备 | 第24页 |
| ·可溶性表达载体转化大肠杆菌 | 第24-25页 |
| ·可溶性表达载体在大肠杆菌内表达 | 第25页 |
| ·可溶性Fab ELISA鉴定 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第25-26页 |
| ·Western-blot分析 | 第26-27页 |
| ·DNA测序 | 第27页 |
| 4 结果与分析 | 第27-36页 |
| ·辅助噬菌滴度测定 | 第27-28页 |
| ·抗体库滴度测定 | 第28页 |
| ·抗体库的筛选 | 第28-29页 |
| ·单克隆抗体的ELISA鉴定 | 第29-30页 |
| ·酶切鉴定片段插入 | 第30-31页 |
| ·可溶性表达载体构建 | 第31-32页 |
| ·可溶性Fab ELISA鉴定 | 第32-33页 |
| ·可溶性Fab SDS-PAGE鉴定 | 第33页 |
| ·Western-blot分析 | 第33-35页 |
| ·抗体重链和轻链可变区DNA序列的测序分析 | 第35-36页 |
| 5 讨论 | 第36-42页 |
| ·辅助噬菌体的扩增与定量 | 第36-38页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第38-39页 |
| ·噬菌体Fab抗体在大肠杆菌内的表达 | 第39-42页 |
| 6 小结 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 附表一 | 第50-51页 |
| 附表二 | 第51-52页 |
| 附表三 | 第52-53页 |
| 附表四 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
