| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-30页 |
| 1 口蹄疫及其诊断技术研究进展 | 第11-24页 |
| ·口蹄疫概况 | 第11-12页 |
| ·口蹄疫病毒概述 | 第12-13页 |
| ·FMDV 基因组的基本结构和特性 | 第13-14页 |
| ·FMD 的分布及流行 | 第14-15页 |
| ·口蹄疫的防制 | 第15-16页 |
| ·FMD 诊断技术研究进展 | 第16-24页 |
| 2 胶体金技术研究进展（colloidal gold tech, ICG） | 第24-30页 |
| ·胶体金简介 | 第24-25页 |
| ·免疫胶体金技术（ICG） | 第25-26页 |
| ·免疫胶体金技术的原理 | 第26页 |
| ·免疫胶体金技术的特点 | 第26页 |
| ·胶体金的制备及标记蛋白 | 第26-27页 |
| ·胶体金技术的应用 | 第27-30页 |
| 第二章 O 型口蹄疫病毒VP1 蛋白的原核表达及功能鉴定 | 第30-41页 |
| 1 材料方法 | 第30-35页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| ·质粒和菌株 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第31-33页 |
| ·诱导表达 | 第33页 |
| ·表达产物的鉴定 | 第33-34页 |
| ·表达蛋白的变性与复性 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-38页 |
| ·VP1 基因的PCR 扩增结果 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的构建与鉴定结果 | 第36页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第36-37页 |
| ·表达产物Western-Blot 鉴定 | 第37页 |
| ·复性VP1 表达蛋白SDS-PAGE 电泳鉴定 | 第37-38页 |
| ·ELISA 检测复性蛋白的活性 | 第38页 |
| 3 结论与讨论 | 第38-41页 |
| ·口蹄疫病毒VP1 蛋白 | 第38-39页 |
| ·免疫印迹（Western blotting） | 第39-40页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第40-41页 |
| 第三章 猪O 型FMDV 主要抗原表位多肽的合成与鉴定 | 第41-55页 |
| 1 材料与方法 | 第41-49页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第41页 |
| ·多肽的设计 | 第41页 |
| ·Fmoc 固相多肽合成 | 第41-46页 |
| ·合成多肽的沉淀和脱盐纯化 | 第46页 |
| ·合成多肽的纯度和结构特性鉴定 | 第46-47页 |
| ·合成多肽的溶解和保存 | 第47页 |
| ·多肽与载体蛋白（BSA）的偶联 | 第47-48页 |
| ·生物活性鉴定 | 第48-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-52页 |
| ·多肽的合成与偶联 | 第49页 |
| ·合成多肽的结构特性鉴定 | 第49页 |
| ·合成多肽的活性鉴定 | 第49-52页 |
| 3 结论与讨论 | 第52-55页 |
| ·固相多肽合成（solid phase peptide synthesis，SPPS）的基本原理 | 第52-53页 |
| ·固相法合成多肽的条件 | 第53页 |
| ·合成肽的保护和脱除 | 第53-54页 |
| ·影响多肽合成的因素分析 | 第54页 |
| ·合成肽与抗体的结合活性 | 第54-55页 |
| 第四章 抗O 型FMDV 中和性表位单克隆抗体的制备与鉴定 | 第55-66页 |
| 1 材料与方法 | 第55-61页 |
| ·材料 | 第55-57页 |
| ·方法 | 第57-61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-64页 |
| ·免疫鼠效价检测 | 第61-62页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选 | 第62页 |
| ·效价检测 | 第62页 |
| ·特异性鉴定结果 | 第62-64页 |
| ·杂交瘤细胞稳定性鉴定结果 | 第64页 |
| ·杂交瘤细染色体计数分析 | 第64页 |
| 3 结论与讨论 | 第64-66页 |
| ·关于免疫蛋白 | 第64-65页 |
| ·关于免疫方法 | 第65页 |
| ·关于WestGold 试验 | 第65-66页 |
| 第五章 猪O 型FMDV 抗体免疫金标试纸的组装及性能评价 | 第66-93页 |
| 1 材料与方法 | 第67-73页 |
| ·主要仪器 | 第67页 |
| ·主要试剂 | 第67页 |
| ·血清样品 | 第67页 |
| ·胶体金的制备 | 第67-68页 |
| ·胶体金的质量鉴定 | 第68页 |
| ·金标抗原的制备 | 第68-69页 |
| ·金标垫的制备 | 第69页 |
| ·NC 印膜的制备 | 第69-70页 |
| ·样品垫和吸水垫的准备 | 第70页 |
| ·试纸条的组装 | 第70页 |
| ·试纸条的原理及检测方法 | 第70-71页 |
| ·试纸条方法的建立及参数的优化 | 第71页 |
| ·试纸条性能检测 | 第71-72页 |
| ·田间应用试验 | 第72-73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-86页 |
| ·胶体金的质量鉴定 | 第73-74页 |
| ·最佳蛋白（BSA-Pep2）标记量 | 第74页 |
| ·检测试纸的组装 | 第74-75页 |
| ·试纸条方法的建立及优化 | 第75-78页 |
| ·试纸条性能 | 第78-84页 |
| ·田间应用试验 | 第84-86页 |
| 3 结论与讨论 | 第86-93页 |
| ·试纸检测原理及最佳模式的选择 | 第86-87页 |
| ·制备试纸条试剂的选择 | 第87-88页 |
| ·NC 膜的选择 | 第88页 |
| ·吸水垫的选择 | 第88页 |
| ·样品垫的选择 | 第88-89页 |
| ·连接垫的选择 | 第89页 |
| ·支撑板的选择 | 第89页 |
| ·胶体金的质量 | 第89-90页 |
| ·胶体金颗粒大小 | 第90页 |
| ·关于胶体金的还原方法 | 第90页 |
| ·金标蛋白的制备 | 第90-91页 |
| ·胶体金溶液制备及蛋白标记时需要注意的事项 | 第91-93页 |
| 研究总结 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-111页 |
| 英文摘要 | 第111-114页 |
| 附录 | 第114-119页 |
| 附录A 缩略词表 | 第114-118页 |
| 附录B 攻博期间论文、项目 | 第118-119页 |
