| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-29页 |
| 1 抗菌肽的概述 | 第15-20页 |
| 1.1 抗菌肽的分类 | 第15-16页 |
| 1.2 抗菌肽的杀菌作用 | 第16-17页 |
| 1.3 抗菌肽的应用前景 | 第17-18页 |
| 1.4 抗菌肽研究存在的问题 | 第18-19页 |
| 1.5 抗菌肽表达系统研究进展 | 第19-20页 |
| 2 抗菌肽在大肠杆菌表达系统中的研究进展 | 第20-23页 |
| 2.1 促进融合表达的分子伴侣 | 第20-21页 |
| 2.2 促进包涵体形成的分子伴侣 | 第21-22页 |
| 2.3 自我剪切的载体蛋白 | 第22页 |
| 2.4 与信号肽融合表达 | 第22页 |
| 2.5 其他形式的表达 | 第22-23页 |
| 3 SUMO融合技术在蛋白重组表达中的研究进展 | 第23-27页 |
| 3.1 SUMO的种类及其功能 | 第23-24页 |
| 3.2 SUMO化修饰 | 第24-25页 |
| 3.3 SUMO融合技术的优势 | 第25-26页 |
| 3.4 SUMO融合技术的应用 | 第26-27页 |
| 4 抗菌肽BSN-37的概述 | 第27页 |
| 5 本试验的目的及意义 | 第27-29页 |
| 第二章 抗菌肽BSN-37的活性测定及目的基因的获得 | 第29-39页 |
| 1 试验材料 | 第29-31页 |
| 1.1 菌种及多肽 | 第29页 |
| 1.2 主要试剂 | 第29页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第29-30页 |
| 1.4 主要试验仪器 | 第30-31页 |
| 2 试验方法 | 第31-33页 |
| 2.1 抗菌肽BSN-37的活性测定 | 第31-32页 |
| 2.2 抗菌肽BSN-37基因的设计及密码子的优化 | 第32页 |
| 2.3 抗菌肽BSN-37目的基因的获得 | 第32-33页 |
| 3 试验结果 | 第33-36页 |
| 3.1 抗菌肽BSN-37活性测定和MICs检测结果 | 第33-34页 |
| 3.2 抗菌肽BSN-37密码子优化结果 | 第34-36页 |
| 3.3 抗菌肽BSN-37目的基因的获得 | 第36页 |
| 4 讨论 | 第36-37页 |
| 5 小结 | 第37-39页 |
| 第三章 重组表达质粒pGEX-6p-1-BSN-37的构建及在大肠杆菌中的表达 | 第39-51页 |
| 1 试验材料 | 第39-41页 |
| 1.1 菌种及载体 | 第39页 |
| 1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第39-40页 |
| 1.4 主要试验仪器 | 第40-41页 |
| 2 试验方法 | 第41-47页 |
| 2.1 重组表达质粒pGEX-6p-1-BSN-37的构建 | 第41-44页 |
| 2.2 重组质粒pGEX-6p-1-BSN-37的初步诱导表达 | 第44-47页 |
| 3 试验结果 | 第47-50页 |
| 3.1 重组质粒pGEX-6p-1-BSN-37的鉴定 | 第47-48页 |
| 3.2 重组质粒pGEX-6p-1-BSN-37的SDS-PAGE和 Western-Blot检测 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50页 |
| 5 小结 | 第50-51页 |
| 第四章 重组表达质粒pCold-SUMO-BSN-37的构建 | 第51-63页 |
| 1 试验材料 | 第51-52页 |
| 1.1 菌种及载体 | 第51页 |
| 1.2 主要试剂 | 第51页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第51页 |
| 1.4 主要试验仪器 | 第51-52页 |
| 2 试验方法 | 第52-56页 |
| 2.1 BSN-37目的片段的制备 | 第52-53页 |
| 2.2 重组表达载体的制备 | 第53-54页 |
| 2.3 目的片段与表达质粒的连接 | 第54-55页 |
| 2.4 重组质粒的转化 | 第55页 |
| 2.5 重组表达质粒的鉴定 | 第55-56页 |
| 3 试验结果 | 第56-60页 |
| 3.1 BSN-37目的基因的扩增 | 第56-57页 |
| 3.2 重组表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 3.3 重组表达载体的鉴定 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 5 小结 | 第61-63页 |
| 第五章 重组表达质粒pCold-SUMO-BSN-37在大肠杆菌中的表达 | 第63-77页 |
| 1 试验材料 | 第63-64页 |
| 1.1 菌种及载体 | 第63页 |
| 1.2 主要试剂 | 第63页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第63页 |
| 1.4 主要试验仪器 | 第63-64页 |
| 2 试验方法 | 第64-67页 |
| 2.1 重组质粒工程菌的诱导表达 | 第64-65页 |
| 2.2 重组质粒工程菌的可溶性检测 | 第65页 |
| 2.3 融合蛋白SUMO-BSN-37表达条件的优化 | 第65-66页 |
| 2.4 融合蛋白SUMO-BSN-37的Western Blot分析 | 第66-67页 |
| 3 试验结果 | 第67-73页 |
| 3.1 重组质粒工程菌的鉴定 | 第67页 |
| 3.2 重组质粒工程菌的初步表达 | 第67-68页 |
| 3.3 重组质粒工程菌的可溶性检测 | 第68-70页 |
| 3.4 不同IPTG浓度的优化 | 第70-71页 |
| 3.5 不同诱导表达时间的优化 | 第71-72页 |
| 3.6 表达蛋白的Western Blot分析 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-75页 |
| 5 小结 | 第75-77页 |
| 第六章 抗菌肽BSN-37的释放及抑菌活性检测 | 第77-89页 |
| 1 试验材料 | 第77-78页 |
| 1.1 菌种及载体 | 第77页 |
| 1.2 主要试剂 | 第77页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第77-78页 |
| 1.4 主要试验仪器 | 第78页 |
| 2 试验方法 | 第78-81页 |
| 2.1 融合蛋白的处理 | 第78-79页 |
| 2.2 融合蛋白BSN-37的酶切 | 第79-80页 |
| 2.3 融合蛋白的纯化 | 第80页 |
| 2.4 Tris-Trieine-SDS-PAGE电泳检测 | 第80页 |
| 2.5 酶切产物的活性检测 | 第80-81页 |
| 3 试验结果 | 第81-86页 |
| 3.1 融合蛋白BSN-37的纯化 | 第81-82页 |
| 3.2 融合蛋白BSN-37表达量的测定 | 第82-83页 |
| 3.3 融合蛋白的浓缩 | 第83-84页 |
| 3.4 融合蛋白的切割 | 第84-85页 |
| 3.5 酶切产物的活性检测 | 第85-86页 |
| 4 讨论 | 第86-88页 |
| 5 小结 | 第88-89页 |
| 全文结论 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-99页 |
| 附录 | 第99-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
| 导师简介 | 第107-109页 |
| 作者简介 | 第109-111页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第111页 |
