摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第12-28页 |
1.1 家蚕病毒 | 第12-13页 |
1.1.1 家蚕 | 第12页 |
1.1.2 家蚕病病毒 | 第12-13页 |
1.2 家蚕二分浓核病毒 | 第13-16页 |
1.2.1 家蚕二分浓核病毒简介 | 第13页 |
1.2.2 家蚕二分浓核病毒感染宿主的病理变化 | 第13-15页 |
1.2.3 家蚕二分浓核病毒的基因组结构 | 第15-16页 |
1.3 BmBDVNS1蛋白 | 第16-19页 |
1.3.1 家蚕二分浓核病毒NS1蛋白的结构 | 第16-18页 |
1.3.2 BmBDVNS1蛋白的相关研究 | 第18-19页 |
1.4 BmBDVNS1的同源蛋白 | 第19-25页 |
1.4.1 细小病毒NS1蛋白的结构 | 第19-20页 |
1.4.2 细小病毒NS1蛋白的功能 | 第20-23页 |
1.4.3 细小病毒NS1蛋白功能调控模式 | 第23-25页 |
1.5 研究的目的及意义 | 第25页 |
1.5.1 研究目的 | 第25页 |
1.5.2 研究意义 | 第25页 |
1.6 研究内容和技术路线 | 第25-28页 |
1.6.1 主要研究内容 | 第25-27页 |
1.6.2 技术路线 | 第27-28页 |
第二章 BmBDVNS1蛋白单克隆抗体的制备和验证 | 第28-39页 |
2.1 材料与试剂 | 第28-32页 |
2.1.1 材料 | 第28页 |
2.1.2 试剂 | 第28-29页 |
2.1.3 常用溶液配制 | 第29-31页 |
2.1.4 仪器设备 | 第31-32页 |
2.2 方法 | 第32-35页 |
2.2.1 单克隆抗体制备 | 第32-34页 |
2.2.2 NS1单克隆抗体Westernblotting验证 | 第34-35页 |
2.3 结果及分析 | 第35-38页 |
2.3.1 抗原表位的设计结果 | 第35-36页 |
2.3.2 单克隆抗体腹水制备 | 第36-37页 |
2.3.3 NS1单克隆抗体验证 | 第37-38页 |
2.4 小结与讨论 | 第38-39页 |
第三章 BmBDVNS1的表达分析 | 第39-48页 |
3.1 材料与试剂 | 第39-41页 |
3.1.1 材料 | 第39页 |
3.1.2 试剂 | 第39页 |
3.1.3 常用溶液配制 | 第39-40页 |
3.1.4 仪器设备 | 第40-41页 |
3.2 方法 | 第41-44页 |
3.2.1 制备BmBDV粗提液 | 第41页 |
3.2.2 BmBDV粗提液的PCR鉴定 | 第41页 |
3.2.3 BmBDV感染华八三五家蚕 | 第41-42页 |
3.2.4 BmBDV感染的五龄家蚕解剖 | 第42页 |
3.2.5 提取中肠总RNA | 第42-43页 |
3.2.6 ns1的转录本及转录时相分析 | 第43-44页 |
3.2.7 NS1的表达时相分析 | 第44页 |
3.3 结果及分析 | 第44-46页 |
3.3.1 中肠总RNA电泳鉴定 | 第44-45页 |
3.3.2 ns1的转录本及转录时相分析 | 第45-46页 |
3.3.3 NS1的表达时相分析 | 第46页 |
3.4 小结与讨论 | 第46-48页 |
第四章 BmBDVNS1互作蛋白分离纯化 | 第48-57页 |
4.1 材料与试剂 | 第48-49页 |
4.1.1 实验材料 | 第48页 |
4.1.2 实验试剂 | 第48-49页 |
4.1.3 实验常用试剂的配制 | 第49页 |
4.1.4 仪器设备 | 第49页 |
4.2 实验方法 | 第49-50页 |
4.2.1 免疫共沉淀 | 第49-50页 |
4.2.2 Co-IP实验条件优化 | 第50页 |
4.3 结果及分析 | 第50-56页 |
4.3.1 免疫共沉淀实验过程优化 | 第50-54页 |
4.3.2 免疫共沉淀分离BmBDVNS1相互作用蛋白 | 第54-56页 |
4.4 小结与讨论 | 第56-57页 |
第五章 NS1互作蛋白质谱分析 | 第57-66页 |
5.1 材料与试剂 | 第57-58页 |
5.1.1 材料 | 第57页 |
5.1.2 试剂 | 第57-58页 |
5.1.3 溶液 | 第58页 |
5.1.4 仪器 | 第58页 |
5.2 方法 | 第58-59页 |
5.2.1 蛋白样品预处理及质谱分析 | 第58-59页 |
5.3 实验结果 | 第59-63页 |
5.3.1 蛋白质质谱肽段鉴定结果统计分析 | 第59页 |
5.3.2 蛋白质覆盖度分布 | 第59-60页 |
5.3.3 NS1单抗组和NormalIgG组蛋白样品间差异分析 | 第60-61页 |
5.3.4 质谱结果得到的实验组蛋白鉴定 | 第61-62页 |
5.3.5 NS1互作蛋白的GO分析 | 第62-63页 |
5.4 小结与讨论 | 第63-66页 |
第六章 总结与展望 | 第66-67页 |
6.1 主要工作总结 | 第66页 |
6.2 展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
硕士期间的成绩 | 第75页 |
参加课题 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |