| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 一、引言 | 第11-26页 |
| 1.1 国内外研究进展 | 第11-24页 |
| 1.1.1 自噬降解系统 | 第12-14页 |
| 1.1.2 泛素样(Ubl)缀合复合物 | 第14-17页 |
| 1.1.3 自噬在癌症干细胞(CSCs)中的作用 | 第17-24页 |
| 1.2 研究目的与意义 | 第24-26页 |
| 二、实验材料 | 第26-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.2 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.3 试剂配制 | 第28-31页 |
| 三、实验方法 | 第31-39页 |
| 3.1 细胞培养 | 第31页 |
| 3.2 DHA处理PC12 | 第31页 |
| 3.3 CCK8法检测DHA作用于PC的安全浓度 | 第31-32页 |
| 3.3.1 细胞培养及处理 | 第31页 |
| 3.3.2 CCK8活力检测 | 第31-32页 |
| 3.4 CCK8法检测DHA作用于PC的时间摸索 | 第32页 |
| 3.4.1 细胞培养及处理 | 第32页 |
| 3.4.2 CCK8活力检测 | 第32页 |
| 3.5 DHA对PC12神经突增生的效应显微观察 | 第32-33页 |
| 3.5.1 细胞培养及处理 | 第32-33页 |
| 3.5.2 DHA对PC12神经突增生的效应显微观察 | 第33页 |
| 3.6 DHA诱导的PC12神经突增生的免疫荧光鉴定 | 第33-34页 |
| 3.6.1 细胞培养及处理 | 第33页 |
| 3.6.2 神经突特应性蛋白免疫荧光染色 | 第33-34页 |
| 3.7 DHA诱导的PC12细胞内活性氧(ROS)检测 | 第34页 |
| 3.8 WB法检测DHA诱导的PC12细胞相关蛋白变化 | 第34-36页 |
| 3.8.1 细胞培养及处理 | 第34-35页 |
| 3.8.2 蛋白提取及定量 | 第35页 |
| 3.8.3 WB检测各蛋白表达水平 | 第35-36页 |
| 3.9 qPCR法检测DHA诱导的PC12细胞相关基因表达的影响 | 第36-39页 |
| 3.9.1 细胞培养及处理 | 第36页 |
| 3.9.2 RNA提取 | 第36-37页 |
| 3.9.3 RNA逆转录 | 第37页 |
| 3.9.4 Realtime检测 | 第37-39页 |
| 四、实验结果 | 第39-46页 |
| 4.1 CCK8法检测细胞活力 | 第39页 |
| 4.2 DHA作用于PC12细胞的最佳时间摸索 | 第39-40页 |
| 4.3 DHA对PC12神经突增生的效应 | 第40-42页 |
| 4.4 DHA诱导的PC12神经突增生的免疫荧光鉴定 | 第42页 |
| 4.5 DHA诱导的PC12细胞内活性氧(ROS)检测 | 第42-43页 |
| 4.6 qPCR法检测DHA诱导的PC12细胞相关基因表达的影响 | 第43-44页 |
| 4.7 Western blotting法检测DHA诱导的PC12细胞相关蛋白变化 | 第44-46页 |
| 五、讨论 | 第46-49页 |
| 参考文献 | 第49-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第63页 |
