| 缩略语表 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-13页 |
| ABSTRACT | 第13-19页 |
| 前言 | 第20-23页 |
| 文献回顾 | 第23-41页 |
| 第一部分 LIN28B在胃癌组织中的表达量及其与胃癌患者临床病理特征以及预后的相关性分析 | 第41-56页 |
| 1 技术路线 | 第43页 |
| 2 材料 | 第43-45页 |
| 2.1 石蜡标本获取 | 第43页 |
| 2.2 临床病例资料的获取 | 第43-44页 |
| 2.3 纳入标准 | 第44页 |
| 2.4 实验用主要试剂及仪器 | 第44-45页 |
| 3 实验方法 | 第45-49页 |
| 3.1 HE染色方法 | 第45-46页 |
| 3.2 免疫组化化学染色法 | 第46-47页 |
| 3.3 免疫组化染色分级 | 第47-48页 |
| 3.4 患者随访 | 第48-49页 |
| 3.5 统计分析 | 第49页 |
| 4 结果 | 第49-50页 |
| 4.1 LIN28B蛋白在胃癌组织中表达水平与患者临床资料的相关性分析 | 第49页 |
| 4.2 LIN28B蛋白在胃癌组织中表达水平与患者长期预后的相关性 | 第49页 |
| 4.3 分层分析接受术后辅助化疗患者的预后与LIN28B蛋白表达水平相关性 | 第49-50页 |
| 5 讨论 | 第50-56页 |
| 第二部分 LIN28B在胃癌组织及癌旁正常组织中表达量及其与胃癌新辅助化疗后病理反应的相关性 | 第56-81页 |
| 1 技术路线 | 第57-58页 |
| 2 材料 | 第58-63页 |
| 2.1 临床资料 | 第58页 |
| 2.2 纳入标准 | 第58页 |
| 2.3 实验用试剂及仪器 | 第58-63页 |
| 3 方法 | 第63-73页 |
| 3.1 治疗方法 | 第63-64页 |
| 3.2 胃癌化疗疗效评估 | 第64-65页 |
| 3.3 LIN28B引物设计 | 第65页 |
| 3.4 组织RNA的提取 | 第65-66页 |
| 3.5 组织RNA逆转录及PCR扩增 | 第66-67页 |
| 3.6 Westernblot技术克隆鉴定 | 第67-70页 |
| 3.7 HE染色方法 | 第70-71页 |
| 3.8 免疫组化化学染色 | 第71-72页 |
| 3.9 免疫组化染色分级 | 第72-73页 |
| 3.10 统计学分析 | 第73页 |
| 4 结果 | 第73-74页 |
| 4.1 LIN28B在组织中的RNA表达水平 | 第73-74页 |
| 4.2 LIN28B在组织中的蛋白表达水平 | 第74页 |
| 4.3 LIN28B表达与胃癌新辅助化疗患者临床化疗疗效评估关系 | 第74页 |
| 4.4 LIN28B表达与胃癌新辅助化疗患者病理化疗反应评估关系 | 第74页 |
| 4.5 新辅助化疗前后LIN28B在胃癌组织中表达量的差异 | 第74页 |
| 5 讨论 | 第74-81页 |
| 第三部分 稳定表达LIN28B胃癌细胞系构建及LIN28B表达胃癌细胞增殖、侵袭及化疗耐药的体外研究 | 第81-117页 |
| 1 技术路线 | 第84页 |
| 2 材料 | 第84-90页 |
| 2.1 胃癌细胞系 | 第84页 |
| 2.2 实验主要试剂及仪器 | 第84-90页 |
| 3 方法 | 第90-101页 |
| 3.1 胃癌细胞培养 | 第90页 |
| 3.2 LIN28B引物设计 | 第90-91页 |
| 3.3 胃癌细胞RNA提取 | 第91-92页 |
| 3.4 胃癌细胞RNA逆转录及PCR扩增 | 第92-93页 |
| 3.5 Westernblot | 第93-96页 |
| 3.6 质粒制备 | 第96-97页 |
| 3.7 质粒稳定转染 | 第97页 |
| 3.8 LIN28BsiRNA干扰判断及瞬时转染 | 第97-98页 |
| 3.9 MTT技术检测肿瘤细胞增殖情况 | 第98-99页 |
| 3.10 化疗药物敏感性实验 | 第99-100页 |
| 3.11 肿瘤细胞侵袭性实验 | 第100-101页 |
| 3.12 细胞克隆形成实验 | 第101页 |
| 3.13 统计学分析 | 第101页 |
| 4 结果 | 第101-105页 |
| 4.1 LIN28BRNA在胃癌细胞株中的表达水平 | 第101-102页 |
| 4.2 LIN28B蛋白在胃癌细胞株中的表达情况 | 第102页 |
| 4.3 构建稳定表达LIN28B的SGC7901细胞株 | 第102页 |
| 4.4 siRNA干扰技术降低高表达细胞中LIN28B蛋白及RNA表达水平 | 第102-103页 |
| 4.5 转染和干扰后胃癌细胞生长状态差异 | 第103-104页 |
| 4.6 经转染和RNA干扰后胃癌细胞克隆形成率差异 | 第104页 |
| 4.7 经转染和RNA干扰后胃癌细胞侵袭性能力差异 | 第104-105页 |
| 4.8 经转染和RNA干扰后胃癌细胞株化疗耐敏感性变化 | 第105页 |
| 5 讨论 | 第105-117页 |
| 小结 | 第117-118页 |
| 参考文献 | 第118-140页 |
| 个人简历和研究成果 | 第140-142页 |
| 致谢 | 第142-143页 |
