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细菌纤维素多尺度结构构筑及其在尿道修复中的应用探索

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第一章 绪论第15-41页
    1.1 前言第15页
    1.2 组织工程与组织工程支架材料第15-18页
        1.2.1 组织工程的概念第15-17页
        1.2.2 组织工程支架材料第17-18页
    1.3 组织工程支架材料多尺度结构构筑第18-25页
        1.3.1 细胞外基质的结构与功能第18-19页
        1.3.2 模拟细胞外基质的纳米结构构筑第19-22页
        1.3.3 模拟细胞外基质的多孔结构构筑第22-23页
        1.3.4 模拟细胞外基质的多孔微/纳结构构筑第23-25页
    1.4 细菌纤维素(BC)—新型医用生物材料第25-28页
        1.4.1 皮肤创伤修复第26-27页
        1.4.2 血管修复第27页
        1.4.3 骨组织修复第27-28页
        1.4.4 软骨组织修复第28页
    1.5 BC的多尺度结构构筑研究第28-32页
        1.5.1 BC的纳米结构构筑第28-29页
        1.5.2 BC的多孔微/纳结构构筑第29-32页
            1.5.2.1 物理发泡法第29-30页
            1.5.2.2 致孔剂沥滤法第30-31页
            1.5.2.3 纤维均质-冷冻干燥法第31-32页
    1.6 课题研究目标、研究内容和拟解决的关键性问题第32-35页
        1.6.1 研究目标与总体思路第32-33页
        1.6.2 研究内容第33-34页
        1.6.3 拟解决的关键性问题第34-35页
    参考文献第35-41页
第二章 细菌纤维素表面纳米结构调控及生物学评价第41-63页
    2.1 引言第41-42页
    2.2 实验材料第42页
        2.2.1 菌种第42页
        2.2.2 常用试剂第42页
    2.3 实验方法与表征手段第42-46页
        2.3.1 BC培养基的配制第42-43页
        2.3.2 医用BC材料的制备方法第43-44页
        2.3.3 初始菌液密度调控法制备医用细菌纤维素膜第44页
        2.3.4 脂肪干细胞的获得与培养第44页
        2.3.5 脂肪干细胞在支架表面的种植第44-45页
        2.3.6 表征手段第45-46页
            2.3.6.1 医用细菌纤维素膜重量及厚度测定第45页
            2.3.6.2 场发射扫描电镜(FE-SEM)第45页
            2.3.6.3 力学性能分析第45页
            2.3.6.4 细胞活性测试第45-46页
            2.3.6.5 细胞增殖能力实验第46页
            2.3.6.6 细胞形态分析第46页
    2.4 结果与讨论第46-60页
        2.4.1 医用细菌纤维素生化合成的条件优化第46-50页
            2.4.1.1 培养时间对BC产率的影响第47页
            2.4.1.2 S/V值对BC产率的影响第47-49页
            2.4.1.3 培养液高度对BC材料的控制第49-50页
        2.4.2 初始细菌浓度对细菌纤维素膜表面纳米结构及性能的影响第50-60页
            2.4.2.1 材料结构与形貌表征第50-56页
            2.4.2.2 力学性能分析第56-57页
            2.4.2.3 细胞活力分析第57-58页
            2.4.2.4 细胞增殖能力分析第58-59页
            2.4.2.5 细胞形态与黏附分析第59-60页
    2.5 本章小结第60-61页
    参考文献第61-63页
第三章 三维细菌纤维素微/纳支架制备、调控及评价第63-101页
    3.1 引言第63-64页
    3.2 材料第64-65页
        3.2.1 菌种第64页
        3.2.2 试剂第64-65页
    3.3 实验方法与表征手段第65-69页
        3.3.1 BC培养基的配制第65页
        3.3.2 明胶模板的制备第65页
        3.3.3 模板合成法制备三维BC微/纳支架材料第65页
        3.3.4 三维BC微/纳支架纯化方法第65-66页
        3.3.5 脂肪干细胞的获得与培养第66页
        3.3.6 脂肪干细胞在支架材料上的种植第66-67页
        3.3.7 表征手段第67-69页
            3.3.7.1 支架材料内毒素评价第67页
            3.3.7.2 场发射扫描电镜(FE-SEM)第67页
            3.3.7.3 孔隙率(Porosity)第67页
            3.3.7.4 纤维素含量第67页
            3.3.7.5 衰减全反射傅里叶红外光谱(FTIR-ATR)第67-68页
            3.3.7.6 X射线衍射(XRD)第68页
            3.3.7.7 力学性能第68页
            3.3.7.8 体外降解实验第68页
            3.3.7.9 体内降解实验第68页
            3.3.7.10 细胞活性测试第68页
            3.3.7.11 细胞增殖能力实验第68-69页
            3.3.7.12 细胞形态学分析第69页
    3.4 结果与讨论第69-96页
        3.4.1 三维细菌纤维素微/纳支架制备及表征第69-83页
            3.4.1.1 模板合成法制备三维细菌纤维素微/纳支架的原理第69-70页
            3.4.1.2 明胶溶液浓度对明胶模板多孔结构的影响第70-71页
            3.4.1.3 内毒素评价第71-72页
            3.4.1.4 支架结构与形貌表征第72-74页
            3.4.1.5 红外与X射线衍射分析第74-75页
            3.4.1.6 力学性能分析第75-77页
            3.4.1.7 体内生物相容性第77-79页
            3.4.1.8 Gel/BC支架材料的体外细胞生物相容性表征第79-83页
        3.4.2 初始细菌浓度调控对三维细菌纤维素微/纳支架的影响及生物学评价第83-96页
            3.4.2.1 内毒素评价第84页
            3.4.2.2 支架结构与形貌表征第84-88页
            3.4.2.3 力学性能分析第88-89页
            3.4.2.3 体外降解实验第89-90页
            3.4.2.4 体内降解实验第90-92页
            3.4.2.5 纳米纤维密度对细胞行为的影响第92-96页
    3.5 本章小结第96-97页
    参考文献第97-101页
第四章 双层BC微/纳组织工程尿道支架的制备及其尿道重建中的应用第101-132页
    4.1 引言第101-102页
    4.2 材料第102页
        4.2.1 菌种第102页
        4.2.2 常用试剂第102页
    4.3 实验方法与表征手段第102-106页
        4.3.1 BC培养基的配制第102-103页
        4.3.2 明胶模板的制备第103页
        4.3.3 模板合成法制备双层BC微/纳支架材料第103-104页
            4.3.3.1 方法一第103页
            4.3.3.2 方法二第103-104页
        4.3.4 双层BC微/纳支架纯化方法第104页
        4.3.5 尿道脱细胞基质的制备第104页
        4.3.6 种子细胞的获得与培养第104页
        4.3.7 种子细胞在支架上的种植第104-105页
        4.3.8 表征手段第105-106页
            4.3.8.1 内毒素评价第105页
            4.3.8.2 场发射扫描电镜(FE-SEM)第105页
            4.3.8.4 力学性能分析第105页
            4.3.8.5 吸水性能与蛋白吸附性能第105页
            4.3.8.6 细胞活性测试第105页
            4.3.8.7 细胞增殖测试第105-106页
            4.3.8.8 细胞形态分析第106页
            4.3.8.9 材料-细胞复合物的体内动物学评价第106页
    4.4 结果与讨论第106-130页
        4.4.1 用于尿道修复的双层BC微/纳支架设计及制备方法优化第106-115页
            4.4.1.1 尿道脱细胞基质微/纳结构分析第106-110页
            4.4.1.2 双层BC微/纳组织工程尿道支架的设计第110-111页
            4.4.1.3 双层BC微/纳组织工程尿道支架的制备方法优化第111-115页
        4.4.2 内毒素评价第115-116页
        4.4.3 支架结构与形貌表征第116-118页
        4.4.4 力学性能分析第118-119页
        4.4.5 吸水性能与蛋白吸附性能第119-120页
        4.4.6 细胞活性及增殖能力第120-123页
        4.4.7 体外构建组织工程尿道及评价第123-126页
        4.4.8 体内修复长段尿道缺损的动物学评价第126-130页
    4.5 本章小结第130页
    参考文献第130-132页
第五章 全文总结与展望第132-135页
    5.1 结论第132-133页
    5.2 本文创新点第133-134页
    5.3 展望第134-135页
致谢第135-136页
附录一 攻读博士学位期间发表的论文及专利第136-138页

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