| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 缩写词表（Abbreviations) | 第13-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-25页 |
| 1.研究目的及意义 | 第15-16页 |
| 2.研究现状 | 第16-25页 |
| 2.1 副猪嗜血杆菌的研究现状 | 第16-19页 |
| 2.2 血管内皮细胞的研究现状 | 第19-20页 |
| 2.3 tlrs/nf-κb信号通路的研究进展 | 第20-22页 |
| 2.4 炎性小体信号通路的研究进展 | 第22-23页 |
| 2.5 黄芩苷的研究进展 | 第23-24页 |
| 2.6 副猪嗜血杆菌诱导血管内皮细胞tlrs/nf-κb和nlrp3/caspase-1信号通路的激活 | 第24-25页 |
| 第二章 试验研究 | 第25-68页 |
| 试验一 副猪嗜血杆菌体外感染猪血管内皮细胞模型的建立 | 第25-35页 |
| 1.试验材料 | 第25-27页 |
| 1.1 试验药品与试剂 | 第25页 |
| 1.2 仪器与设备 | 第25-26页 |
| 1.3 试剂配制 | 第26-27页 |
| 1.4 实验动物 | 第27页 |
| 1.5 试验菌株 | 第27页 |
| 2.试验方法 | 第27-31页 |
| 2.1 猪主动脉血管内皮细胞的分离 | 第27页 |
| 2.2 猪主动脉血管内皮细胞计数 | 第27-28页 |
| 2.3 猪血管内皮细胞的鉴定 | 第28页 |
| 2.4 猪血管内皮细胞的消化传代及冻存 | 第28-29页 |
| 2.4.1 内皮细胞传代 | 第28页 |
| 2.4.2 内皮细胞的冻存 | 第28-29页 |
| 2.5 副猪嗜血杆菌的培养 | 第29-30页 |
| 2.5.1 副猪嗜血杆菌的复苏增殖 | 第29页 |
| 2.5.2 活菌计数 | 第29-30页 |
| 2.6 试验设计 | 第30页 |
| 2.7 培养上清液中il-1β、il-18及tnf-α含量的测定 | 第30页 |
| 2.8 统计学分析 | 第30-31页 |
| 3.试验结果 | 第31-33页 |
| 3.1 原代猪血管内皮细胞的鉴定 | 第31页 |
| 3.2 培养上清液中il-1β含量的测定 | 第31-32页 |
| 3.3 培养上清液中il-18含量的测定 | 第32页 |
| 3.4 培养上清液中tnf-α含量的测定 | 第32-33页 |
| 4.讨论 | 第33-35页 |
| 试验二 黄芩苷对副猪嗜血杆菌感染猪血管内皮细胞tlrs/nf-κb信号通路的影响 | 第35-51页 |
| 1.试验材料 | 第35-36页 |
| 1.1 试验药品与试剂 | 第35-36页 |
| 1.2 仪器设备 | 第36页 |
| 1.3 试剂配制 | 第36页 |
| 1.4 实验动物 | 第36页 |
| 1.5 试验菌株 | 第36页 |
| 2.试验方法 | 第36-40页 |
| 2.1 副猪嗜血杆菌的培养 | 第36页 |
| 2.2 血管内皮细胞的分离培养 | 第36-37页 |
| 2.3 试验设计 | 第37页 |
| 2.4 cck-8法检测黄芩苷对猪血管内皮细胞活力的影响 | 第37页 |
| 2.5 细胞培养上清液中il-6、il-8、il-10、pge2和胞浆中cox-2含量的测定 | 第37-38页 |
| 2.6 细胞总rna提取和q-rtpcr | 第38-39页 |
| 2.7 hps感染血管内皮细胞对核转移因子nf-κbp65的核转移影响 | 第39-40页 |
| 2.7.1 elisa法 | 第39页 |
| 2.7.2 免疫荧光法 | 第39-40页 |
| 3.统计学分析 | 第40页 |
| 4.试验结果 | 第40-49页 |
| 4.1 黄芩苷对细胞活力的影响 | 第40-41页 |
| 4.2 黄芩苷对 HPS 感染血管内皮细胞培养上清液中 IL-6、IL-8、IL-10、PGE2和胞浆中 COX-2 含量的影响 | 第41-44页 |
| 4.3 黄芩苷对hps感染猪血管内皮细胞后il-6、il-8、il-10、cox-2的mrna表达的影响 | 第44-47页 |
| 4.4 黄芩苷对 HPS 感染猪血管内皮细胞后核转移因子 NF-κB p65 核转移的影响 | 第47-49页 |
| 4.4.1 elisa法测定结果 | 第47-48页 |
| 4.4.2 免疫荧光法测定结果 | 第48-49页 |
| 5.讨论 | 第49-51页 |
| 试验三 黄芩苷对副猪嗜血杆菌感染猪血管内皮细胞后NLRP3/caspase-1 信号通路的影响 | 第51-68页 |
| 1.试验材料 | 第51-52页 |
| 1.1 试验试剂与药品 | 第51页 |
| 1.2 仪器设备 | 第51页 |
| 1.3 试剂配制 | 第51页 |
| 1.4 实验动物 | 第51-52页 |
| 1.5 试验菌株 | 第52页 |
| 2.试验方法 | 第52-55页 |
| 2.1 副猪嗜血杆菌的培养 | 第52页 |
| 2.2 猪血管内皮细胞的分离培养 | 第52页 |
| 2.3 试验设计 | 第52页 |
| 2.4 细胞培养上清液中il-1β、il-18、tnf-α含量的测定 | 第52页 |
| 2.5 细胞总rna提取和q-rtpcr | 第52-53页 |
| 2.6 细胞活性氧释放的检测 | 第53-54页 |
| 2.7 细胞焦亡的检测 | 第54页 |
| 2.7.1 细胞凋亡的检测 | 第54页 |
| 2.7.2 乳酸脱氢酶的检测 | 第54页 |
| 2.8 细胞cleavedcaspase-1蛋白表达 | 第54-55页 |
| 3.统计学分析 | 第55页 |
| 4.试验结果 | 第55-66页 |
| 4.1 黄芩苷对 HPS 感染猪血管内皮细胞后培养上清液中 IL-1β、IL-18、TNF-α 释放的影响 | 第55-58页 |
| 4.2 黄芩苷对hps感染猪血管内皮细胞后il-1β、il-18、tnf-αmrna表达的影响 | 第58-60页 |
| 4.3 黄芩苷对 HPS 感染猪血管内皮细胞后 NLRP3/caspase-1 信号通路NLRP3、ASC、caspase-1 受体的 m RNA 表达的影响 | 第60-62页 |
| 4.4 黄芩苷对hps感染猪血管内皮细胞后ros生成的影响 | 第62-63页 |
| 4.5 黄芩苷对hps感染猪血管内皮细胞后细胞凋亡的影响 | 第63-64页 |
| 4.6 黄芩苷对hps感染猪血管内皮细胞后ldh释放的影响 | 第64-65页 |
| 4.7 黄芩苷对hps感染猪血管内皮细胞后cleavedcaspase-1(p20)蛋白表达的影响 | 第65-66页 |
| 5.讨论 | 第66-68页 |
| 第三章 结论与建议 | 第68-69页 |
| 1.主要结论 | 第68页 |
| 2.有待进一步研究的问题 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第78-79页 |
| 附录 | 第79-97页 |
