| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1.1 昆虫血细胞研究进展 | 第12-16页 |
| 1.1.1 昆虫血细胞类型及功能 | 第12-13页 |
| 1.1.2 昆虫造血作用 | 第13-14页 |
| 1.1.3 家蚕造血作用 | 第14-16页 |
| 1.2 整合素及昆虫整合素概述 | 第16-19页 |
| 1.2.1 整合素及其功能 | 第16-17页 |
| 1.2.2 昆虫整合素 | 第17-18页 |
| 1.2.3 家蚕整合素研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3 细胞鉴定的方法 | 第19-24页 |
| 第二章 引言 | 第24-28页 |
| 2.1 研究背景及意义 | 第24页 |
| 2.2 研究主要内容 | 第24-25页 |
| 2.2.1 家蚕整合素基因Bmintegrin β2的克隆及分析 | 第24-25页 |
| 2.2.2 家蚕整合素基因Bmintegrin β2原核表达及抗体制备 | 第25页 |
| 2.2.3 Bmintegrin β2在血液中的表达分析 | 第25页 |
| 2.2.4 浆细胞来源初步探究 | 第25页 |
| 2.3 研究技术路线 | 第25-28页 |
| 第三章 家蚕整合素基因Bmintegrin β2的全长克隆及分析 | 第28-48页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第28-31页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第28-29页 |
| 3.1.3 主要试剂及耗材 | 第29页 |
| 3.1.4 主要溶液及配制 | 第29-30页 |
| 3.1.5 引物 | 第30-31页 |
| 3.2 方法与步骤 | 第31-39页 |
| 3.2.1 主要数据库及软件 | 第31页 |
| 3.2.2 RNA的提取 | 第31-32页 |
| 3.2.3 cDNA的制备 | 第32-33页 |
| 3.2.4 cDNA的检测(A3检测) | 第33页 |
| 3.2.5 家蚕整合素基因Bmintegrin β2片段的PCR扩增 | 第33页 |
| 3.2.6 目的片段的回收 | 第33-34页 |
| 3.2.7 目的片段与载体的连接 | 第34页 |
| 3.2.8 转化 | 第34页 |
| 3.2.9 阳性克隆的筛选 | 第34-35页 |
| 3.2.10 目的基因的测序及鉴定 | 第35页 |
| 3.2.11 RACE模板的制备 | 第35-36页 |
| 3.2.12 家蚕整合素基因Bmintegrin β2 5'RACE和3'RACE扩增 | 第36-38页 |
| 3.2.13 家蚕整合素基因Bmintegrin β2序列分析 | 第38页 |
| 3.2.14 家蚕整合素基因Bmintegrin β2表达分析 | 第38-39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-46页 |
| 3.3.1 Bmintegrin β2的全长克隆及基因结构分析 | 第39-41页 |
| 3.3.2 Bmintegrin β2蛋白序列分析 | 第41-42页 |
| 3.3.3 序列比对分析 | 第42-43页 |
| 3.3.4 进化分析 | 第43-44页 |
| 3.3.5 整合素基因Bmintegrin β2各组织表达分析 | 第44-45页 |
| 3.3.6 整合素基因Bmintegrin β2胚胎各时期表达分析 | 第45页 |
| 3.3.7 整合素基因Bmintegrin β2幼虫各时期表达分析 | 第45-46页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 家蚕整合素基因Bmintegrin β2原核表达、蛋白纯化、抗体制备及检测 | 第48-58页 |
| 4.1 实验材料 | 第48-51页 |
| 4.1.1 主要材料 | 第48页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第48页 |
| 4.1.3 主要试剂及耗材 | 第48-49页 |
| 4.1.4 主要溶液配制 | 第49-50页 |
| 4.1.5 引物 | 第50-51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-54页 |
| 4.2.1 Bmintegrin β2原核表达载体的构建 | 第51页 |
| 4.2.2 原核诱导表达 | 第51-52页 |
| 4.2.3 重组蛋白质纯化 | 第52-53页 |
| 4.2.4 免疫血清制备 | 第53页 |
| 4.2.5 免疫血清特异性检测 | 第53页 |
| 4.2.6 免疫荧光染色检测 | 第53-54页 |
| 4.3 结果与分析 | 第54-57页 |
| 4.3.1 Bmintegrin β2原核表达质粒的鉴定 | 第54页 |
| 4.3.2 Bmintegrin β2原核诱导及蛋白纯化 | 第54-55页 |
| 4.3.3 抗Bmintegrin β2多克隆抗体制备及特异性检测 | 第55-56页 |
| 4.3.4 免疫荧光染色分析 | 第56-57页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第57-58页 |
| 第五章 Bmintegrin β2在循环血细胞和造血器官中的表达研究及家蚕幼虫浆细胞来源研究 | 第58-68页 |
| 5.1 实验材料与试剂 | 第58-59页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第58页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第58页 |
| 5.1.3 主要试剂及耗材 | 第58页 |
| 5.1.4 主要溶液配制 | 第58-59页 |
| 5.2 实验方法 | 第59-61页 |
| 5.2.1 EdU注射 | 第59页 |
| 5.2.2 循环血细胞爬片 | 第59页 |
| 5.2.3 EdU增殖检测 | 第59-60页 |
| 5.2.4 循环血细胞免疫荧光 | 第60页 |
| 5.2.5 造血器官剥离 | 第60页 |
| 5.2.6 造血器官免疫荧光 | 第60页 |
| 5.2.7 家蚕血清制备 | 第60页 |
| 5.2.8 家蚕幼虫造血器官体外培养 | 第60-61页 |
| 5.3 结果与分析 | 第61-67页 |
| 5.3.1 家蚕Bmintegrin β2在循环血细胞中的特异表达 | 第61页 |
| 5.3.2 不同时期循环血细胞中浆细胞表达情况 | 第61-63页 |
| 5.3.3 家蚕幼虫造血器官中浆细胞的表达 | 第63-64页 |
| 5.3.4 家蚕造血器官来源的浆细胞 | 第64页 |
| 5.3.5 家蚕幼虫浆细胞来源的初步探究 | 第64-67页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第67-68页 |
| 第六章 综合与结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 附录 | 第76-78页 |
| 硕士期间发表文章及课题参研情况 | 第78-80页 |
| 发表的论文 | 第78页 |
| 参研课题 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
