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具有抑草潜力的化感水稻根际黄色粘球菌的增殖机制研究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-21页
    1.1 化感作用的根际生物学特性第11-14页
        1.1.1 根际土壤微生物对化感物质的作用第12-13页
        1.1.2 化感物质对根际土壤微生物的影响第13-14页
    1.2 粘细菌的多细胞群体行为概述第14-18页
        1.2.1 粘细菌滑动运动的模式与机制第14-16页
        1.2.2 粘细菌的群体捕食行为第16-17页
        1.2.3 粘细菌的多细胞子实体发育过程第17-18页
    1.3 稳定同位素标记的蛋白质组相对定量方法概述第18-19页
    1.4 本研究的目的与科学意义第19-21页
2 试验材料第21-22页
    2.1 供试材料第21页
    2.2 主要试剂与试剂盒第21页
    2.3 实验设备第21-22页
3 试验方法第22-27页
    3.1 不同根系浸提液的生物测试及粘球菌的数量测定第22-24页
        3.1.1 供试水稻品种根系浸提液的制备第22页
        3.1.2 化感水稻根际黄色粘球菌的培养第22-23页
        3.1.3 不同化感潜力水稻品种根系浸提液的生物测试第23页
        3.1.4 土壤微生物总DNA的提取与纯化第23页
        3.1.5 粘球菌属微生物qPCR标准曲线的建立第23页
        3.1.6 不同浸提液处理稗草体系下粘球菌的数量测定第23页
        3.1.7 数据处理第23-24页
    3.2 外源酚酸诱导下粘细菌的生长变化与酚酸利用率动态测定第24页
        3.2.1 外源酚酸类物质诱导下黄色粘球菌的生长变化第24页
        3.2.2 黄色粘球菌对酚酸类物质的利用率测定第24页
    3.3 阿魏酸诱导下黄色粘球菌的蛋白组学分析第24-26页
        3.3.1 化感水稻根际特异黄色粘球菌的培养方法第24-25页
        3.3.2 阿魏酸诱导下黄色粘球菌菌体全蛋白样品的制备第25页
        3.3.3 阿魏酸诱导下黄色粘球菌发酵液的浓缩与分泌蛋白样品的制备第25页
        3.3.4 蛋白样品的浓度测定第25页
        3.3.5 蛋白样品的聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)单向电泳检测第25页
        3.3.6 蛋白样品的酶解第25页
        3.3.7 肽段的二甲基化标记第25页
        3.3.8 二甲基化标记样品的除盐处理第25页
        3.3.9 高效液相色谱分离与质谱分析第25页
        3.3.10 数据库查询与蛋白质鉴定第25-26页
    3.4 阿魏酸诱导下黄色粘球菌部分重要差异蛋白的qPCR验证第26-27页
        3.4.1 RNA样品的制备第26-27页
        3.4.2 cDNA的合成第27页
        3.4.3 qPCR检测第27页
4 结果与分析第27-48页
    4.1 不同根系浸提液的生物测试及粘球菌的数量测定结果第27-32页
        4.1.1 不同根系浸提液的生物测试结果第27-30页
        4.1.2 土壤微生物总DNA的提取与纯化第30页
        4.1.3 不同根系浸提液处理稗草体系下粘球菌的数量测定第30-32页
    4.2 酚酸诱导下粘细菌的生长变化与酚酸利用率第32-35页
        4.2.1 阿魏酸诱导下黄色粘球菌的生长变化与阿魏酸利用率第32-33页
        4.2.2 肉桂酸诱导下黄色粘球菌的生长变化与肉桂酸利用率第33-35页
    4.3 阿魏酸诱导下黄色粘球菌的蛋白组学分析第35-44页
        4.3.1 蛋白样品的1D-SDS-PAGE电泳检测第35-36页
        4.3.2 阿魏酸诱导下差异表达蛋白GO注释的聚类分析第36-38页
        4.3.3 不同浓度阿魏酸诱导下共同差异表达蛋白分析第38-44页
    4.4 阿魏酸诱导下黄色粘球菌部分关键差异蛋白的qPCR验证结果第44-48页
        4.4.1 RNA纯度和完整性检测结果第44页
        4.4.2 qRT-PCR扩增曲线与融解曲线分析第44-45页
        4.4.3 阿魏酸诱导下黄色粘球菌Frz家族各成员基因的差异表达分析第45-46页
        4.4.4 阿魏酸诱导下黄色粘球菌部分重要基因的差异表达分析第46-48页
5 讨论第48-55页
6 总结第55-56页
7 问题与展望第56-57页
参考文献第57-64页
附录Ⅰ 黄色粘球菌菌体全蛋白的提取方法第64页
附录Ⅱ 黄色粘球菌发酵液的浓缩与分泌蛋白样品的制备方法第64页
附录Ⅲ 蛋白样品的酶解方法第64-65页
附录Ⅳ 二甲基化标记的肽段样品的除盐方法第65-66页
致谢第66页

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