中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
缩略语 | 第12-16页 |
第一章 绪论 | 第16-24页 |
·研究背景及意义 | 第16-17页 |
·CD40-CD40L与AS | 第17-19页 |
·AS的发病机制 | 第17页 |
·CD40-CD40L简介 | 第17-18页 |
·CD40-CD40L与AS的关系 | 第18-19页 |
·siRNA在AS防治研究中的作用 | 第19-22页 |
·siRNA与RNAi简介 | 第19-21页 |
·siRNA阻断CD40-CD40L轴对AS形成的作用 | 第21-22页 |
·本论文研究的目的、方法、实验方案的设计 | 第22-24页 |
·研究目的 | 第22页 |
·研究方法 | 第22-23页 |
·实验设计 | 第23-24页 |
第二章 小鼠CD40基因为靶标的siRNA的合成和转染 | 第24-31页 |
·材料 | 第24-25页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24-25页 |
·实验动物 | 第25页 |
·方法 | 第25-27页 |
·siRNA设计合成 | 第25页 |
·小鼠脾淋巴细胞集 | 第25页 |
·高效转染方法的选择 | 第25-26页 |
·转染分组 | 第25-26页 |
·转染步骤 | 第26页 |
·细胞活性测定 | 第26页 |
·细胞生存状态观察 | 第26页 |
·荧光显微镜观察转染效果 | 第26页 |
·流式细胞仪检测转染效率 | 第26页 |
·统计学处理 | 第26-27页 |
·结果 | 第27-29页 |
·细胞活性测定 | 第27页 |
·细胞的生存状态观察 | 第27-28页 |
·荧光显微镜观察转染效果 | 第28页 |
·流式细胞仪检测转染效率 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29-31页 |
第三章 siRNA转染后CD40表面抗原表达水平、CD40 mRNA及蛋白表达 | 第31-48页 |
·材料 | 第31-34页 |
·主要试剂 | 第31-32页 |
·主要仪器 | 第32页 |
·主要溶液 | 第32-34页 |
·方法 | 第34-41页 |
·目的片段转染小鼠脾淋巴细胞 | 第34页 |
·流式细胞仪检测CD40表面抗原 | 第34页 |
·QRT-PCR检测CD40 mRNA量 | 第34-39页 |
·CD40及β-actin引物的设计合成 | 第34页 |
·PCR扩增目的基因 | 第34-36页 |
·目的基因标准质粒的构建 | 第36-38页 |
·目的基因标准曲线的建立 | 第38-39页 |
·Western blot检测CD40蛋白表达 | 第39-41页 |
·统计分析 | 第41页 |
·结果 | 第41-46页 |
·CD40表面抗原表达 | 第41页 |
·CD40 mRNA表达量 | 第41-45页 |
·CD40蛋白表达水平 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
第四章 主要结论及展望 | 第48-50页 |
·主要结论 | 第48页 |
·问题与展望 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
综述 | 第54-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第65页 |