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油菜种子发育过程中MATH结构域基因的干扰载体构建与转基因研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第一章 文献综述第9-18页
 1 植物脂肪酸的研究进展第9-10页
 2 MATH结构域蛋白第10-11页
 3 MATH结构域蛋白在动植物中的研究进展第11-13页
   ·在动物中的研究进展第11-13页
   ·在植物中的研究进展第13页
 4 RNAi的研究第13-16页
   ·RNAi的发现第14页
   ·RNAi作用机制第14-15页
   ·RNAi技术的应用第15-16页
 5 本研究的目的和意义第16-18页
第二章 BNAMT-1基因在种子不同发育时期的表达谱分析第18-21页
 1 材料与方法第18-19页
   ·材料第18页
     ·供试材料第18页
     ·分子生物学试剂第18页
   ·方法第18-19页
     ·RNA提取第18页
     ·RNA反转录成cDNA第18-19页
     ·设计特异性引物进行扩增第19页
 2 结果与分析第19-21页
   ·甘蓝型油菜Actin检测cDNA第19-20页
   ·BnaMT-1基因在甘蓝、白菜、油菜不同发育时期种子的表达谱分析第20-21页
第三章 BNAMT-1基因片段的克隆与RNA干扰载体的构建第21-29页
 1 材料与方法第21-25页
   ·材料第21页
     ·供试材料第21页
     ·菌株第21页
     ·载体与质粒第21页
     ·分子生物学试剂第21页
   ·方法第21-25页
     ·载体保存菌种活化与提取质粒第21-22页
     ·引物设计与BnaMT-1基因干扰片段的扩增第22页
     ·PCR产物回收(参照安比奥公司胶回收试剂盒说明)第22-23页
     ·PCR产物的测序和比对第23页
     ·干扰载体的构建第23-24页
     ·工程菌转化第24-25页
 2 结果与分析第25-29页
   ·BnaMT-1基因片段克隆与菌落PCR结果第25-26页
   ·测序结果的同源性比对第26-27页
   ·干扰载体的酶切验证结果第27-28页
   ·转化根癌农杆菌的质粒PCR检测结果第28-29页
第四章 湘油15的遗传转化及转化子的筛选第29-34页
 1 材料与方法第29-32页
   ·材料第29-30页
     ·供试品种第29页
     ·菌株和载体第29页
     ·培养基第29-30页
     ·抗生素第30页
   ·方法第30-32页
     ·PPT使用浓度的确定第30页
     ·甘蓝型油菜的遗传转化第30-31页
     ·转化子的筛选第31-32页
 2 结果与分析第32-34页
   ·抗性苗的PCR检测第32-33页
   ·外植体转化效率第33-34页
第五章 讨论第34-36页
 1 BnaMT-1基因在甘蓝、白菜、甘蓝型油菜中的表达第34页
 2 BnaMT-1基因干扰载体的构建第34-35页
 3 结论第35页
 4 下一步工作计划第35-36页
参考文献第36-41页
缩写表(ABBREVIATION)第41-42页
致谢第42-43页
作者简介第43页

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