| 学位论文数据集 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 绪论 | 第20-34页 |
| 1.1 四氯双酚A(TCBPA)的简介 | 第20-22页 |
| 1.1.1 环境污染现状概述 | 第20-21页 |
| 1.1.2 TCBPA的化学性质及其应用 | 第21页 |
| 1.1.3 TCBPA毒性危害及研究现状 | 第21页 |
| 1.1.4 低剂量TCBPA潜在的毒性危害 | 第21-22页 |
| 1.2 酿酒酵母 | 第22-23页 |
| 1.2.1 酿酒酵母简介 | 第22页 |
| 1.2.2 酿酒酵母在TCBPA毒性研究中所具有的优点 | 第22-23页 |
| 1.3 氧化损伤 | 第23-26页 |
| 1.3.1 活性氧简介及研究意义 | 第23-24页 |
| 1.3.2 脂质过氧化的研究意义及研究方法 | 第24-25页 |
| 1.3.3 线粒体膜电位变化的研究意义及研究方法 | 第25页 |
| 1.3.4 DNA损伤的研究意义及研究方法 | 第25-26页 |
| 1.4 酿酒酵母活性氧产生机制的探究 | 第26-28页 |
| 1.4.1 钙离子信号通路 | 第27-28页 |
| 1.4.2 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路 | 第28页 |
| 1.4.3 酪氨酸激酶信号通路 | 第28页 |
| 1.5 实时荧光定量PCR | 第28-30页 |
| 1.5.1 实时荧光定量PCR技术的基本原理 | 第29-30页 |
| 1.5.2 实时荧光定量PCR技术的应用 | 第30页 |
| 1.6 本课题的研究意义及研究内容 | 第30-34页 |
| 1.6.1 本课题的研究意义 | 第30-31页 |
| 1.6.2 本课题的研究内容 | 第31-34页 |
| 第二章 低剂量TCBPA对酿酒酵母生长的影响及膜损伤的评估 | 第34-42页 |
| 2.1 引言 | 第34页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第34-35页 |
| 2.2.1 实验所用到的菌株 | 第34页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第34页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第34-35页 |
| 2.2.4 培养基主要组成成分 | 第35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-37页 |
| 2.3.1 实验浓度及组别设定 | 第35页 |
| 2.3.2 不同低剂量TCBPA下酿酒酵母生物量的测定 | 第35-36页 |
| 2.3.3 不同低剂量TCBPA下酿酒酵母存活率的测定 | 第36页 |
| 2.3.4 不同低剂量TCBPA下酿酒酵母溶胀率的测定 | 第36-37页 |
| 2.4 实验结果 | 第37-40页 |
| 2.4.1 酿酒酵母在不同低剂量TCBPA条件下的生长情况 | 第37-39页 |
| 2.4.2 不同低剂量TCBPA对酿酒酵母存活率的影响 | 第39-40页 |
| 2.5 本章小结 | 第40-42页 |
| 第三章 低剂量TCBPA对酿酒酵母氧化损伤的评估 | 第42-54页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第42-43页 |
| 3.2.1 实验所用到的菌株 | 第42页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第42页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第42-43页 |
| 3.2.4 培养基主要成分 | 第43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-48页 |
| 3.3.1 不同低剂量TCBPA胁迫下酿酒酵母胞内活性氧(ROS)含量的检测 | 第43-44页 |
| 3.3.2 不同低剂量TCBPA对酿酒酵母脂质过氧化水平的评估 | 第44-45页 |
| 3.3.3 不同低剂量TCBPA对酿酒酵母线粒体膜电位的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.4 不同低剂量TCBPA对酿酒酵母DNA损伤的评估 | 第46-48页 |
| 3.4 实验结果 | 第48-53页 |
| 3.4.1 不同低剂量TCBPA下酿酒酵母活性氧含量的变化 | 第48-49页 |
| 3.4.2 不同低剂量TCBPA下酿酒酵母胞内MDA含量的测定 | 第49-50页 |
| 3.4.3 不同低剂量TCBPA对酿酒酵母线粒体膜电位的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.4 不同低剂量TCBPA下酿酒酵母DNA损伤的情况 | 第51-52页 |
| 3.4.5 不同低剂量TCBPA下酿酒酵母损伤与ROS之间的相关性分析 | 第52-53页 |
| 3.5 本章小结 | 第53-54页 |
| 第四章 TCBPA胁迫下酿酒酵母胞内产ROS相关通路的探究 | 第54-68页 |
| 4.1 引言 | 第54-55页 |
| 4.2 实验设备与材料 | 第55页 |
| 4.2.1 实验所使用的菌株 | 第55页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第55页 |
| 4.2.3 主要仪器 | 第55页 |
| 4.2.4 培养基组成成分 | 第55页 |
| 4.3 实验方法 | 第55-60页 |
| 4.3.1 NADPH氧化酶抑制条件酿酒酵母胞内活性氧含量的检测 | 第55-56页 |
| 4.3.2 EGTA及低浓度TCBPA条件下酿酒酵母胞内钙离子含量的测定 | 第56-57页 |
| 4.3.3 酿酒酵母在EGTA条件下胞内活性氧含量检测 | 第57-58页 |
| 4.3.4 钙调磷酸酶抑制条件下酿酒酵母胞内活性氧含量的测定 | 第58-59页 |
| 4.3.5 酿酒酵母胞敲除BKC1基因后胞内活性氧含量变化的测定 | 第59页 |
| 4.3.6 酿酒酵母胞敲除MCK1基因后胞内活性氧含量变化的测定 | 第59-60页 |
| 4.4 实验结果 | 第60-66页 |
| 4.4.1 酿酒酵母在NADPH氧化酶抑制条件胞内活性氧含量的变化 | 第60-61页 |
| 4.4.2 EGTA及低剂量TCBPA条件下酿酒酵母胞内钙离子含量的测定 | 第61-62页 |
| 4.4.3 酿酒酵母在EGTA条件下胞内活性氧含量检测 | 第62-63页 |
| 4.4.4 钙调磷酸激酶抑制条件下酿酒酵母胞内活性氧含量的测定 | 第63页 |
| 4.4.5 酿酒酵母胞敲除BKC1基因后胞内活性氧含量变化的测定 | 第63-64页 |
| 4.4.6 酿酒酵母胞敲除MCK1基因后胞内活性氧含量变化的测定 | 第64-65页 |
| 4.4.7 各ROS产生途径阻断条件下酿酒酵母胞胞内ROS变化对比 | 第65-66页 |
| 4.5 本章小结 | 第66-68页 |
| 第五章 基因水平分析与TCBPA诱导酿酒酵母细胞产生ROS相关的通路 | 第68-82页 |
| 5.1 引言 | 第68页 |
| 5.2 实验设备与材料 | 第68-69页 |
| 5.2.1 实验所使用的菌株 | 第68页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第68页 |
| 5.2.3 培养基基本组成 | 第68-69页 |
| 5.2.4 主要仪器设备 | 第69页 |
| 5.3 实验方法 | 第69-72页 |
| 5.3.1 分组设定及培养 | 第69页 |
| 5.3.2 酿酒酵母总RNA的提取 | 第69-70页 |
| 5.3.3 酿酒酵母RNA提取结果的测定 | 第70页 |
| 5.3.4 酿酒酵母cDNA的合成 | 第70-71页 |
| 5.3.5 利用qRT-PCR对目标基因的测定 | 第71-72页 |
| 5.4 实验结果 | 第72-80页 |
| 5.4.1 TCBPA对酿酒酵母活性氧产生相关关键酶基因表达的影响 | 第72-77页 |
| 5.4.2 TCBPA下酿酒酵母活性氧产生机制的分析 | 第77-79页 |
| 5.4.3 低剂量TCBPA对酿酒酵母细胞毒性的分析 | 第79-80页 |
| 5.5 本章小结 | 第80-82页 |
| 第六章 实验结论 | 第82-84页 |
| 6.1 实验结论 | 第82页 |
| 6.2 展望 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-92页 |
| 附录 | 第92-94页 |
| 仪器设备 | 第92-94页 |
| 致谢 | 第94-96页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第96-98页 |
| 作者和导师简介 | 第98-102页 |
| 附件 | 第102-103页 |
