中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
前言 | 第10-14页 |
一、乳腺癌转移与乳腺癌病人死亡 | 第10页 |
二、乳腺癌转移机制研究进展 | 第10-11页 |
三、SULF2的异常高表达与乳腺癌瘤转移密切相关 | 第11-12页 |
四、CT45A1作为原癌基因促进乳腺癌转移 | 第12-13页 |
五、拟解决的科学问题和研究策略 | 第13-14页 |
材料与方法 | 第14-33页 |
一、材料与试剂 | 第14-17页 |
1.1、细胞系 | 第14页 |
1.2、基因芯片 | 第14页 |
1.3、主要仪器 | 第14-15页 |
1.4、主要抗体 | 第15页 |
1.5、主要试剂 | 第15-17页 |
二、方法 | 第17-33页 |
2.1、主要试剂的配制 | 第17-20页 |
2.2、细胞培养 | 第20页 |
2.3、感受态细胞的制备 | 第20页 |
2.4、建立过表达CT45A1的MCF-7细胞株 | 第20-21页 |
2.5、CT45A1对MCF7细胞基因表达的作用 | 第21-25页 |
2.6、基因组DNA提取 | 第25页 |
2.7、CT45A1对相关蛋白表达的检测 | 第25-27页 |
2.8、细胞免疫荧光 | 第27页 |
2.9、Sp1抑制剂处理细胞 | 第27页 |
2.10、免疫共沉淀(IP) | 第27-28页 |
2.11、启动子重组载体的构建 | 第28-31页 |
2.12、核酸蛋白结合实验(斑点杂交) | 第31页 |
2.13、基因序列突变 | 第31页 |
2.14、Lipofectamine?2000试剂进行细胞转染 | 第31页 |
2.15、化学发光测定 | 第31-32页 |
2.16、甲基转移酶抑制剂处理细胞 | 第32页 |
2.17、生物信息学分析 | 第32页 |
2.18、统计学分析 | 第32-33页 |
结果 | 第33-42页 |
一、CT45A1促进乳腺癌细胞中肿瘤转移基因SULF2异常高表达 | 第33-34页 |
二、DNA去甲基化促进CT45A1和SULF2基因高表达 | 第34-35页 |
三、CT45A1促进SULF2转录的分子机制研究 | 第35-42页 |
讨论 | 第42-45页 |
一、SULF2与乳腺癌转移 | 第42页 |
二、SULF2异常高表达的调控机制 | 第42-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
综述 | 第50-65页 |
参考文献 | 第58-65页 |
攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文 | 第65-66页 |
中英文缩写词表 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |