中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-11页 |
第一章 引言 | 第15-18页 |
1.1 高血压血管重构 | 第15-16页 |
1.2 SCAD在心血管疾病中的研究现状 | 第16页 |
1.3 结语 | 第16-17页 |
1.4 研究思路 | 第17-18页 |
第二章 自发性高血压大鼠血压、血管形态学、主动脉中ROS的变化及游泳训练的影响 | 第18-26页 |
2.1 前言 | 第18页 |
2.2 实验材料 | 第18-20页 |
2.2.1 实验动物 | 第18页 |
2.2.2 主要药物与试剂 | 第18-19页 |
2.2.3 主要实验仪器和器材 | 第19页 |
2.2.4 主要试剂配制 | 第19-20页 |
2.3 实验方法 | 第20-21页 |
2.3.1 游泳耐力训练 | 第20页 |
2.3.2 大鼠收缩压的测定 | 第20页 |
2.3.3 实验动物取材 | 第20页 |
2.3.4 苏木素伊红(HE)染色 | 第20-21页 |
2.3.5 大鼠胸主动脉形态学检测 | 第21页 |
2.3.6 大鼠胸主动脉ROS含量检测 | 第21页 |
2.3.7 实验分组 | 第21页 |
2.3.8 统计学分析 | 第21页 |
2.4 实验结果 | 第21-24页 |
2.4.1 游泳耐力训练对大鼠收缩压的影响 | 第21-22页 |
2.4.2 游泳耐力训练对大鼠胸主动脉形态学的影响 | 第22-23页 |
2.4.3 游泳耐力训练对大鼠胸主动脉活性氧的影响 | 第23-24页 |
2.5 讨论 | 第24-26页 |
第三章 自发性高血压大鼠主动脉SCAD的表达变化及游泳训练的影响 | 第26-40页 |
3.1 前言 | 第26页 |
3.2 实验材料 | 第26-28页 |
3.2.1 实验动物 | 第26页 |
3.2.2 主要药物与试剂 | 第26-27页 |
3.2.3 主要实验仪器和器材 | 第27-28页 |
3.3 实验方法 | 第28-35页 |
3.3.1 游泳耐力训练 | 第28页 |
3.3.2 实验动物取材 | 第28页 |
3.3.3 胸主动脉组织总RNA提取和Real-timePCR | 第28-30页 |
3.3.4 SCAD蛋白表达变化检测 | 第30-32页 |
3.3.5 胸主动脉组织SCAD酶活性检测 | 第32-33页 |
3.3.6 游离脂肪酸含量测定 | 第33-34页 |
3.3.7 ATP含量测定 | 第34-35页 |
3.3.8 实验分组 | 第35页 |
3.3.9 统计学分析 | 第35页 |
3.4 实验结果 | 第35-39页 |
3.4.1 各组大鼠胸主动脉mRNA表达变化 | 第35-36页 |
3.4.2 各组大鼠胸主动脉SCAD蛋白表达的变化 | 第36-37页 |
3.4.3 各组大鼠胸主动脉SCAD的酶活性变化 | 第37页 |
3.4.4 各组大鼠血清及胸主动脉中游离脂肪酸含量的变化 | 第37-38页 |
3.4.5 各组大鼠胸主动脉ATP含量的变化 | 第38-39页 |
3.5 讨论 | 第39-40页 |
第四章 SCAD在tBHP诱导人脐静脉内皮细胞凋亡模型中的表达变化 | 第40-50页 |
4.1 前言 | 第40页 |
4.2 实验材料 | 第40-42页 |
4.2.1 实验组织 | 第40页 |
4.2.2 主要药物与试剂 | 第40-41页 |
4.2.3 主要实验仪器和器材 | 第41-42页 |
4.2.4 主要试剂配制 | 第42页 |
4.3 实验方法 | 第42-47页 |
4.3.1 人脐静脉内皮细胞原代培养 | 第42-43页 |
4.3.2 人脐静脉内皮细胞存活率检测 | 第43页 |
4.3.3 人脐静脉内皮细胞总RNA提取和Real-timePCR | 第43-45页 |
4.3.4 人脐静脉内皮细胞总蛋白提取和Westernblot分析 | 第45-46页 |
4.3.5 实验分组 | 第46-47页 |
4.3.6 统计学分析 | 第47页 |
4.4 实验结果 | 第47-48页 |
4.4.1 tBHP对人脐静脉内皮细胞存活率的影响 | 第47页 |
4.4.2 人脐静脉内皮细胞凋亡模型中SCAD的mRNA及蛋白表达变化 | 第47-48页 |
4.5 讨论 | 第48-50页 |
第五章 RNA干扰敲低SCAD基因对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响 | 第50-63页 |
5.1 前言 | 第50页 |
5.2 实验材料 | 第50-52页 |
5.2.1 实验组织 | 第50页 |
5.2.2 主要药物与试剂 | 第50-51页 |
5.2.3 主要实验仪器和器材 | 第51-52页 |
5.3 实验方法 | 第52-57页 |
5.3.1 人脐静脉内皮细胞原代培养 | 第52页 |
5.3.2 人脐静脉内皮细胞存活率检测 | 第52页 |
5.3.3 人脐静脉内皮细胞总RNA提取和Real-timePCR | 第52页 |
5.3.4 人脐静脉内皮细胞总蛋白提取和Westernblot分析 | 第52-53页 |
5.3.5 人脐静脉内皮细胞SCAD酶活性检测 | 第53页 |
5.3.6 siRNA干扰 | 第53-54页 |
5.3.7 人脐静脉内皮细胞DHE染色 | 第54页 |
5.3.8 人脐静脉内皮细胞中游离脂肪酸含量测定 | 第54-56页 |
5.3.9 AnnxinV-FITC/PI双染流式细胞术凋亡检测 | 第56页 |
5.3.10 ATP含量测定 | 第56-57页 |
5.3.11 实验分组 | 第57页 |
5.3.12 统计学分析 | 第57页 |
5.4 实验结果 | 第57-61页 |
5.4.1 siRNA干扰序列的筛选 | 第57-58页 |
5.4.2 siRNA679或tBHP对人脐静脉内皮细胞SCAD表达及游离脂肪酸含量的影响 | 第58-59页 |
5.4.3 siRNA679或tBHP对人脐静脉内皮细胞存活率和凋亡率的影响 | 第59-60页 |
5.4.4 siRNA679或tBHP对人脐静脉内皮细胞活性氧的影响 | 第60-61页 |
5.5 讨论 | 第61-63页 |
第六章 SCAD腺病毒过表达对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响 | 第63-72页 |
6.1 前言 | 第63页 |
6.2 实验材料 | 第63-65页 |
6.2.1 实验组织 | 第63页 |
6.2.2 主要药物与试剂 | 第63-64页 |
6.2.3 主要实验仪器和器材 | 第64-65页 |
6.3 实验方法 | 第65-67页 |
6.3.1 人脐静脉内皮细胞原代培养 | 第65页 |
6.3.2 人脐静脉内皮细胞存活率检测 | 第65页 |
6.3.3 人脐静脉内皮细胞总RNA提取和Real-timePCR | 第65页 |
6.3.4 人脐静脉内皮细胞总蛋白提取和Westernblot分析 | 第65页 |
6.3.5 人脐静脉内皮细胞SCAD酶活性检测 | 第65-66页 |
6.3.6 人脐静脉内皮细胞DHE染色 | 第66页 |
6.3.7 人脐静脉内皮细胞中游离脂肪酸含量测定 | 第66页 |
6.3.8 AnnxinV-FITC/PI双染流式细胞术凋亡检测 | 第66页 |
6.3.9 腺病毒转染 | 第66页 |
6.3.10 ATP含量测定 | 第66页 |
6.3.11 实验分组 | 第66-67页 |
6.3.12 统计学分析 | 第67页 |
6.4 实验结果 | 第67-71页 |
6.4.1 Ad-GFP和Ad-SCAD用量筛选结果 | 第67-68页 |
6.4.2 腺病毒与tBHP对SCAD的影响 | 第68-69页 |
6.4.3 腺病毒与tBHP对细胞存活率和凋亡率的影响 | 第69-70页 |
6.4.4 腺病毒与tBHP对人脐静脉内皮细胞活性氧的影响 | 第70-71页 |
6.5 讨论 | 第71-72页 |
总结与展望 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-78页 |
附录一 英文缩略词表 | 第78-79页 |
附录二 在硕士研究生期间完成的论文 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |