| 摘要 | 第6-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-19页 |
| 1.1 黑果枸杞的研究概述 | 第8-11页 |
| 1.1.1 黑果枸杞的抗逆性与繁殖 | 第8-9页 |
| 1.1.2 活性成分研究 | 第9-11页 |
| 1.2 花色苷与原花青素的次生代谢研究 | 第11-16页 |
| 1.2.1 花色苷与原花青素的生物合成途径 | 第11-13页 |
| 1.2.2 花色苷及原花青素代谢通路下游关键酶及其基因的研究 | 第13-16页 |
| 1.3 瞬时表达技术与植物病毒载体的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3.1 植物病毒载体的特点及构建 | 第16-17页 |
| 1.3.2 马铃薯X病毒表达载体 | 第17-18页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 黑果枸杞花色苷及原花青素生物合成关键酶基因的克隆及相关分析 | 第19-34页 |
| 2.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 试剂及缓冲液 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-22页 |
| 2.2.1 黑果枸杞RNA提取及cDNA合成 | 第19-20页 |
| 2.2.2 关键酶基因PCR扩增 | 第20-21页 |
| 2.2.3 PCR产物的纯化 | 第21页 |
| 2.2.4 连接、转化及重组鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.5 基因及编码蛋白的生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-31页 |
| 2.3.1 LrDFR、LrANS、LrLAR和LrANR基因序列分析 | 第22-23页 |
| 2.3.2 LrDFR、LrANS、LrLAR和LrANR蛋白结构及性质分析 | 第23-31页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第31-34页 |
| 2.4.1 核苷酸及氨基酸序列的差异性 | 第32页 |
| 2.4.2 酶蛋白结构域及活性位点的保守性 | 第32-34页 |
| 第三章 黑果枸杞中花青素及原花青素积累规律研究 | 第34-43页 |
| 3.1 材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第34页 |
| 3.1.2 试剂及缓冲液 | 第34页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 3.2 方法 | 第35-37页 |
| 3.2.1 黑果枸杞生长过程中花色苷的积累变化 | 第35页 |
| 3.2.2 黑果枸杞生长过程中原花青素的积累变化 | 第35-36页 |
| 3.2.3 黑果枸杞生长过程中关键酶基因的表达分析 | 第36-37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-41页 |
| 3.3.1 黑果枸杞生长过程中花色苷的代谢变化 | 第37-38页 |
| 3.3.2 黑果枸杞生长过程中原花青素的代谢变化 | 第38-39页 |
| 3.3.3 不同时期关键酶基因的表达分析 | 第39-41页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第41-43页 |
| 3.4.1 黑果枸杞中花色苷的积累代谢规律 | 第41-42页 |
| 3.4.2 黑果枸杞中原花青素的积累代谢规律 | 第42-43页 |
| 第四章 关键酶基因的病毒载体构建及其在烟草中的瞬时表达研究 | 第43-52页 |
| 4.1 材料 | 第43页 |
| 4.1.1 植物材料和菌种 | 第43页 |
| 4.1.2 试剂及缓冲液 | 第43页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第43页 |
| 4.2 方法 | 第43-47页 |
| 4.2.1 LrANS、LrLAR及LrANR基因的pMD18T载体质粒提取 | 第43-44页 |
| 4.2.2 瞬时表达载体的构建 | 第44-46页 |
| 4.2.3 重组质粒导入农杆菌 | 第46-47页 |
| 4.2.4 农杆菌浸染普通烟 | 第47页 |
| 4.2.5 瞬时表达烟草的花色苷及原花青素的含量测定 | 第47页 |
| 4.3 结果与分析 | 第47-50页 |
| 4.3.1 瞬时表达载体的构建结果 | 第47-50页 |
| 4.3.2 转化烟草中花色苷与原花青素的含量变化 | 第50页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第50-52页 |
| 4.4.1 LrANS-pGR107的瞬时表达分析 | 第50-51页 |
| 4.4.2 LrLAR-pGR107和LrANR-pGR107的瞬时表达分析 | 第51-52页 |
| 第五章 全文结论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| Abstract | 第60-61页 |
| 附录A: 本文所用主要缩写词及中英文对照 | 第62-63页 |
| 附录B: 本文所用的化学试剂和缓冲液的配制 | 第63-64页 |
| 附录C: 本文扩增获得的酶基因序列 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
