| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 综述 | 第12-17页 |
| 1.1 发菜简介 | 第12-13页 |
| 1.1.1 发菜分布和生境 | 第12页 |
| 1.1.2 发菜形态和繁殖方式 | 第12-13页 |
| 1.1.3 发菜生理 | 第13页 |
| 1.2 发菜的抗逆机制研究 | 第13-15页 |
| 1.2.1 胞外多糖 | 第13-14页 |
| 1.2.2 脂类 | 第14页 |
| 1.2.3 蛋白质 | 第14页 |
| 1.2.4 紫外吸收物质 | 第14-15页 |
| 1.3 部分其他陆生蓝藻抗逆研究进展 | 第15页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 第二章 wspa基因的克隆与进化分析 | 第17-25页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 材料与方法 | 第17-21页 |
| 2.2.1 发菜与地木耳材料 | 第17-18页 |
| 2.2.2 BG11培养基配制方法 | 第18-19页 |
| 2.2.3 发菜/地木耳基因组DNA提取 | 第19页 |
| 2.2.4 聚合酶链式反应(PCR)扩增wspa基因 | 第19-20页 |
| 2.2.5 WSPA进化分析及蛋白保守性分析 | 第20-21页 |
| 2.3 结果 | 第21-24页 |
| 2.3.1 WSPA蛋白进化分析 | 第21-22页 |
| 2.3.2 WSPA蛋白保守性和疏水性分析 | 第22-24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-25页 |
| 第三章 WSPA在发菜中的表达分析 | 第25-35页 |
| 3.1 引言 | 第25页 |
| 3.2 材料与方法 | 第25-28页 |
| 3.2.1 材料及处理 | 第25-26页 |
| 3.2.2 发菜RNA提取 | 第26-27页 |
| 3.2.3 发菜蛋白提取与定量分析 | 第27页 |
| 3.2.4 Western杂交分析 | 第27-28页 |
| 3.3 结果 | 第28-33页 |
| 3.3.1 不同产地发菜和地木耳中WSPA蛋白表达 | 第28-29页 |
| 3.3.2 液体发菜中WSPA蛋白检测及诱导 | 第29页 |
| 3.3.3 复水过程中WSPA的胞外释放 | 第29-30页 |
| 3.3.4 胁迫处理下天然发菜和液体培养发菜wspa转录变化 | 第30-32页 |
| 3.3.5 天然发菜复水和失水过程中wspa基因转录变化 | 第32-33页 |
| 3.4 讨论 | 第33-35页 |
| 第四章 WSPA的转运与抗逆功能研究 | 第35-45页 |
| 4.1 引言 | 第35-36页 |
| 4.2 材料与方法 | 第36-39页 |
| 4.2.1 菌株及质粒 | 第36-37页 |
| 4.2.2 wspa超表达质粒构建 | 第37页 |
| 4.2.3 超表达质粒转化HB101 | 第37-38页 |
| 4.2.4 三亲本杂交获得超表达藻株 | 第38页 |
| 4.2.5 激光共聚焦显微镜观察GFP荧光定位 | 第38-39页 |
| 4.2.6 Western杂交分析WSPA蛋白胞内外分布 | 第39页 |
| 4.2.7 wspa超表达藻株抗逆表型分析 | 第39页 |
| 4.3 结果 | 第39-43页 |
| 4.3.1 转基因藻株鉴定 | 第39-40页 |
| 4.3.2 超表达藻株中GFP定位 | 第40-41页 |
| 4.3.3 WSPA胞内外分布检测 | 第41-42页 |
| 4.3.4 wspa超表达藻株抗逆表型鉴定 | 第42-43页 |
| 4.4 讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 WSPA相互作用蛋白筛选 | 第45-51页 |
| 5.1 引言 | 第45页 |
| 5.2 材料与方法 | 第45-47页 |
| 5.2.1 材料 | 第45-46页 |
| 5.2.2 pBGKT7-WSPA载体构建 | 第46页 |
| 5.2.3 PGBKT7-WSPA转化AH109 | 第46-47页 |
| 5.2.4 发菜酵母文库质粒转化AH109/WS PA-pB GKT7 | 第47页 |
| 5.2.5 PCR扩增发生相互作用的基因片段 | 第47页 |
| 5.3 结果 | 第47-49页 |
| 5.3.1 发菜酵母文库筛选结果 | 第47-48页 |
| 5.3.2 生物信息学分析 | 第48-49页 |
| 5.4 讨论 | 第49-51页 |
| 总讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 在学期间撰写和发表的论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
