| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 猪伪狂犬病毒 | 第10-12页 |
| 1.1.1 PRV的基因组结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 PRV感染机制 | 第11-12页 |
| 1.2 蛋白质组学的研究技术 | 第12-17页 |
| 1.2.1 蛋白质组学在病毒学研究中的应用 | 第13页 |
| 1.2.2 同位素标记相对与绝对定量(iTRAQ)技术 | 第13-15页 |
| 1.2.3 iTRAQ技术的实验原理 | 第15-16页 |
| 1.2.4 iTRAQ的优势 | 第16-17页 |
| 1.3 PERK信号通路的调控机制 | 第17-20页 |
| 1.3.1 热休克蛋白HSP70家族 | 第17-18页 |
| 1.3.2 蛋白激酶R样内质网激酶 | 第18页 |
| 1.3.3 真核细胞起始因子 | 第18-19页 |
| 1.3.4 激活转录因子 | 第19-20页 |
| 1.4 细胞外调节蛋白激酶 | 第20-22页 |
| 第二章 PRV感染PK15细胞的蛋白质组学研究 | 第22-44页 |
| 2.1 研究目的与意义 | 第22页 |
| 2.2 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.2.1 细胞、毒株 | 第22页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.3 Westernblot抗体试剂 | 第23页 |
| 2.2.4 Westernblot主要缓冲液及试剂配置 | 第23-24页 |
| 2.2.5 主要实验仪器及材料 | 第24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-29页 |
| 2.3.1 细胞的复苏 | 第24页 |
| 2.3.2 猪伪狂犬病毒扩大培养 | 第24页 |
| 2.3.3 病毒滴度的测定 | 第24-25页 |
| 2.3.4 用于蛋白质组学分析的细胞样品制备 | 第25页 |
| 2.3.5 蛋白质的Bradford定量 | 第25-26页 |
| 2.3.6 细胞蛋白分离与消化并用iTRAQ标记 | 第26页 |
| 2.3.7 LC-MSMS分析 | 第26-27页 |
| 2.3.8 生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 2.3.9 免疫荧光实验 | 第28页 |
| 2.3.10 Westernblot实验 | 第28-29页 |
| 2.4 结果与分析 | 第29-39页 |
| 2.4.1 Bradford定量和SDS质检结果 | 第29-30页 |
| 2.4.2 PRV感染PK15细胞动力学分析 | 第30-32页 |
| 2.4.3 蛋白质的鉴定结果 | 第32-38页 |
| 2.4.4 差异蛋白的验证 | 第38-39页 |
| 2.5 讨论 | 第39-44页 |
| 2.5.1 参与代谢过程的差异表达蛋白 | 第40页 |
| 2.5.2 参与内质网蛋白质加工的差异表达蛋白 | 第40-41页 |
| 2.5.3 参与翻译的差异表达蛋白 | 第41-42页 |
| 2.5.4 参与mRNA前体剪接的差异表达蛋白 | 第42页 |
| 2.5.5 参与ECM-受体相互作用和细胞骨架的差异表达蛋白 | 第42-43页 |
| 2.5.6 其它差异表达的蛋白 | 第43-44页 |
| 第三章 PRV感染激活内质网应激信号通路的分子机制 | 第44-49页 |
| 3.1 研究的目的与意义 | 第44页 |
| 3.2 实验材料 | 第44页 |
| 3.2.1 主要试剂(同2.2.2) | 第44页 |
| 3.2.2 主要实验仪器及设备(同2.2.5) | 第44页 |
| 3.3 实验方法 | 第44-45页 |
| 3.3.1 细胞的复苏(同2.3.1) | 第44页 |
| 3.3.2 PRV感染PK15细胞 | 第44-45页 |
| 3.3.3 细胞总蛋白的提取 | 第45页 |
| 3.3.4 BCA蛋白浓度测定 | 第45页 |
| 3.4 结果与分析 | 第45-49页 |
| 3.4.1 蛋白质的BCA测定结果 | 第45-46页 |
| 3.4.2 Westernblot分析结果 | 第46-47页 |
| 3.4.3 讨论 | 第47-49页 |
| 实验结果 | 第49页 |
| 下一步研究计划 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 个人简介 | 第57-58页 |
| 硕士期间发表论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
