| 缩略词表 | 第7-9页 |
| 中文摘要 | 第9-13页 |
| 英文摘要 | 第13-18页 |
| 前言 | 第19-22页 |
| 实验材料 | 第22-25页 |
| 一、实验主要材料 | 第22-23页 |
| 二、实验主要设备 | 第23-25页 |
| 实验方法 | 第25-34页 |
| 一、重组腺病毒KGHV500、KGHV400的扩增、纯化与滴度测定，对脑胶质瘤U251细胞的最佳感染复数 | 第25-27页 |
| 1 HEK293细胞培养和传代 | 第25页 |
| 2 重组腺病毒的扩增、纯化、鉴定 | 第25-26页 |
| 3 TCID50法测定重组腺病毒KGHV400、KGHV500的滴度 | 第26-27页 |
| 4 重组腺病毒KGHV500、KGHV400对脑胶质瘤U251细胞的最佳感染复数 | 第27页 |
| 二、体外实验检测KGHV500对脑胶质瘤U251细胞生物学特性和活力的影响 | 第27-29页 |
| 1 免疫组化Envision法检测U251细胞膜上CD46蛋白表达 | 第27页 |
| 2 电镜观察KGHV500、KGHV400感染U251脑胶质瘤细胞 | 第27页 |
| 3 细胞划痕实验检测KGHV500对U251脑胶质瘤细胞迁移能力的影响 | 第27-28页 |
| 4 MTT比色分析法检测KGHV500对脑胶质瘤细胞的杀伤作用 | 第28页 |
| 5 Transwell实验检测KGHV500对脑胶质瘤细胞侵袭能力的影响 | 第28页 |
| 6 TUNEL检测脑胶质瘤细胞凋亡 | 第28-29页 |
| 三、CIK细胞的分离制备、培养和鉴定、KGHV500感染CIK细胞效率测定以及电镜观察 | 第29-30页 |
| 1 CIK细胞的分离制备与培养 | 第29页 |
| 2 免疫组化Envision法检测CIK细胞表面CD46蛋白表达 | 第29-30页 |
| 3 免疫组化Envision法鉴定CIK细胞（CIK细胞表面CD3、CD56蛋白表达） | 第30页 |
| 4 免疫组化检测感染KGHV500的CIK细胞表面的病毒六邻体的表达 | 第30页 |
| 5 KGHV500、KGHV400感染CIK细胞电镜观察 | 第30页 |
| 四、体内实验检测CIK细胞携带KGHV500对移植瘤生长的影响 | 第30-33页 |
| 1 人脑胶质瘤细胞系U251裸鼠移植瘤模型的建立 | 第30页 |
| 2 尾静脉注射携带KGHV500的CIK细胞治疗成瘤裸鼠 | 第30-31页 |
| 3 动态监测裸鼠移植瘤生长大小 | 第31页 |
| 4 裸鼠肿瘤组织及各脏器组织的HE切边制片与观察 | 第31页 |
| 5 免疫组化检测KGHV500及抗p21Ras单链抗体在移植瘤内的表达 | 第31-32页 |
| 6 免疫组化检测腺病毒在裸鼠体内各脏器组织的表达 | 第32页 |
| 7 TUNEL检测各分组肿瘤组织细胞凋亡 | 第32页 |
| 8 Western Blot检测脑胶质瘤移植瘤组织中单链抗体蛋白的表达 | 第32-33页 |
| 9 实时荧光定量PCR检测裸鼠移植瘤组织基因表达量 | 第33页 |
| 五、统计学方法 | 第33-34页 |
| 实验结果 | 第34-62页 |
| 一、重组腺病毒KGHV500、KGHV400的扩增、鉴定、纯化、滴度测定以及对U251细胞的MOI测定 | 第34-38页 |
| 1 HEK293细胞培养和传代 | 第34页 |
| 2 重组腺病毒KGHV500、KGHV400的扩增 | 第34-36页 |
| 3 重组腺病毒KGHV500、KGHV400的滴度测定 | 第36-37页 |
| 4 重组腺病毒KGHV500、KGHV400感染脑胶质瘤U251细胞的最佳MOI测定 | 第37-38页 |
| 二、体外实验检测KGHV500对脑胶质瘤细胞株生物学特性和活力的影响 | 第38-44页 |
| 1 免疫组化Envision法检测U251细胞膜上CD46蛋白表达 | 第38页 |
| 2 电镜观察KGHV500、KGHV40感染U251脑胶质瘤细胞 | 第38-39页 |
| 3 细胞划痕实验检测KGHV500对U251脑胶质瘤细胞迁移能力的影响 | 第39-40页 |
| 4 MTT比色分析法检测KGHV500对脑胶质瘤细胞的杀伤作用 | 第40-41页 |
| 5 Transwell实验检测KGHV500对脑胶质瘤细胞侵袭能力的影响 | 第41-42页 |
| 6 TUNEL检测脑胶质瘤细胞凋亡 | 第42-44页 |
| 三、CIK细胞的分离制备、培养、鉴定及KGHV500感染CIK效率测定 | 第44-48页 |
| 1 CIK细胞的分离制备、培养 | 第44-45页 |
| 2 免疫组化Envision法检测CIK细胞表面CD46蛋白表达 | 第45-46页 |
| 3 免疫组化Envision法鉴定CIK细胞（CIK细胞表面CD3、CD56蛋白表达） | 第46页 |
| 4 免疫组化检测感染KGHV500的CIK细胞表面的病毒六邻体的表达 | 第46-47页 |
| 5 KGHV500、KGHV400感染CIK细胞电镜观察 | 第47-48页 |
| 四、体内实验检测CIK细胞携带KGHV500对裸鼠移植瘤的影响 | 第48-62页 |
| 1 建立人脑胶质瘤细胞系U251裸鼠移植瘤模型 | 第48页 |
| 2 尾静脉注射携带KGHV500的CIK细胞治疗成瘤裸鼠 | 第48-49页 |
| 3 动态监测裸鼠移植瘤生长并记录大小 | 第49-51页 |
| 4 裸鼠移植瘤及各脏器组织的剖取及病理切片制作 | 第51-53页 |
| 5 免疫组化检测腺病毒六邻体及抗p21Ras单链抗体在裸鼠移植瘤内的表达 | 第53-55页 |
| 6 免疫组化检测腺病毒六邻体在裸鼠各脏器组织中的表达分布 | 第55-58页 |
| 7 TUNEL检测各分组肿瘤组织细胞凋亡 | 第58-59页 |
| 8 Western Blot检测脑胶质瘤移植瘤组织中单链抗体蛋白的表达 | 第59-60页 |
| 9 实时荧光定量PCR检测肿瘤组织基因表达量 | 第60-62页 |
| 讨论 | 第62-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 附录 | 第70-102页 |
| 综述 | 第102-109页 |
| 参考文献 | 第106-109页 |
| 攻读学位期间发表文章 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
