| 术语及缩略语表 | 第8-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11页 |
| 第1章 绪论 | 第12-30页 |
| 1.1 几丁质酶的研究概况 | 第12-23页 |
| 1.1.1 几丁质 | 第12页 |
| 1.1.2 几丁质酶概述 | 第12-14页 |
| 1.1.3 几丁质酶的分子生物学研究 | 第14-22页 |
| 1.1.4 几丁质酶在水生生态毒理学中的应用 | 第22-23页 |
| 1.2 枝角类隆线溞和老年低额溞的简介 | 第23-24页 |
| 1.3 抗原的制备 | 第24-25页 |
| 1.3.1 天然抗原的制备 | 第25页 |
| 1.3.2 基因工程抗原的制备 | 第25页 |
| 1.3.3 人工合成多肽抗原的制备 | 第25页 |
| 1.4 抗体的制备方法 | 第25-27页 |
| 1.4.1 常规血清技术(多克隆抗体制备技术) | 第26页 |
| 1.4.2 杂交瘤技术(单克隆抗体技术) | 第26页 |
| 1.4.3 基因工程抗体技术 | 第26页 |
| 1.4.4 抗体库技术 | 第26-27页 |
| 1.5 酶联免疫吸附测定技术 | 第27-28页 |
| 1.5.1 间接法测定抗体 | 第27页 |
| 1.5.2 双抗体夹心法测抗原 | 第27页 |
| 1.5.3 竞争法测抗原 | 第27-28页 |
| 1.6 本研究的立题依据和研究的主要内容 | 第28-30页 |
| 1.6.1 研究的目的意义(立题依据) | 第28-29页 |
| 1.6.2 研究的主要内容 | 第29页 |
| 1.6.3 研究的预期目标 | 第29-30页 |
| 第2章 隆线淄和老年低额溞几丁质酶基因的克隆 | 第30-52页 |
| 2.1 材料与方法 | 第30-44页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第30-33页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第33-39页 |
| 2.1.3 RACE扩增几丁质酶基因全长 | 第39-42页 |
| 2.1.4 几丁质酶全长序列的获得和其对应蛋白的预测 | 第42页 |
| 2.1.5 基因组DNA的提取和两种酶几丁质酶DNA的扩增 | 第42-44页 |
| 2.2 结果与分析 | 第44-46页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第44页 |
| 2.2.2 几丁质酶部分基因序列的获得 | 第44-45页 |
| 2.2.3 几丁质酶全长基因的获得 | 第45页 |
| 2.2.4 两种几丁质酶基因结构的特性 | 第45-46页 |
| 2.3 序列预测及序列分析 | 第46-50页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第50-52页 |
| 2.4.1 小结 | 第50页 |
| 2.4.2 讨论 | 第50-52页 |
| 第3章 隆线溞几丁质酶人工多肽的设计及多克隆抗体的制备 | 第52-68页 |
| 3.1 试验材料 | 第52-53页 |
| 3.1.1 试验试剂 | 第52页 |
| 3.1.2 试验仪器与设备 | 第52-53页 |
| 3.1.3 ELISA缓冲液 | 第53页 |
| 3.2 试验方法 | 第53-56页 |
| 3.2.1 人工多肽的设计 | 第53-54页 |
| 3.2.2 抗体的制备 | 第54-55页 |
| 3.2.3 间接非竞争ELISA方法 | 第55-56页 |
| 3.3 试验结果 | 第56-67页 |
| 3.3.1 多肽的设计 | 第56-60页 |
| 3.3.2 抗体制备结果 | 第60-61页 |
| 3.3.3 间接非竞争ELISA方法结果 | 第61-67页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第67-68页 |
| 3.4.1 小结 | 第67页 |
| 3.4.2 讨论 | 第67-68页 |
| 第4章 隆线溞几丁质酶多克隆抗体特异性研究 | 第68-78页 |
| 4.1 试验材料 | 第68-70页 |
| 4.1.1 试验生物 | 第68-69页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第69页 |
| 4.1.3 ELISA缓冲液 | 第69页 |
| 4.1.4 试验仪器 | 第69-70页 |
| 4.2 试验方法 | 第70-71页 |
| 4.2.1 隆线溞及其他节肢动物体内几丁质酶制备 | 第70页 |
| 4.2.2 隆线溞及其他节肢动物水中几丁质酶液制备 | 第70页 |
| 4.2.3 不同水生生物体内、水中游离几丁质酶活的测定 | 第70页 |
| 4.2.4 隆线溞几丁质酶多克隆抗体的特异性测定 | 第70-71页 |
| 4.3 结果与分析 | 第71-76页 |
| 4.3.1 酶活力标准曲线 | 第71页 |
| 4.3.2 四种多克隆抗体对体内几丁质酶酶液的特异性比较分析 | 第71-74页 |
| 4.3.3 四种多克隆抗体对水中游离几丁质酶液的特异性分析 | 第74-76页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第76-78页 |
| 4.4.1 小结 | 第76-77页 |
| 4.4.2 讨论 | 第77-78页 |
| 第5章 总结 | 第78-83页 |
| 5.1 隆线溞和老年低额溞几丁质酶基因全长的克隆获得 | 第78-79页 |
| 5.2 人工多肽的设计和多克隆抗体的制备 | 第79-80页 |
| 5.3 多克隆抗体的特异性研究 | 第80-81页 |
| 5.4 主要创新点 | 第81页 |
| 5.5 不足和展望 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
