摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第16-29页 |
1.1 木质素降解利用 | 第16-19页 |
1.1.1 木质纤维素 | 第16页 |
1.1.2 真菌是木质纤维素重要的的降解者 | 第16-19页 |
1.2 热激转录因子(HSF) | 第19-23页 |
1.2.0 热胁迫 | 第19-20页 |
1.2.1 热激转录因子的结构域特征 | 第20-21页 |
1.2.2 热激蛋白-热激转录因子的重要靶点 | 第21-22页 |
1.2.3 热激转录因子生理功能 | 第22页 |
1.2.4 热激转录因子调控机制 | 第22-23页 |
1.3 选择性剪接调控的研究进展 | 第23-27页 |
1.3.1 选择性剪接的模式 | 第23-25页 |
1.3.2 选择性剪接的调控机制 | 第25页 |
1.3.3 选择性剪接的应用 | 第25-26页 |
1.3.4 选择性剪接检测方法 | 第26-27页 |
1.4 本文研究的内容及意义 | 第27-29页 |
1.4.1 研究意义 | 第27-28页 |
1.4.2 研究内容 | 第28-29页 |
第二章 毛栓菌S0301同核体菌株的快速鉴定及产漆酶能力比较 | 第29-41页 |
2.1 材料与方法 | 第29-32页 |
2.1.1 菌株 | 第29页 |
2.1.2 试剂 | 第29页 |
2.1.3 培养基 | 第29页 |
2.1.4 主要仪器和设备 | 第29-30页 |
2.1.5 菌种的活化 | 第30页 |
2.1.6 T.trogiiS0301总DNA的提取 | 第30页 |
2.1.7 引物设计 | 第30-31页 |
2.1.8 原生质体的制备与再生 | 第31-32页 |
2.1.9 菌丝培养及再生单菌菌株锁状联合观察 | 第32页 |
2.1.10 再生同核和异核菌株的分子验证 | 第32页 |
2.1.11 再生单菌菌丝生长和产漆酶能力比较 | 第32页 |
2.2 结果 | 第32-38页 |
2.2.1 再生菌株的显微观察 | 第32-36页 |
2.2.2 交配型基因的克隆及基因分析 | 第36页 |
2.2.3 菌株交配型的分子鉴定分析 | 第36-37页 |
2.2.4 同核体和异核体菌株菌落形态及产漆酶能力比较 | 第37-38页 |
2.3 讨论 | 第38-39页 |
2.4 小结 | 第39-41页 |
第三章 毛栓菌S0301热激转录因子HSFs的克隆及序列分析 | 第41-53页 |
3.1 材料与方法 | 第41-45页 |
3.1.1 菌株与载体 | 第41页 |
3.1.2 试剂 | 第41页 |
3.1.3 培养基 | 第41页 |
3.1.4 主要仪器和设备 | 第41-42页 |
3.1.5 菌种的培养 | 第42页 |
3.1.6 HSF,HSF2,HSF3克隆验证 | 第42-43页 |
3.1.7 HSF2基因的克隆 | 第43-45页 |
3.2 结果 | 第45-51页 |
3.2.1 T.trogiiS0301中热激转录因子HSF2的克隆及鉴定 | 第45-47页 |
3.2.2 T.trogiiS0301中HSF2不同转录本之间的比较 | 第47-48页 |
3.2.3 T.trogiiS0301中热激转录因子HSF2氨基酸序列分析 | 第48-51页 |
3.3 讨论 | 第51页 |
3.4 小结 | 第51-53页 |
第四章 HSF2不同ORF的原核表达及多克隆抗体制备 | 第53-72页 |
4.1 材料与方法 | 第53-61页 |
4.1.1 菌株与载体 | 第53页 |
4.1.2 试剂 | 第53页 |
4.1.3 培养基 | 第53页 |
4.1.4 主要仪器和设备 | 第53-54页 |
4.1.5 主要溶液的配制 | 第54-55页 |
4.1.6 HSF2-1不同ORF序列及HSF2-2的克隆 | 第55-56页 |
4.1.7 表达载体pDE1的构建 | 第56-57页 |
4.1.8 E.coliRosetta转化及重组子筛选 | 第57页 |
4.1.9 阳性转化子的验证 | 第57页 |
4.1.10 重组蛋白的诱导表达及条件优化 | 第57-58页 |
4.1.11 SDS-PAGE操作步骤 | 第58页 |
4.1.12 重组蛋白的纯化 | 第58-59页 |
4.1.13 包涵体变性 | 第59页 |
4.1.14 重组蛋白免疫过程 | 第59页 |
4.1.15 多克隆抗体的western-blot检测 | 第59-60页 |
4.1.16 菌的活化与热激 | 第60页 |
4.1.17 毛栓菌S0301总蛋白提取及HSF的抗体识别 | 第60-61页 |
4.1.18 总蛋白中HSF2的鉴定 | 第61页 |
4.2 结果 | 第61-70页 |
4.2.1 HSF2-ORF1,HSF2-ORF2和HSF2-ORF3克隆及转化验证 | 第61-62页 |
4.2.2 原核表达载体的构建 | 第62页 |
4.2.3 重组蛋白诱导表达 | 第62-65页 |
4.2.4 重组蛋白多克隆抗体制备 | 第65-66页 |
4.2.5 T.trogiiS0301总蛋白的提取及方法优化 | 第66-67页 |
4.2.6 总蛋白中HSF2的鉴定 | 第67-68页 |
4.2.7 在不同热激条件下 T. trogii S0301 异核体和同核体 19 | 第68-70页 |
4.3 讨论 | 第70-71页 |
4.4 小结 | 第71-72页 |
第五章 总结与展望 | 第72-75页 |
5.1 结论 | 第72-74页 |
5.2 展望 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-86页 |
附录 | 第86-88页 |