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耐热毛栓菌S0301同核体鉴定及热激转录因子HSF2多克隆抗体制备

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
第一章 绪论第16-29页
    1.1 木质素降解利用第16-19页
        1.1.1 木质纤维素第16页
        1.1.2 真菌是木质纤维素重要的的降解者第16-19页
    1.2 热激转录因子(HSF)第19-23页
        1.2.0 热胁迫第19-20页
        1.2.1 热激转录因子的结构域特征第20-21页
        1.2.2 热激蛋白-热激转录因子的重要靶点第21-22页
        1.2.3 热激转录因子生理功能第22页
        1.2.4 热激转录因子调控机制第22-23页
    1.3 选择性剪接调控的研究进展第23-27页
        1.3.1 选择性剪接的模式第23-25页
        1.3.2 选择性剪接的调控机制第25页
        1.3.3 选择性剪接的应用第25-26页
        1.3.4 选择性剪接检测方法第26-27页
    1.4 本文研究的内容及意义第27-29页
        1.4.1 研究意义第27-28页
        1.4.2 研究内容第28-29页
第二章 毛栓菌S0301同核体菌株的快速鉴定及产漆酶能力比较第29-41页
    2.1 材料与方法第29-32页
        2.1.1 菌株第29页
        2.1.2 试剂第29页
        2.1.3 培养基第29页
        2.1.4 主要仪器和设备第29-30页
        2.1.5 菌种的活化第30页
        2.1.6 T.trogiiS0301总DNA的提取第30页
        2.1.7 引物设计第30-31页
        2.1.8 原生质体的制备与再生第31-32页
        2.1.9 菌丝培养及再生单菌菌株锁状联合观察第32页
        2.1.10 再生同核和异核菌株的分子验证第32页
        2.1.11 再生单菌菌丝生长和产漆酶能力比较第32页
    2.2 结果第32-38页
        2.2.1 再生菌株的显微观察第32-36页
        2.2.2 交配型基因的克隆及基因分析第36页
        2.2.3 菌株交配型的分子鉴定分析第36-37页
        2.2.4 同核体和异核体菌株菌落形态及产漆酶能力比较第37-38页
    2.3 讨论第38-39页
    2.4 小结第39-41页
第三章 毛栓菌S0301热激转录因子HSFs的克隆及序列分析第41-53页
    3.1 材料与方法第41-45页
        3.1.1 菌株与载体第41页
        3.1.2 试剂第41页
        3.1.3 培养基第41页
        3.1.4 主要仪器和设备第41-42页
        3.1.5 菌种的培养第42页
        3.1.6 HSF,HSF2,HSF3克隆验证第42-43页
        3.1.7 HSF2基因的克隆第43-45页
    3.2 结果第45-51页
        3.2.1 T.trogiiS0301中热激转录因子HSF2的克隆及鉴定第45-47页
        3.2.2 T.trogiiS0301中HSF2不同转录本之间的比较第47-48页
        3.2.3 T.trogiiS0301中热激转录因子HSF2氨基酸序列分析第48-51页
    3.3 讨论第51页
    3.4 小结第51-53页
第四章 HSF2不同ORF的原核表达及多克隆抗体制备第53-72页
    4.1 材料与方法第53-61页
        4.1.1 菌株与载体第53页
        4.1.2 试剂第53页
        4.1.3 培养基第53页
        4.1.4 主要仪器和设备第53-54页
        4.1.5 主要溶液的配制第54-55页
        4.1.6 HSF2-1不同ORF序列及HSF2-2的克隆第55-56页
        4.1.7 表达载体pDE1的构建第56-57页
        4.1.8 E.coliRosetta转化及重组子筛选第57页
        4.1.9 阳性转化子的验证第57页
        4.1.10 重组蛋白的诱导表达及条件优化第57-58页
        4.1.11 SDS-PAGE操作步骤第58页
        4.1.12 重组蛋白的纯化第58-59页
        4.1.13 包涵体变性第59页
        4.1.14 重组蛋白免疫过程第59页
        4.1.15 多克隆抗体的western-blot检测第59-60页
        4.1.16 菌的活化与热激第60页
        4.1.17 毛栓菌S0301总蛋白提取及HSF的抗体识别第60-61页
        4.1.18 总蛋白中HSF2的鉴定第61页
    4.2 结果第61-70页
        4.2.1 HSF2-ORF1,HSF2-ORF2和HSF2-ORF3克隆及转化验证第61-62页
        4.2.2 原核表达载体的构建第62页
        4.2.3 重组蛋白诱导表达第62-65页
        4.2.4 重组蛋白多克隆抗体制备第65-66页
        4.2.5 T.trogiiS0301总蛋白的提取及方法优化第66-67页
        4.2.6 总蛋白中HSF2的鉴定第67-68页
        4.2.7 在不同热激条件下 T. trogii S0301 异核体和同核体 19 第68-70页
    4.3 讨论第70-71页
    4.4 小结第71-72页
第五章 总结与展望第72-75页
    5.1 结论第72-74页
    5.2 展望第74-75页
致谢第75-76页
参考文献第76-86页
附录第86-88页

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