| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-20页 |
| 1.1 引言 | 第9页 |
| 1.2 抗体 | 第9-12页 |
| 1.2.1 抗体的结构 | 第9-10页 |
| 1.2.2 抗体药物的发展应用 | 第10页 |
| 1.2.3 抗体的分离纯化 | 第10-12页 |
| 1.3 亲和层析 | 第12-14页 |
| 1.3.1 亲和层析技术的原理 | 第12页 |
| 1.3.2 亲和层析介质 | 第12-13页 |
| 1.3.3 用于抗体纯化的亲和层析 | 第13-14页 |
| 1.4 链球菌蛋白G | 第14-18页 |
| 1.4.1 SPG的基因结构 | 第15页 |
| 1.4.2 SPG的免疫球蛋白结合域 | 第15-16页 |
| 1.4.3 SPG的结合特性 | 第16-17页 |
| 1.4.4 SPG的研究与应用 | 第17-18页 |
| 1.5 立题意义与研究内容 | 第18-20页 |
| 1.5.1 立题意义 | 第18-19页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-30页 |
| 2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 菌种与质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.3 酶与试剂 | 第21页 |
| 2.2 重组基因的设计与表达体系的构建 | 第21-23页 |
| 2.2.1 重组蛋白G结构的设计 | 第21-22页 |
| 2.2.2 E.coliBL21(DE3)/pET21a-G表达体系的构建 | 第22-23页 |
| 2.3 重组蛋白的表达与纯化 | 第23-26页 |
| 2.3.1 重组蛋白诱导表达验证 | 第23页 |
| 2.3.2 重组蛋白表达条件的确定 | 第23-24页 |
| 2.3.3 重组蛋白的纯化 | 第24-25页 |
| 2.3.4 重组蛋白的进一步处理 | 第25-26页 |
| 2.4 亲和层析介质的制备 | 第26-27页 |
| 2.4.1 偶联条件的优化 | 第26-27页 |
| 2.4.2 静态吸附实验 | 第27页 |
| 2.5 高载量亲和层析介质的筛选 | 第27-28页 |
| 2.6 高载量亲和介质性能测定与纯化应用 | 第28-30页 |
| 2.6.1 动态吸附载量 | 第28页 |
| 2.6.2 重复使用性能测定 | 第28页 |
| 2.6.3 层析介质的纯化应用 | 第28-30页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第30-49页 |
| 3.1 重组菌的构建 | 第30-31页 |
| 3.1.1 重组菌的设计构建 | 第30页 |
| 3.1.2 重组菌的酶切验证 | 第30-31页 |
| 3.1.3 小结 | 第31页 |
| 3.2 重组蛋白的诱导表达 | 第31-35页 |
| 3.2.1 重组菌的诱导表达验证 | 第31-32页 |
| 3.2.2 接种量对蛋白表达情况的影响 | 第32-33页 |
| 3.2.3 诱导时的菌体密度对蛋白表达情况的影响 | 第33-34页 |
| 3.2.4 IPTG浓度对蛋白表达情况的影响 | 第34页 |
| 3.2.5 诱导时间对蛋白表达情况影响 | 第34-35页 |
| 3.2.6 小结 | 第35页 |
| 3.3 重组蛋白的纯化 | 第35-37页 |
| 3.3.1 纯化条件的优化 | 第35-36页 |
| 3.3.2 重组蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| 3.3.3 小结 | 第37页 |
| 3.4 亲和层析介质的制备 | 第37-43页 |
| 3.4.1 偶联缓冲液pH | 第38-39页 |
| 3.4.2 偶联反应的温度 | 第39-40页 |
| 3.4.3 偶联反应的时间 | 第40-42页 |
| 3.4.4 蛋白的浓度 | 第42-43页 |
| 3.4.5 小结 | 第43页 |
| 3.5 高载量层析介质的筛选 | 第43-45页 |
| 3.5.1 层析介质的静态吸附 | 第43-44页 |
| 3.5.2 小结 | 第44-45页 |
| 3.6 自制亲和层析介质性能测定与应用 | 第45-49页 |
| 3.6.1 动态吸附载量 | 第45页 |
| 3.6.2 重复使用性能 | 第45-46页 |
| 3.6.3 分离纯化的应用 | 第46-48页 |
| 3.6.4 小结 | 第48-49页 |
| 结论与展望 | 第49-51页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 展望 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57页 |