| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 一 引言 | 第11-20页 |
| 1.1 甜瓜简介 | 第11-12页 |
| 1.1.1 甜瓜的基本特性 | 第11页 |
| 1.1.2 甜瓜基因组学研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 ACC合成酶的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.1 ACC合成酶的生化特性及结构特征 | 第12-13页 |
| 1.2.2 植物ACC合成酶进化分析 | 第13页 |
| 1.2.3 植物ACC合成酶功能的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3 基因组编辑技术的发展及应用前景 | 第14-15页 |
| 1.3.1 基因组编辑技术概述 | 第14页 |
| 1.3.2 基因组编辑技术的发展历程 | 第14-15页 |
| 1.4 CRISPR/Cas系统概述 | 第15-19页 |
| 1.4.1 CRISPR/Cas系统的研究历史 | 第15-16页 |
| 1.4.2 CRISPR/Cas系统的分类 | 第16页 |
| 1.4.3 CRISPR/Cas9系统的工作原理 | 第16-18页 |
| 1.4.4 CRISPR/Cas9系统在植物中的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 本研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 二 材料和方法 | 第20-30页 |
| 2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 菌种与质粒 | 第21页 |
| 2.2 方法 | 第21-30页 |
| 2.2.1 甜瓜ACS基因家族成员的鉴定 | 第21页 |
| 2.2.2 生物信息学分析 | 第21-22页 |
| 2.2.3 ACS基因家族成员的表达特性分析 | 第22页 |
| 2.2.4 CmACS7和CmACS11基因全长cDNA的RT-PCR扩增 | 第22-24页 |
| 2.2.5 连接及转化 | 第24页 |
| 2.2.6 CRISPR-Cas9载体的构建 | 第24-27页 |
| 2.2.7 超表达载体的构建 | 第27页 |
| 2.2.8 甜瓜的遗传转化 | 第27-28页 |
| 2.2.9 T_1代转化植株的检测 | 第28-30页 |
| 三 结果与分析 | 第30-50页 |
| 3.1 甜瓜ACS基因家族成员的鉴定与分析 | 第30-36页 |
| 3.1.1 序列比对及系统发生分析 | 第30-32页 |
| 3.1.2 甜瓜ACS基因家族成员的基因结构分析 | 第32-33页 |
| 3.1.3 甜瓜ACS基因家族启动子序列分析 | 第33-36页 |
| 3.2 ACS基因家族成员的表达特性分析 | 第36-39页 |
| 3.3 CmACS7和CmACS11基因全长cDNA的克隆 | 第39-41页 |
| 3.4 基因编辑载体的构建 | 第41-44页 |
| 3.4.1 基因组靶位点选择和接头引物设计 | 第41-42页 |
| 3.4.2 gRNA表达盒的构建 | 第42-43页 |
| 3.4.3 pCRI-ACS重组质粒的筛选 | 第43-44页 |
| 3.5 超表达载体的构建 | 第44-46页 |
| 3.5.1 重组质粒的PCR鉴定 | 第44-45页 |
| 3.5.2 重组质粒的酶切鉴定 | 第45-46页 |
| 3.6 ACS基因遗传转化及转基因植株检测 | 第46-50页 |
| 3.6.1 甜瓜的遗传转化 | 第46-47页 |
| 3.6.2 T_1代转化植株的检测 | 第47-50页 |
| 四 讨论 | 第50-52页 |
| 4.1 ACS基因家族成员的鉴定与分析 | 第50页 |
| 4.2 CRISPR/Cas9技术对CmACS7和CmACS11基因的初步应用 | 第50-52页 |
| 五 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
