| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-26页 |
| 综述一 马立克氏病与马立克氏病病毒的研究进展 | 第12-23页 |
| 1. MID的演变 | 第12页 |
| 2. MDV在体内的感染过程 | 第12-14页 |
| 3. MD感染水平的影响因素 | 第14-15页 |
| 4. MDV的致病因子与致病机理 | 第15-17页 |
| 5. 宿主的抗感染免疫应答 | 第17-20页 |
| 6. MD疫苗的使用和MDV病毒的进化 | 第20-21页 |
| 7. 遗传育种 | 第21-23页 |
| 综述二 UL14蛋白的研究进展 | 第23-26页 |
| 1. UL14蛋白对病毒复制的影响 | 第23页 |
| 2. UL14蛋白调节病毒被膜和衣壳结构蛋白的核转位功能 | 第23-24页 |
| 3. UL14蛋白的类热休克蛋白功能 | 第24页 |
| 4. UL14蛋白的抗凋亡作用 | 第24-26页 |
| 研究内容 一 马立克氏病病毒基因在鸡胸腺组织中的转录表达 | 第26-35页 |
| 摘要 | 第26-27页 |
| 1. 材料 | 第27页 |
| 1.1 病毒、实验动物 | 第27页 |
| 1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 1.3 主要仪器 | 第27页 |
| 2. 方法 | 第27-29页 |
| 2.1 动物实验 | 第27页 |
| 2.2 总RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.3 总RNA纯化 | 第28页 |
| 2.4 样品RNA的放大和标记 | 第28-29页 |
| 2.5 芯片杂交 | 第29页 |
| 2.6 结果扫描 | 第29页 |
| 2.7 UL14基因分析 | 第29页 |
| 3. 结果 | 第29-33页 |
| 3.1 MDV基因转录表达图谱 | 第29-30页 |
| 3.2 UL14基因分析结果 | 第30-33页 |
| 4. 讨论 | 第33-35页 |
| 研究内容二 UL14蛋白的原核表达及多抗血清的制备 | 第35-48页 |
| 摘要 | 第35页 |
| 1. 材料 | 第35-37页 |
| 1.1 菌株、病毒与细胞 | 第35-36页 |
| 1.2 试剂与载体 | 第36页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第36页 |
| 1.4 主要培养基与试剂的配制 | 第36页 |
| 1.5 主要仪器 | 第36-37页 |
| 1.6 引物的设计合成 | 第37页 |
| 2. 方法 | 第37-41页 |
| 2.1 目的基因UL14的扩增 | 第37页 |
| 2.2 PCR产物的回收与纯化 | 第37-38页 |
| 2.3 感受态细胞的制备 | 第38页 |
| 2.4 目的片段与pGEM-T-easy载体的连接转化 | 第38-39页 |
| 2.5 重组质粒pGEM-T-UL14的筛选与鉴定 | 第39-40页 |
| 2.6 原核表达载体的构建 | 第40页 |
| 2.7 UL14蛋白的原核表达 | 第40页 |
| 2.8 融合蛋白的纯化 | 第40页 |
| 2.9 SDS-PAGE电泳及Western blot分析 | 第40-41页 |
| 2.10 制备抗UL14多抗血清 | 第41页 |
| 2.11 IFA鉴定抗UL14多抗血清的反应性 | 第41页 |
| 3. 结果 | 第41-45页 |
| 3.1 UL14基因的扩增与鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2 重组质粒pET-32a-UL14的酶切鉴定 | 第42-43页 |
| 3.3 融合蛋白的表达 | 第43-44页 |
| 3.4 融合蛋白的纯化及Western blot分析 | 第44-45页 |
| 3.5 IFA和Western blot检测多抗血清的反应性 | 第45页 |
| 4. 讨论 | 第45-48页 |
| 研究内容三 UL14在马立克氏病病毒感染CEF细胞及鸡组织内的变化规律 | 第48-56页 |
| 摘要 | 第48-49页 |
| 1. 材料 | 第49页 |
| 1.1 病毒、细胞及实验动物 | 第49页 |
| 1.2 主要试剂 | 第49页 |
| 1.3 引物设计与合成 | 第49页 |
| 1.4 主要仪器 | 第49页 |
| 2. 方法 | 第49-51页 |
| 2.1 总RNA的提取 | 第49-50页 |
| 2.2 实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第50页 |
| 2.3 感染细胞中基因水平的检测 | 第50页 |
| 2.4 Western blot检测感染细胞中蛋白水平的变化 | 第50页 |
| 2.5 不同感染组织中基因表达水平检测 | 第50-51页 |
| 3. 结果 | 第51-54页 |
| 3.1 实时荧光定量PCR的特异性 | 第51页 |
| 3.2 实时荧光定量PCR的重复性 | 第51-52页 |
| 3.3 CEF细胞中基因表达水平 | 第52-53页 |
| 3.4 MDV感染的CEF细胞中蛋白表达水平 | 第53页 |
| 3.5 不同感染组织中基因表达水平 | 第53-54页 |
| 4. 讨论 | 第54-56页 |
| 全文总结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第66-67页 |
