| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1.前言 | 第11-18页 |
| 1.1 肝脏的结构 | 第11页 |
| 1.2 肝脏的功能 | 第11-12页 |
| 1.3 脂肪肝的现状及危害 | 第12-13页 |
| 1.4 脂肪肝产生的原因 | 第13-14页 |
| 1.5 Men1基因的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.5.1 Men1基因 | 第14页 |
| 1.5.2 Menin蛋白 | 第14-15页 |
| 1.5.3 Menin的生物学功能 | 第15页 |
| 1.5.4 Menin与脂肪肝的关系 | 第15-16页 |
| 1.6 胰岛素及葡萄糖对肝脏脂代谢的影响 | 第16-17页 |
| 1.7 研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 2.材料与方法 | 第18-36页 |
| 2.1 实验材料、仪器和试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第18页 |
| 2.1.3 主要实验试剂及来源 | 第18页 |
| 2.1.4 常用试剂的配制 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法与内容 | 第19-36页 |
| 2.2.1 小鼠正常肝脏细胞NCTC-1469的培养与鉴定 | 第19-21页 |
| 2.2.2 Men1基因过表达体系的建立 | 第21-27页 |
| 2.2.3 siRNA的构建 | 第27页 |
| 2.2.4 重组质粒pcDNA3.1-MycHis-(A)-mMen1转染小鼠正常肝脏细胞 | 第27-29页 |
| 2.2.5 mRNA水平上检测pcDNA3.1-MycHis-mMen1过表达效果和siRNA干扰效果 | 第29-31页 |
| 2.2.6 将RNA样品进行转录组测序分析 | 第31-34页 |
| 2.2.7 胰岛素及葡萄糖对小鼠正常肝细胞内Men1基因及其他相关基因表达的影响 | 第34-35页 |
| 2.2.8 统计分析 | 第35-36页 |
| 3.实验结果 | 第36-60页 |
| 3.1 小鼠正常肝脏细胞系NCTC-1469细胞的生物学性状检测 | 第36-37页 |
| 3.1.1 NCTC-1469细胞的形态观察 | 第36页 |
| 3.1.2 NCTC-1469细胞生长曲线的绘制 | 第36-37页 |
| 3.2 小鼠Men1基因真核表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 3.2.1 Men1基因PCR扩增结果 | 第37页 |
| 3.2.2 重组质粒的菌落PCR鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2.3 重组质粒的酶切鉴定 | 第38页 |
| 3.2.4 重组质粒的测序鉴定 | 第38页 |
| 3.3 NCTC-1469细胞转染重组质粒最佳条件的确定 | 第38-39页 |
| 3.4 NCTC-1469细胞转染siRNA最佳条件的确定 | 第39-40页 |
| 3.5 对Men1基因干扰效果/过表达效果最好的RNA样品进行转录组测序分析 | 第40-55页 |
| 3.5.1 Men1过表达组的转录组测序结果分析 | 第41-47页 |
| 3.5.2 Men1低表达组的转录组测序结果分析 | 第47-55页 |
| 3.6 胰岛素及葡萄糖对小鼠正常肝脏细胞内Men1基因及其他相关基因表达的影响 | 第55-60页 |
| 3.6.1 胰岛素对小鼠正常肝脏细胞内Men1基因及其他相关基因表达的影响 | 第55-57页 |
| 3.6.2 葡萄糖对小鼠正常肝脏细胞内Men1基因及其他相关基因表达的影响 | 第57-60页 |
| 4.讨论 | 第60-64页 |
| 4.1 Menin蛋白及小鼠正常肝脏细胞NCTC-1469的应用 | 第60页 |
| 4.2 胰岛素及葡萄糖对肝脏代谢的影响 | 第60-62页 |
| 4.3 Men1/Menin在肝脏代谢中的作用 | 第62-64页 |
| 5.结论与研究展望 | 第64-66页 |
| 5.1 结论 | 第64页 |
| 5.2 创新点 | 第64页 |
| 5.3 研究展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
