摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略词 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-21页 |
1.1 引言 | 第9页 |
1.2 DUF677家族研究进展 | 第9-11页 |
1.2.1 整合素的结构与功能 | 第10-11页 |
1.2.2 类整合素的研究 | 第11页 |
1.3 水稻OsU496A生物信息学分析 | 第11-19页 |
1.3.1 OsU496A表达特异性分析 | 第11-15页 |
1.3.2 OsU496A功能相关蛋白网络的构建 | 第15-18页 |
1.3.3 OsU496A表达相互作用网络 | 第18-19页 |
1.4 OsU496A与水稻胚乳发育 | 第19-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-28页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 载体与菌种 | 第21页 |
2.1.3 分子试剂与仪器 | 第21页 |
2.1.4 引物订购与测序 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-28页 |
2.2.1 载体构建方法 | 第22-24页 |
2.2.2 重组载体酶切验证 | 第24-25页 |
2.2.3 干扰表达和过表达重组载体转化农杆菌 | 第25页 |
2.2.4 根癌农杆菌介导的水稻转化 | 第25页 |
2.2.5 转基因植株鉴定 | 第25-26页 |
2.2.5.1 PCR鉴定 | 第25页 |
2.2.5.2 GUS染色鉴定 | 第25-26页 |
2.2.6 水稻原生质体瞬时表达方法 | 第26-27页 |
2.2.7 荧光定量PCR方法 | 第27-28页 |
2.2.7.1 水稻幼苗的培养与胁迫处理 | 第27页 |
2.2.7.2 总RNA提取及cDNA第一链合成 | 第27页 |
2.2.7.3 荧光定量PCR体系 | 第27-28页 |
第三章 结果与分析 | 第28-40页 |
3.1 OsU496A同源序列与系统进化树分析 | 第28-30页 |
3.1.1 OsU496A序列同源性分析 | 第28-29页 |
3.1.2 OsU496A系统进化树分析 | 第29-30页 |
3.2 表达载体的构建和转基因株系的获得 | 第30-36页 |
3.2.1 OsU496A干扰表达片段的克隆 | 第30页 |
3.2.2 重组载体pTCK303-iU496A的构建 | 第30-31页 |
3.2.3 OsU496A过表达目的片段的克隆 | 第31-32页 |
3.2.4 重组载体pTCK303-OsU496A的构建 | 第32-33页 |
3.2.5 重组载体酶切鉴定 | 第33页 |
3.2.6 重组载体转化农杆菌 | 第33-34页 |
3.2.7 农杆菌介导的水稻转基因的获得 | 第34页 |
3.2.8 转基因植株鉴定 | 第34-36页 |
3.3 OsU496A瞬时表达定位 | 第36-37页 |
3.3.1 OsU496A的克隆与pXZP-U496A重组载体鉴定 | 第36页 |
3.3.2 OsU496A瞬时表达定位 | 第36-37页 |
3.4 OsU496A的表达分析 | 第37-40页 |
3.4.1 种子发育过程中OsU496A的表达分析 | 第37-38页 |
3.4.2 种子萌发过程中OsU496A的表达分析 | 第38-39页 |
3.4.3 渗透胁迫对OsU496A表达量的影响 | 第39页 |
3.4.4 ABA处理对OsU496A表达量的影响 | 第39-40页 |
第四章 总结与展望 | 第40-43页 |
4.1 总结 | 第40-41页 |
4.2 讨论 | 第41-42页 |
4.3 展望 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
附录 | 第47-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第54-55页 |