| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 第一章 纤维素酶及其来源生物研究进展 | 第13-36页 |
| 1.1 纤维素分子结构和降解方法 | 第13-14页 |
| 1.1.1 纤维素的分子构造 | 第13-14页 |
| 1.1.2 纤维素的降解方法 | 第14页 |
| 1.2 纤维素酶的分子研究 | 第14-16页 |
| 1.3 产纤维素酶的生物研究 | 第16-31页 |
| 1.3.1 产纤维素酶细菌种类及其研究 | 第16-21页 |
| 1.3.2 产纤维素酶真菌种类及其研究 | 第21-28页 |
| 1.3.3 产纤维素酶动物种类及其研究 | 第28-31页 |
| 1.4 纤维素酶研究现状和展望 | 第31-35页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第35-36页 |
| 第二章 白蚁种属及其产纤维素酶细菌的分离鉴定 | 第36-45页 |
| 2.1 材料 | 第36-37页 |
| 2.1.1 供试白蚁 | 第36页 |
| 2.1.2 培养基和试剂配制 | 第36-37页 |
| 2.1.3 主要试剂及耗材 | 第37页 |
| 2.2 方法 | 第37-39页 |
| 2.2.1 白蚁种属的鉴定 | 第37页 |
| 2.2.2 菌株的筛选和鉴定 | 第37-38页 |
| 2.2.3 葡萄糖标准曲线的绘制及纤维素酶活力的测定方法 | 第38页 |
| 2.2.4 不同菌株不同条件所产酶活性的测定 | 第38-39页 |
| 2.3 结果与分析 | 第39-43页 |
| 2.3.1 白蚁种属的分离鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3.2 菌株的筛选和鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3.3 标准曲线的绘制 | 第41页 |
| 2.3.4 不同菌株不同条件所产酶活性的测定 | 第41-42页 |
| 2.3.5 C4菌株的产纤维素酶条件和酶学性质 | 第42-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-44页 |
| 2.5 小结 | 第44-45页 |
| 第三章 纤维素酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 | 第45-51页 |
| 3.1 材料 | 第45页 |
| 3.1.1 不同试剂的配制 | 第45页 |
| 3.1.2 主要试剂及耗材 | 第45页 |
| 3.2 方法 | 第45-47页 |
| 3.2.1 纤维素酶基因的扩增 | 第45-46页 |
| 3.2.2 纤维素酶基因与载体的连接 | 第46页 |
| 3.2.3 纤维素酶基因的诱导表达 | 第46-47页 |
| 3.2.4 原核表达产物酶学性质测定 | 第47页 |
| 3.3 结果与分析 | 第47-49页 |
| 3.3.1 目的菌株纤维素酶基因的扩增与测序 | 第47页 |
| 3.3.2 目的菌株纤维素酶基因的原核表达 | 第47-48页 |
| 3.3.3 原核表达产物的酶学性质测定 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-50页 |
| 3.5 小结 | 第50-51页 |
| 第四章 表达纤维素酶的重组乳酸杆菌的构建 | 第51-61页 |
| 4.1 材料 | 第51页 |
| 4.2 方法 | 第51-53页 |
| 4.2.1 目的片段的扩增 | 第51-52页 |
| 4.2.2 重组质粒pLEM-P_(32)SPCbs的构建 | 第52页 |
| 4.2.3 重组乳酸杆菌RpLEM-P_(32)SPCbs的构建与重组蛋白的SDS-PAGE检测 | 第52-53页 |
| 4.2.4 重组蛋白部分酶学性质研究 | 第53页 |
| 4.3 结果与分析 | 第53-58页 |
| 4.3.1 重组质粒pLEM-P_(32)SPCbs的构建 | 第53-54页 |
| 4.3.2 纤维素酶基因Cbs2在罗伊乳酸杆菌中的表达 | 第54-55页 |
| 4.3.3 重组菌RpLEM-P_(32)SPCbs的生长特性与产酶特性 | 第55-57页 |
| 4.3.4 重组酶的酶学性质 | 第57-58页 |
| 4.4 讨论 | 第58-59页 |
| 4.5 小结 | 第59-61页 |
| 第五章 重组乳酸杆菌对粗饲料的发酵效果研究 | 第61-63页 |
| 5.1 材料 | 第61页 |
| 5.1.1 培养基和试剂配制 | 第61页 |
| 5.1.2 主要仪器和耗材 | 第61页 |
| 5.2 方法 | 第61页 |
| 5.3 结果与分析 | 第61-62页 |
| 5.4 讨论 | 第62页 |
| 5.5 小结 | 第62-63页 |
| 第六章 结论、创新点以及需要进一步研究的问题 | 第63-65页 |
| 6.1 结论 | 第63页 |
| 6.2 创新点 | 第63-64页 |
| 6.3 需要进一步研究的问题 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 附录 | 第75-83页 |
| 附录1 应用滤袋技术测定粗纤维洗涤(CF)的方法 | 第75-76页 |
| 附录2 细菌基因组DNA提取方法 | 第76-77页 |
| 附录3 制备大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第77页 |
| 附录4 制备罗伊氏乳酸杆菌感受态细胞方法 | 第77页 |
| 附录5 化学转化至大肠杆菌方法 | 第77-78页 |
| 附录6 化学转化至大肠杆菌方法 | 第78页 |
| 附录7 TAKARA切胶回收方法 | 第78-79页 |
| 附录8 TAKARApMD19-T载体使用方法 | 第79页 |
| 附录9 基因序列 | 第79-81页 |
| 附录10 酶活计算方法 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 作者简介 | 第84页 |
