| 符号说明 | 第4-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 MicroRNA 的研究进展 | 第11-17页 |
| 1.1.1 miRNA 的基本特征及作用机制 | 第11-12页 |
| 1.1.2 miRNA 的鉴定 | 第12-13页 |
| 1.1.3 miRNA 靶基因的预测及验证 | 第13-15页 |
| 1.1.4 乳腺发育及泌乳相关 miRNA 的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.1.5 miR-135a 的在动物中的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2 乳腺发育、泌乳及退化相关功能基因及通路 | 第17-19页 |
| 1.2.1 GO 注释与 KEGG 注释 | 第17-18页 |
| 1.2.2 JAK-STAT 信号通路 | 第18-19页 |
| 1.3 PRLR 研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 本研究的目的意义 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-40页 |
| 2.1 数据挖掘与分析 | 第21-23页 |
| 2.1.1 试验数据 | 第21页 |
| 2.1.2 主要数据库及生物分析软件 | 第21-22页 |
| 2.1.3 差异表达 miRNA 的筛选与聚类 | 第22页 |
| 2.1.4 差异表达 miRNA 的靶基因的预测 | 第22-23页 |
| 2.1.5 miRNA 及靶基因的生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.2 分子试验材料与方法 | 第23-40页 |
| 2.2.1 菌株、载体和细胞 | 第23页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.2.3 主要试剂及来源 | 第24-25页 |
| 2.2.4 常用试剂的配置 | 第25页 |
| 2.2.5 miR-135a 真核表达载体及 PRLR 报告基因载体构建 | 第25-31页 |
| 2.2.6 重组载体去内毒素质粒提取 | 第31-32页 |
| 2.2.7 乳腺上皮细胞转染 | 第32-33页 |
| 2.2.8 荧光定量 PCR 检测 mir-135a 及 PRLR 基因表达量 | 第33-36页 |
| 2.2.9 双荧光素酶报告基因系统验证 miR-135a 与 PRLR 靶向关系 | 第36-37页 |
| 2.2.10 Western blot 检验 PRLR 蛋白表达量变化 | 第37-39页 |
| 2.2.11 统计分析 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-56页 |
| 3.1 miRNA 表达谱的数据挖掘及生物信息学分析 | 第40-45页 |
| 3.1.1 差异表达 miRNA 的筛选与聚类 | 第40页 |
| 3.1.2 差异表达 miRNA 的靶基因预测 | 第40-42页 |
| 3.1.3 miRNA 靶基因的生物信息学分析 | 第42-45页 |
| 3.2 miR-135a 与 PRLR 靶向关系分析 | 第45-56页 |
| 3.2.1 miR-135a 靶基因的生物信息学预测 | 第45-46页 |
| 3.2.2 miR-135a 真核表达载体及 PRLR 报告基因载体构建 | 第46-51页 |
| 3.2.3 荧光定量 PCR 检测 mir-135a 及其靶基因 PRLR 表达量 | 第51-53页 |
| 3.2.4 双荧光素酶报告基因系统验证 miR-135a 与 PRLR 靶向关系 | 第53-54页 |
| 3.2.6 miR-135a 对 PRLR 蛋白表达的影响 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-60页 |
| 4.1 乳腺发育过程中 miRNA 的表达模式与其功能的相关性 | 第56页 |
| 4.2 miRNA 靶基因预测及其功能预测的关系 | 第56-57页 |
| 4.3 乳腺发育及泌乳相关的 miRNA 及其靶基因 | 第57-59页 |
| 4.4 miR-135a 对乳腺发育及泌乳的调节作用 | 第59-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附录 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第75页 |
