致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
目次 | 第7-8页 |
1 引言 | 第8-20页 |
1.1 Pif1解旋酶的发现和演化 | 第8-9页 |
1.2 Pif1解旋酶家族成员 | 第9-20页 |
1.2.1 酿酒酵母ScPif1 | 第9-17页 |
1.2.2 酿酒酵母ScRrm3 | 第17页 |
1.2.3 裂殖酵母SpPfh1 | 第17页 |
1.2.4 布氏锥虫TbPif1 | 第17-18页 |
1.2.5 人类hPif1 | 第18页 |
1.2.6 小鼠mPif1 | 第18-20页 |
2 材料和方法 | 第20-39页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 实验材料 | 第20页 |
2.1.2 实验试剂 | 第20-21页 |
2.1.3 实验仪器 | 第21页 |
2.2 方法 | 第21-39页 |
2.2.1 试剂配制 | 第21-22页 |
2.2.2 基因克隆 | 第22-28页 |
2.2.3 目的基因鉴定 | 第28-30页 |
2.2.4 蛋白表达 | 第30-31页 |
2.2.5 蛋白纯化 | 第31-34页 |
2.2.6 检测蛋白与核酸结合能力 | 第34-35页 |
2.2.7 蛋白结晶 | 第35-38页 |
2.2.8 数据收集和处理 | 第38-39页 |
3 结果和讨论 | 第39-67页 |
3.1 蛋白表达与纯化 | 第39-52页 |
3.1.1 mPif1的表达与纯化 | 第39-43页 |
3.1.2 ScPif1的表达与纯化 | 第43-47页 |
3.1.3 SpPfh1的表达与纯化 | 第47-49页 |
3.1.4 hPif1的表达与纯化 | 第49-52页 |
3.2 结晶与优化 | 第52-64页 |
3.2.1 hPif1的结晶与优化 | 第52-54页 |
3.2.2 hPif1与DNA复合物的结晶与优化 | 第54-60页 |
3.2.3 hPif1与DNA-RNA复合物的结晶与优化 | 第60-64页 |
3.3 数据收集与处理 | 第64-67页 |
4 结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-72页 |
作者简历及科研成果 | 第72页 |