缩略词及中英文对照表 | 第8-10页 |
摘要 | 第10-11页 |
Abstract | 第11页 |
第一章 前言 | 第12-30页 |
1.1 Ras的研究背景 | 第12-21页 |
1.1.1 G蛋白 | 第12页 |
1.1.2 Ras蛋白超家族 | 第12-14页 |
1.1.3 Rab蛋白家族的研究背景 | 第14-21页 |
1.2 RalGDS的背景介绍 | 第21-25页 |
1.2.1 RalGDS的结构 | 第21-23页 |
1.2.2 RalGDS的功能研究进展 | 第23-25页 |
1.3 RILP的背景简介 | 第25-29页 |
1.3.1 RILP的结构特征 | 第26-27页 |
1.3.2 RILP的功能 | 第27-29页 |
1.4 本论文的研究目的与意义 | 第29-30页 |
第二章 材料与方法 | 第30-47页 |
2.1 材料 | 第30-38页 |
2.1.1 实验菌株、细胞、质粒和引物 | 第30-32页 |
2.1.2 抗体 | 第32页 |
2.1.3 主要试剂 | 第32-35页 |
2.1.4 常用溶液组分 | 第35-36页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第36-38页 |
2.2 实验方法 | 第38-47页 |
2.2.1 myc融合RalGDS全长及其功能域表达载体构建 | 第38-42页 |
2.2.2 细胞培养 | 第42-43页 |
2.2.3 DNA转染 | 第43页 |
2.2.4 免疫荧光 | 第43-44页 |
2.2.5 细胞裂解液的制备 | 第44页 |
2.2.6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第44-45页 |
2.2.7 免疫印迹 | 第45页 |
2.2.8 GST融合蛋白的提取纯化 | 第45-46页 |
2.2.9 GST-pulldown | 第46-47页 |
第三章 实验结果与分析 | 第47-67页 |
3.1 RalGDS在细胞中的分布和表达 | 第47-50页 |
3.2 RILP在细胞中募集RalGDS | 第50-54页 |
3.2.1 RILP在细胞中募集外源的RalGDS | 第50-52页 |
3.2.2 RILP在细胞中募集内源的RalGDS | 第52-54页 |
3.3 RILP募集RalGDS于溶酶体上 | 第54-57页 |
3.4 RalGDS三个功能域REM,CDC25,RBD的真核融合表达质粒构建 | 第57-60页 |
3.5 RILP与RalGDS三个功能域在细胞中的共定位情况 | 第60-63页 |
3.6 RILP NT,CT以及Rab7与RalGDS的共定位情况 | 第63-65页 |
3.7 RILP与RalGDS相互作用情况 | 第65-67页 |
第四章 讨论与展望 | 第67-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
附录 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |