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肝癌相关抗原SMP30联合GP96修饰树突状细胞诱生CTL抗肝癌作用的研究

个人简历第3-8页
英文缩略词表第8-11页
中文摘要第11-15页
英文摘要第15-20页
前言第21-26页
第一部分 构建负载SMP30和Gp96 DC疫苗第26-57页
    1 材料与设备第26-30页
    2 实验方法第30-41页
        2.1 真核重组子构建与筛选、鉴定第30-33页
            2.1.1 设计SMP30及Gp96载体第30-32页
            2.1.2 重组子鉴定第32-33页
        2.2 肝癌细胞裂解液制备第33页
        2.3 负载SMP30和Gp96 DC疫苗制备与检测第33-37页
            2.3.1 分离PBMC第33-34页
            2.3.2 DC诱导实验与检测第34-35页
            2.3.3 SMP30和Gp96转染DC实验第35-37页
        2.4 负载肝癌细胞总蛋白DC疫苗制备第37页
        2.5 各组DC疫苗检测第37-40页
        2.6 统计学分析第40-41页
    3 实验结果第41-48页
        3.1 PBMC存活率第41页
        3.2 DC成熟实验(表面分子检测结果)第41-44页
        3.3 真核重组子转染DC效率第44-46页
        3.4 各组DC疫苗检测结果第46-48页
            3.4.1 WB实验结果第46-47页
            3.4.2 各组疫苗上清液细胞因子检测第47-48页
    4 讨论第48-52页
    参考文献第52-57页
第二部分 DC疫苗体外诱导CTL第57-69页
    1 材料与设备第57-60页
    2 实验方法第60-62页
        2.1 T淋巴细胞分离与培养第60页
            2.1.1 T细胞分离第60页
            2.1.2 T细胞纯化第60页
        2.2 诱生CTL及检测第60-61页
            2.2.1 CTL激活、扩增第60页
            2.2.2 CTL增殖与激活检测第60-61页
        2.3 统计分析第61-62页
    3 实验结果第62-66页
        3.1 各组DC疫苗诱生的CTL激活扩增对比第62页
        3.2 各组CTL分泌细胞因子的对比第62-66页
    4 讨论第66-68页
    参考文献第68-69页
第三部分 CTL 体外特异性抗 HCC 效应检测第69-83页
    1 材料与设备第69-72页
    2 方法第72-75页
        2.1 肝癌细胞株培养第72-73页
        2.2 CTL杀伤试验第73-75页
    3 结果第75-80页
        3.1 肝癌细胞株培养情况第75-76页
        3.2 各组 DC 疫苗诱生的 CTL 特异性杀伤肝癌细胞株效应第76-80页
    4 讨论第80-82页
    参考文献第82-83页
第四部分 CTL 体内特异性抗 HCC 效应检测第83-97页
    1 材料与设备第83-86页
    2 实验方法第86-90页
        2.1 荷瘤鼠模型构建第86-87页
            2.1.1 荷人肝癌BALB/c鼠建模第86-87页
            2.1.2 计算成瘤率第87页
        2.2 CTL输入荷瘤鼠的监测第87-90页
            2.2.1 CTL输入荷瘤鼠第87页
            2.2.2 小鼠一般情况观察第87页
            2.2.3 小鼠动态免疫监测第87-88页
            2.2.4 小鼠肿瘤内组织变化第88-90页
    3 实验结果第90-95页
        3.1 荷人肝癌BALB/c鼠成模情况第90-91页
        3.2 CTL疫苗输入前后各组小鼠的肿瘤生长变化与小鼠存活情况第91-92页
        3.3 各组小鼠血清免疫指标改变情况第92-94页
        3.4 小鼠肿瘤内组织变化第94-95页
    4 讨论第95-96页
    参考文献第96-97页
全文小结第97-98页
创新点第98-99页
附录第99-114页
综述 Gp96蛋白在肿瘤免疫治疗的研究进展第114-134页
    1 Gp96独特生物学特点第117-119页
    2 DC与Gp第119-120页
    3 免疫作用第120-121页
    4 Gp96与肿瘤免疫治疗第121-124页
    5 进展与展望第124-127页
    参考文献第127-134页
致谢第134页

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