个人简历 | 第3-8页 |
英文缩略词表 | 第8-11页 |
中文摘要 | 第11-15页 |
英文摘要 | 第15-20页 |
前言 | 第21-26页 |
第一部分 构建负载SMP30和Gp96 DC疫苗 | 第26-57页 |
1 材料与设备 | 第26-30页 |
2 实验方法 | 第30-41页 |
2.1 真核重组子构建与筛选、鉴定 | 第30-33页 |
2.1.1 设计SMP30及Gp96载体 | 第30-32页 |
2.1.2 重组子鉴定 | 第32-33页 |
2.2 肝癌细胞裂解液制备 | 第33页 |
2.3 负载SMP30和Gp96 DC疫苗制备与检测 | 第33-37页 |
2.3.1 分离PBMC | 第33-34页 |
2.3.2 DC诱导实验与检测 | 第34-35页 |
2.3.3 SMP30和Gp96转染DC实验 | 第35-37页 |
2.4 负载肝癌细胞总蛋白DC疫苗制备 | 第37页 |
2.5 各组DC疫苗检测 | 第37-40页 |
2.6 统计学分析 | 第40-41页 |
3 实验结果 | 第41-48页 |
3.1 PBMC存活率 | 第41页 |
3.2 DC成熟实验(表面分子检测结果) | 第41-44页 |
3.3 真核重组子转染DC效率 | 第44-46页 |
3.4 各组DC疫苗检测结果 | 第46-48页 |
3.4.1 WB实验结果 | 第46-47页 |
3.4.2 各组疫苗上清液细胞因子检测 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
第二部分 DC疫苗体外诱导CTL | 第57-69页 |
1 材料与设备 | 第57-60页 |
2 实验方法 | 第60-62页 |
2.1 T淋巴细胞分离与培养 | 第60页 |
2.1.1 T细胞分离 | 第60页 |
2.1.2 T细胞纯化 | 第60页 |
2.2 诱生CTL及检测 | 第60-61页 |
2.2.1 CTL激活、扩增 | 第60页 |
2.2.2 CTL增殖与激活检测 | 第60-61页 |
2.3 统计分析 | 第61-62页 |
3 实验结果 | 第62-66页 |
3.1 各组DC疫苗诱生的CTL激活扩增对比 | 第62页 |
3.2 各组CTL分泌细胞因子的对比 | 第62-66页 |
4 讨论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-69页 |
第三部分 CTL 体外特异性抗 HCC 效应检测 | 第69-83页 |
1 材料与设备 | 第69-72页 |
2 方法 | 第72-75页 |
2.1 肝癌细胞株培养 | 第72-73页 |
2.2 CTL杀伤试验 | 第73-75页 |
3 结果 | 第75-80页 |
3.1 肝癌细胞株培养情况 | 第75-76页 |
3.2 各组 DC 疫苗诱生的 CTL 特异性杀伤肝癌细胞株效应 | 第76-80页 |
4 讨论 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-83页 |
第四部分 CTL 体内特异性抗 HCC 效应检测 | 第83-97页 |
1 材料与设备 | 第83-86页 |
2 实验方法 | 第86-90页 |
2.1 荷瘤鼠模型构建 | 第86-87页 |
2.1.1 荷人肝癌BALB/c鼠建模 | 第86-87页 |
2.1.2 计算成瘤率 | 第87页 |
2.2 CTL输入荷瘤鼠的监测 | 第87-90页 |
2.2.1 CTL输入荷瘤鼠 | 第87页 |
2.2.2 小鼠一般情况观察 | 第87页 |
2.2.3 小鼠动态免疫监测 | 第87-88页 |
2.2.4 小鼠肿瘤内组织变化 | 第88-90页 |
3 实验结果 | 第90-95页 |
3.1 荷人肝癌BALB/c鼠成模情况 | 第90-91页 |
3.2 CTL疫苗输入前后各组小鼠的肿瘤生长变化与小鼠存活情况 | 第91-92页 |
3.3 各组小鼠血清免疫指标改变情况 | 第92-94页 |
3.4 小鼠肿瘤内组织变化 | 第94-95页 |
4 讨论 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-97页 |
全文小结 | 第97-98页 |
创新点 | 第98-99页 |
附录 | 第99-114页 |
综述 Gp96蛋白在肿瘤免疫治疗的研究进展 | 第114-134页 |
1 Gp96独特生物学特点 | 第117-119页 |
2 DC与Gp | 第119-120页 |
3 免疫作用 | 第120-121页 |
4 Gp96与肿瘤免疫治疗 | 第121-124页 |
5 进展与展望 | 第124-127页 |
参考文献 | 第127-134页 |
致谢 | 第134页 |