| 符号说明 | 第5-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1.前言 | 第13-27页 |
| 1.1 病原学 | 第14-17页 |
| 1.1.1 病原学分类 | 第14页 |
| 1.1.2 病毒粒子的形态结构和理化特性 | 第14页 |
| 1.1.3 ADV毒株及培养特性 | 第14-15页 |
| 1.1.4 AMDV的分子生物特征 | 第15-17页 |
| 1.1.4.1 AMDV基因组 | 第15页 |
| 1.1.4.2 AMDV基因的复制和转录 | 第15-16页 |
| 1.1.4.3 AMDV的蛋白及其功能 | 第16-17页 |
| 1.2 AMDV的流行病学 | 第17-20页 |
| 1.2.1 AMDV的宿主 | 第17-18页 |
| 1.2.2 AMDV的传播方式 | 第18页 |
| 1.2.3 AMDV的发病机制 | 第18-19页 |
| 1.2.4 AMDV的临床症状 | 第19-20页 |
| 1.2.5 AMDV病理变化 | 第20页 |
| 1.3 AMDV的诊断 | 第20-23页 |
| 1.3.1 病原学诊断 | 第20页 |
| 1.3.2 血清学诊断 | 第20-22页 |
| 1.3.2.1 碘凝集实验(IAT) | 第20页 |
| 1.3.2.2 对流免疫电泳(CIEP) | 第20-21页 |
| 1.3.2.3 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第21页 |
| 1.3.2.4 间接免疫荧光试验(IIF) | 第21页 |
| 1.3.2.5 补体结合实验(CF) | 第21页 |
| 1.3.2.6 免疫复合物检测法(CIC) | 第21-22页 |
| 1.3.2.7 淋巴细胞酯酶标记 | 第22页 |
| 1.3.2.8 酶标斑点纸条法 | 第22页 |
| 1.3.3 分子生物学诊断 | 第22-23页 |
| 1.3.3.1 聚合酶链式反应(PCR) | 第22页 |
| 1.3.3.2 核酸杂交技术 | 第22-23页 |
| 1.3.3.3 基因检测芯片 | 第23页 |
| 1.3.3.4 环介导等温扩增技术(LAMP) | 第23页 |
| 1.4 水貂示范场生物安全体系的建立 | 第23-26页 |
| 1.4.1 水貂示范场外部环境生物安全体系建立 | 第23-24页 |
| 1.4.2 水貂示范场内部环境生物安全体系建立 | 第24-26页 |
| 1.4.2.1 动物疫病的防控 | 第24页 |
| 1.4.2.2 加强日常管理 | 第24-25页 |
| 1.4.2.3 加强引种监测 | 第25页 |
| 1.4.2.4 完善防疫制度 | 第25页 |
| 1.4.2.5 疫苗预防和药物治疗 | 第25-26页 |
| 1.4.2.6 定期疾病检测 | 第26页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第26-27页 |
| 2.材料与方法 | 第27-37页 |
| 2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 实验样品 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.4 菌种与质粒 | 第28页 |
| 2.2 方法 | 第28-34页 |
| 2.2.1 试剂的配制 | 第28-29页 |
| 2.2.2 引物设计 | 第29-30页 |
| 2.2.3 采用 DNA 试剂盒对样品组织进行 DNA 的提取 | 第30页 |
| 2.2.4 NS1和VP2片段的PCR扩增 | 第30-31页 |
| 2.2.5 PCR产物回收纯化 | 第31-32页 |
| 2.2.6 重组载体构建 | 第32页 |
| 2.2.7 DH5α感受态细胞制备 | 第32-33页 |
| 2.2.8 连接产物的转化 | 第33页 |
| 2.2.9 重组质粒的提取 | 第33-34页 |
| 2.2.10 重组质粒的酶切鉴定 | 第34页 |
| 2.3 单重PCR方法建立 | 第34-35页 |
| 2.3.1 单重PCR目的条带的优化 | 第34页 |
| 2.3.2 单重PCR特异性试验 | 第34-35页 |
| 2.3.3 单重PCR敏感性试验 | 第35页 |
| 2.3.4 单重PCR重复性试验 | 第35页 |
| 2.4 双重PCR方法建立 | 第35-36页 |
| 2.4.1 双重PCR反应条件的优化 | 第35页 |
| 2.4.2 双重PCR特异性试验 | 第35页 |
| 2.4.3 双重PCR敏感性试验 | 第35-36页 |
| 2.4.4 双重PCR重复性试验 | 第36页 |
| 2.5 山东地区某示范水貂场AMDV的检疫净化 | 第36-37页 |
| 3.结果 | 第37-46页 |
| 3.1 NS1和VP2基因片段的PCR扩增结果 | 第37页 |
| 3.2 重组载体的酶切鉴定结果 | 第37-38页 |
| 3.3 测序结果与样品毒株比较 | 第38页 |
| 3.4 单重PCR测试结果 | 第38-40页 |
| 3.4.1 单重PCR目的片段优化结果 | 第38-39页 |
| 3.4.2 单重PCR特异性试验的结果 | 第39-40页 |
| 3.4.3 单重PCR敏感性试验结果 | 第40页 |
| 3.4.4 单重PCR重复性试验 | 第40页 |
| 3.5 双重PCR检测结果 | 第40-43页 |
| 3.5.1 双重PCR反应条件的优化 | 第40-41页 |
| 3.5.2 双重PCR特异性试验 | 第41-42页 |
| 3.5.3 双重PCR的敏感性试验 | 第42-43页 |
| 3.5.4 双重PCR重复性试验 | 第43页 |
| 3.6 山东地区某水貂示范场AMDV的检测结果 | 第43-46页 |
| 4.讨论 | 第46-48页 |
| 4.1 双重PCR方法的建立 | 第46-47页 |
| 4.2 阿留申疾病的检疫 | 第47-48页 |
| 5.结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56页 |