| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-35页 |
| 1.1 植物逆境胁迫的响应机制 | 第11-15页 |
| 1.1.1 植物的形态性状与抗旱性 | 第11-12页 |
| 1.1.1.1 叶片的形态性状与抗旱性 | 第12页 |
| 1.1.1.2 根的形态性状与抗旱性 | 第12页 |
| 1.1.2 植物响应胁迫的生理生化及分子机制 | 第12-14页 |
| 1.1.2.1 渗调物质 | 第13-14页 |
| 1.1.2.2 抗氧化系统与细胞膜稳定性 | 第14页 |
| 1.1.3 植物响应于胁迫信号传导 | 第14-15页 |
| 1.1.3.1 促分裂原激活蛋白激酶 | 第14-15页 |
| 1.1.3.2 钙依赖蛋白激酶 | 第15页 |
| 1.1.3.3 SOS信号途径 | 第15页 |
| 1.2 基因克隆的方法 | 第15-20页 |
| 1.2.1 基于标记与性状连锁的图位克隆 | 第16页 |
| 1.2.2 利用关联分析进行基因克隆 | 第16-17页 |
| 1.2.3 基于基因表达的基因发掘及Gateway批量基因克隆技术 | 第17-18页 |
| 1.2.4 表达序列标签技术与同源序列克隆技术 | 第18-19页 |
| 1.2.5 基于比较基因组学的基因发掘 | 第19页 |
| 1.2.6 利用转座子与T-DNA标签插入突变体克隆基因 | 第19-20页 |
| 1.3 启动子研究进展 | 第20-31页 |
| 1.3.1 植物启动子的基本结构 | 第20-21页 |
| 1.3.1.1 转录起始位点 | 第20页 |
| 1.3.1.2 TATA-box | 第20-21页 |
| 1.3.1.3 CAAT-box | 第21页 |
| 1.3.1.4 5'端上游调控元件 | 第21页 |
| 1.3.2 启动子的分类 | 第21-28页 |
| 1.3.2.1 组成型启动子 | 第22-23页 |
| 1.3.2.2 诱导型启动子 | 第23-25页 |
| 1.3.2.3 组织特异性启动子 | 第25-28页 |
| 1.3.3 启动子克隆及研究方法进展 | 第28-31页 |
| 1.3.3.1 植物启动子的克隆方法 | 第28-29页 |
| 1.3.3.2 植物启动子功能分析方法 | 第29-31页 |
| 1.4 本研究的目的意义和技术路线 | 第31-35页 |
| 1.4.1 立题依据及目的意义 | 第31-33页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第33-35页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第35-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-49页 |
| 2.2.1 启动子序列的生物信息学分析 | 第35页 |
| 2.2.2 植物表达载体的构建 | 第35-40页 |
| 2.2.2.1 TaFbox基因启动子全长及5'端缺失序列的克隆 | 第35-36页 |
| 2.2.2.2 PCR产物回收纯化 | 第36页 |
| 2.2.2.3 T-easy vector连接 | 第36-37页 |
| 2.2.2.4 连接产物转化大肠杆菌 | 第37页 |
| 2.2.2.5 菌液PCR鉴定阳性克隆 | 第37页 |
| 2.2.2.6 大肠杆菌质粒提取 | 第37-38页 |
| 2.2.2.7 测序 | 第38-39页 |
| 2.2.2.8 双元载体构建 | 第39-40页 |
| 2.2.3 水稻遗传转化 | 第40-42页 |
| 2.2.3.1 水稻成熟胚愈伤组织培养 | 第40页 |
| 2.2.3.2 农杆菌(GV3101)电击感受态的制备 | 第40页 |
| 2.2.3.3 农杆菌的电击转化 | 第40-41页 |
| 2.2.3.4 转化用农杆菌菌液的制备 | 第41页 |
| 2.2.3.5 渗透转化与抗性愈伤的诱导培养 | 第41-42页 |
| 2.2.4 转基因植株的检测 | 第42-46页 |
| 2.2.4.1 DNA的提取 | 第42页 |
| 2.2.4.2 PCR检测 | 第42-43页 |
| 2.2.4.3 Sourthern杂交 | 第43-46页 |
| 2.2.5 转基因植株GUS组织化学分析 | 第46页 |
| 2.2.6 水稻突变株候选基因的克隆 | 第46-49页 |
| 2.2.6.1 水稻突变株的表型鉴定 | 第46-47页 |
| 2.2.6.2 T-DNA插入突变体基因组位置确定 | 第47-48页 |
| 2.2.6.3 生物信息学分析 | 第48-49页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第49-68页 |
| 3.1 TaF-box基因簇启动子全长与GUS融合载体构建及遗传转化 | 第49-55页 |
| 3.1.1 TaF-box基因簇启动子全长与GUS融合载体构建 | 第49-50页 |
| 3.1.2 MITE元件缺失与GUS基因融合表达载体构建 | 第50页 |
| 3.1.3 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第50-51页 |
| 3.1.4 转基因植株的阳性检测及拷贝数检测 | 第51-52页 |
| 3.1.5 三个拷贝启动子驱动GUS基因的时空表达模式 | 第52-54页 |
| 3.1.6 MITE元件缺失转基因水稻的组织化学分析 | 第54-55页 |
| 3.2 TaF-box基因簇的启动子顺式作用元件分析及5'缺失载体构建 | 第55-60页 |
| 3.2.1 TaF-box基因簇的启动子顺式作用元件分析 | 第55-59页 |
| 3.2.2 TaF-box基因簇的启动子5'缺失载体构建 | 第59-60页 |
| 3.3 T-DNA插入突变体的表型鉴定、候选基因克隆及生物信息学分析 | 第60-68页 |
| 3.3.1 T-DNA插入突变体的表型鉴定 | 第60-62页 |
| 3.3.2 T-DNA插入突变体候选基因克隆及生物信息学分析 | 第62-68页 |
| 第四章 讨论 | 第68-74页 |
| 4.1 TaF-box串联基因簇的表达分工 | 第68-70页 |
| 4.2 MITE对表达的调控 | 第70-71页 |
| 4.3 通过启动子缺失研究顺式作用元件 | 第71-72页 |
| 4.4 T-DNA插入突变结合Tail-PCR方法发掘新基因 | 第72-74页 |
| 第五章 全文结论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
