中文摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
第一章 引言 | 第7-21页 |
1.1 研究的目的和意义 | 第7-9页 |
1.2 除草剂草甘膦的作用机理 | 第9-12页 |
1.2.1 草甘膦的性质及作用特点 | 第9页 |
1.2.2 草甘膦的作用机理 | 第9-10页 |
1.2.3 抗草甘膦作物基因工程 | 第10-11页 |
1.2.4 抗草甘膦基因—EPSPS基因的获得 | 第11-12页 |
1.3 大豆遗传转化方法 | 第12-16页 |
1.3.1 农杆菌介导法 | 第12-13页 |
1.3.2 基因枪法 | 第13-14页 |
1.3.3 花粉管通道法 | 第14-15页 |
1.3.4 电激和PEG/电激法 | 第15页 |
1.3.5 显微注射法 | 第15页 |
1.3.6 超声波辅助农杆菌介导法 | 第15-16页 |
1.4 农杆菌介导法转化大豆再生体系的研究进展 | 第16-18页 |
1.4.1 体细胞胚胎再生体系 | 第16-17页 |
1.4.2 不定芽器官再生体系 | 第17页 |
1.4.3 原生质体再生体系 | 第17-18页 |
1.5 农杆菌介导大豆的遗传转化中的问题和解决办法 | 第18-21页 |
1.5.1 农杆菌的侵染能力 | 第18页 |
1.5.2 大豆的易感性 | 第18-19页 |
1.5.3 抗氧化剂对大豆遗传转化的影响 | 第19页 |
1.5.4 酚类化合物对转化的作用 | 第19-20页 |
1.5.5 筛选剂对转化效率的影响 | 第20-21页 |
第二章 农杆菌介导的大豆子叶节法转基因 | 第21-53页 |
2.1 材料与方法 | 第21-33页 |
2.1.1 植物材料与农杆菌 | 第21-22页 |
2.1.2 主要仪器与试剂 | 第22页 |
2.1.3 质粒的提取与检测 | 第22-25页 |
2.1.4 农杆菌介导的大豆子叶节转基因方法基本程序 | 第25-28页 |
2.1.4.1 农杆菌培养基和保存培养方法 | 第25页 |
2.1.4.2 大豆子叶节法组培及农杆菌转化用的基础培养基 | 第25-27页 |
2.1.4.3 大豆子叶节法组培及农杆菌转化用的基础操作步骤 | 第27-28页 |
2.1.5 大豆农杆菌转化系统的优化 | 第28-31页 |
2.1.6 抗性植株的检测 | 第31-33页 |
2.2 结果与分析 | 第33-49页 |
2.2.1 质粒的检测 | 第33页 |
2.2.2 种子灭菌时间的确定 | 第33-34页 |
2.2.3 发芽培养基添加激素及浓度的确定 | 第34-36页 |
2.2.4 最适转化苗龄的确定 | 第36-37页 |
2.2.5 芽诱导阶段培养时间的确定 | 第37-40页 |
2.2.6 草甘膦筛选压力的确定 | 第40-42页 |
2.2.7 生根培养基的优化 | 第42-44页 |
2.2.8 抗性植株的分子检测 | 第44-46页 |
2.2.9 大豆农杆菌介导的子叶节转化系统优化后的方案 | 第46-49页 |
2.3 讨论 | 第49-53页 |
2.3.1 草甘膦作为大豆转基因筛选剂利弊 | 第49页 |
2.3.2 大豆种子灭菌问题 | 第49页 |
2.3.3 大豆种子发芽培养方面 | 第49-50页 |
2.3.4 关于丛生芽诱导及伸长 | 第50-51页 |
2.3.5 生根及移栽条件 | 第51页 |
2.3.6 论农杆菌转化植物方法与纯合的健康转基因植株 | 第51-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
发表论文和科研情况说明 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |