| 中文摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8页 |
| 缩略语 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 古菌概述 | 第10-11页 |
| 1.2 FHA结构域蛋白 | 第11-16页 |
| 1.2.1 真核生物中的FHA结构域蛋白 | 第13页 |
| 1.2.2 细菌中的FHA结构域蛋白 | 第13-14页 |
| 1.2.3 古菌中的FHA结构域蛋白 | 第14-16页 |
| 1.3 丝/苏氨酸蛋白激酶 | 第16-17页 |
| 1.3.1 真核生物中的丝/苏蛋白激酶 | 第16页 |
| 1.3.2 细菌中的丝/苏蛋白激酶 | 第16-17页 |
| 1.3.3 古菌中的丝/苏蛋白激酶 | 第17页 |
| 1.4 古菌鞭毛蛋白 | 第17-18页 |
| 1.5 课题研究的目的意义与目标 | 第18页 |
| 1.6 课题研究主要内容 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-27页 |
| 2.1 材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第19页 |
| 2.1.2 酶、试剂和试剂盒 | 第19-20页 |
| 2.1.3 供试抗生素 | 第20页 |
| 2.1.4 引物及寡核苷酸 | 第20-21页 |
| 2.1.5 供试质粒 | 第21页 |
| 2.1.6 其余缓冲液、试剂 | 第21页 |
| 2.2 方法 | 第21-27页 |
| 2.2.1 PCR扩增反应 | 第21-22页 |
| 2.2.2 分子生物学基本操作 | 第22页 |
| 2.2.3 蛋白质的表达纯化和透析 | 第22页 |
| 2.2.4 构建古菌S.tokodaii str.7启动子文库 | 第22-23页 |
| 2.2.5 细菌单杂交实验 | 第23-24页 |
| 2.2.6 磷酸化实验 | 第24页 |
| 2.2.7 聚丙烯酰胺凝胶阻滞实验 | 第24-25页 |
| 2.2.8 表面等离子共振实验 | 第25页 |
| 2.2.9 体内染色质免疫共沉淀实验 | 第25-26页 |
| 2.2.10 细菌双杂交实验 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-43页 |
| 3.1 S.tokodaii str.7启动子文库构建完成 | 第27-28页 |
| 3.2 寻找到FHA结构域蛋白ST0829调控的下游靶基因—古菌鞭毛蛋白操纵子 | 第28-29页 |
| 3.3 体内体外实验验证ST0829蛋白可以结合在古菌鞭毛蛋白操纵子的启动子(ST2519p)序列上 | 第29-34页 |
| 3.3.1 聚丙烯酰胺凝胶阻滞实验(EMSA)验证蛋白质-DNA相互作用 | 第30-31页 |
| 3.3.2 表面等离子共振技术(SPR)验证蛋白质-DNA相互作用 | 第31-33页 |
| 3.3.3 体内染色质免疫共沉淀实验(CHIP)验证蛋白质-DNA相互作用 | 第33-34页 |
| 3.4 磷酸化作用对ST0829蛋白结合DNA活性的影响 | 第34-39页 |
| 3.4.1 ST0829能够被激酶ST1565及突变体蛋白质磷酸化 | 第35-36页 |
| 3.4.2 ST0829蛋白被激酶STl 565磷酸化后DNA结合活性降低 | 第36-38页 |
| 3.4.3 ST0829蛋白被磷酸集团供体ACP磷酸化后DNA结合活性降低 | 第38-39页 |
| 3.5 细菌双杂交实验证明ST0829蛋白和RNA聚合酶-β亚基有相互作用 | 第39-40页 |
| 3.6 ST0829蛋白有转录白调控现象(EMSA,CHIP) | 第40-43页 |
| 4 总结与讨论 | 第43-46页 |
| 4.1 总结 | 第43-44页 |
| 4.2 讨论 | 第44页 |
| 4.3 研究展望 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 论文发表情况 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
