缩略语表 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
前言 | 第14-15页 |
文献回顾 | 第15-31页 |
一、关于肝癌 | 第15-16页 |
二、关于 Notch 信号通路 | 第16-22页 |
三、关于基质金属蛋白酶及其与肿瘤的关系 | 第22-31页 |
第一部分 Notch1 在肝癌组织中的表达情况及其与肝癌临床指标之间的关系 | 第31-37页 |
1 材料 | 第31-32页 |
1.1 组织标本 | 第31页 |
1.2 主要仪器与设备 | 第31页 |
1.3 主要试剂 | 第31-32页 |
2 方法 | 第32-33页 |
2.1 免疫组化染色方法 | 第32页 |
2.2 对照设置 | 第32页 |
2.3 结果判读 | 第32-33页 |
2.4 统计学方法 | 第33页 |
3 结果 | 第33-35页 |
3.1 Notch1 在肝癌组织、癌旁组织和正常肝组织中的表达 | 第33-34页 |
3.2 肝癌组织中 Notch1 的表达与肝癌临床病理特征之间的关系 | 第34-35页 |
4 讨论 | 第35-37页 |
第二部分 Notch1 在不同肝癌细胞系中的表达以及特异性 siRNA 介导基因敲除对其表达的影响 | 第37-48页 |
1 实验材料 | 第37-38页 |
1.1 细胞系 | 第37页 |
1.2 主要仪器与设备 | 第37页 |
1.3 主要试剂及药物 | 第37-38页 |
2 实验方法 | 第38-43页 |
2.1 细胞培养 | 第38页 |
2.2 Western-blot 测定 MHCC97-H,HepG2 以及 HL-7702 三种细胞系中 Notch1蛋白的表达 | 第38-40页 |
2.3 引物及 Notch1-siRNA 的设计、合成 | 第40页 |
2.4 细胞转染 | 第40-41页 |
2.5 Western-blot 检测 siRNA 干涉后 Notch1 蛋白水平的表达 | 第41页 |
2.6 实时定量 PCR 检测 siRNA 干涉后 Notch1 mRNA 表达 | 第41-43页 |
2.7 统计学方法 | 第43页 |
3 实验结果 | 第43-46页 |
3.1 Notch1 在肝癌细胞系及非肿瘤肝细胞系中的表达 | 第43页 |
3.2 Notch1-siRNA 对 MHCC97-H 及 HepG2 中 Notch1 蛋白表达的影响 | 第43-44页 |
3.3 Notch1-siRNA 对 MHCC97-H 和 HepG2 中 Notch1 mRNA 表达的影响 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
第三部分 Notch1 在肝癌细胞系侵袭迁移中的作用及其机制研究 | 第48-56页 |
1 实验材料 | 第48-49页 |
1.1 细胞系 | 第48页 |
1.2 主要仪器与设备 | 第48页 |
1.3 主要试剂及药物 | 第48-49页 |
2 方法 | 第49-50页 |
2.1 细胞培养 | 第49页 |
2.2 细胞分组及 Notch1-siRNA 转染 | 第49页 |
2.3 细胞侵袭能力的检测 | 第49-50页 |
2.4 Western blot 测定转染后肝癌细胞 MMP-2 及 MMP-9 蛋白表达 | 第50页 |
2.5 ELISA 法检测 MMP-2 及 MMP-9 的活性 | 第50页 |
2.6 统计学方法 | 第50页 |
3 结果 | 第50-53页 |
3.1 沉默 Notch1 基因对 MHCC97-H 及 HepG2 侵袭能力的影响 | 第50-52页 |
3.2 沉默 Notch1 基因对 MHCC97-H 及 HepG2 中 MMP-2、MMP-9 表达及活性的影响 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-56页 |
小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-68页 |
个人简历和研究成果 | 第68-70页 |
致谢 | 第70页 |