摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
符号及缩略语 | 第11-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-24页 |
第一章 哺乳动物卵母细胞成熟 | 第12-18页 |
1 卵母细胞成熟的一般过程 | 第12-13页 |
2 卵母细胞成熟过程中的重要事件 | 第13-15页 |
2.1 纺锤体的迁移和定位 | 第13-15页 |
2.2 皮质重组、极体排出以及卵子极化 | 第15页 |
3 调控卵母细胞成熟的细胞骨架 | 第15-18页 |
3.1 微丝 | 第15-16页 |
3.2 微管 | 第16-18页 |
第二章 MKlp2与profilin1的调控研究进展 | 第18-24页 |
1 有丝分裂类驱动蛋白2(MKlp2) | 第18-22页 |
2 微丝绑定蛋白profilin | 第22-23页 |
3 结语 | 第23-24页 |
第二部分 试验研究 | 第24-56页 |
第三章 MKlp2抑制后影响小鼠卵母细胞成熟过程中的极体排出 | 第24-38页 |
1 试验材料 | 第24-27页 |
1.1 抗体和试剂 | 第24-25页 |
1.2 主要仪器设备 | 第25-26页 |
1.3 抗体和试剂的配制 | 第26-27页 |
2 试验方法 | 第27-29页 |
2.1 小鼠卵母细胞的采集和体外成熟培养 | 第27页 |
2.2 诺考达唑处理卵母细胞 | 第27页 |
2.3 Paprotrain处理卵母细胞 | 第27页 |
2.4 拯救实验 | 第27-28页 |
2.5 免疫荧光染色和激光共聚焦观察 | 第28-29页 |
2.6 活细胞工作站 | 第29页 |
2.7 数据分析 | 第29页 |
3 结果 | 第29-35页 |
3.1 MKlp2在小鼠卵母细胞成熟过程中的表达与定位 | 第29-31页 |
3.2 抑制MKlp2导致第一极体排出失败 | 第31-33页 |
3.3 抑制MKlp2会干扰细胞周期 | 第33-35页 |
3.4 MKlp2的抑制不影响卵母细胞的纺锤体构型或者染色体排列 | 第35页 |
4 讨论 | 第35-37页 |
5 小结 | 第37-38页 |
第四章 Profilin1在小鼠卵母细胞中调控微丝介导的极体排出 | 第38-56页 |
1 试验材料 | 第39-43页 |
1.1 抗体和试剂 | 第39-40页 |
1.2 主要仪器设备 | 第40页 |
1.3 抗体与和试剂配制 | 第40-43页 |
2 试验方法 | 第43-47页 |
2.1 小鼠卵母细胞的采集和体外成熟培养 | 第43页 |
2.2 显微注射profilin1 morpholino (MO) | 第43-44页 |
2.4 免疫荧光染色和激光共聚焦观察 | 第44-45页 |
2.5 免疫蛋白印迹法(Western blot) | 第45-47页 |
2.6 荧光强度和免疫印迹蛋白强度分析 | 第47页 |
2.7 数据分析 | 第47页 |
3 结果 | 第47-53页 |
3.1 Profilin1在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的表达及定位 | 第47-49页 |
3.2 敲低profilin1导致小鼠卵母细胞第一极体排出失败 | 第49-50页 |
3.3 敲低profilin1能够促进小鼠卵母细胞的微丝聚合 | 第50-52页 |
3.4 敲低profilin1引起ROCK蛋白表达量和MLC2磷酸化水平的下降 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-54页 |
4.1 Profilin1在小鼠卵母细胞成熟过程中的功能 | 第53-54页 |
4.2 Profilin1调控小鼠卵母细胞微丝动态变化的可能机制 | 第54页 |
5 小结 | 第54-56页 |
全文结论 | 第56-58页 |
创新性 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
附录: 攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第68-70页 |
致谢 | 第70页 |