| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 轮状病毒概述 | 第11-16页 |
| 1.1.1 轮状病毒的形态、结构及基因组 | 第11页 |
| 1.1.2 轮状病毒的理化特性和培养特性 | 第11-12页 |
| 1.1.3 轮状病毒的主要结构蛋白及其功能 | 第12-13页 |
| 1.1.4 轮状病毒的非结构蛋白及其功能 | 第13-14页 |
| 1.1.5 轮状病毒的致病机理 | 第14-15页 |
| 1.1.6 轮状病毒的流行病学 | 第15-16页 |
| 1.1.7 轮状病毒感染的临床表现及病理变化 | 第16页 |
| 1.2 轮状病毒的检测技术 | 第16-19页 |
| 1.2.1 病原学检测技术 | 第17页 |
| 1.2.2 血清学和免疫学检测技术 | 第17-18页 |
| 1.2.3 分子生物学检测技术 | 第18-19页 |
| 1.3 荧光定量PCR的原理 | 第19页 |
| 1.4 定量PCR反应中的荧光化学 | 第19-21页 |
| 1.4.1 非特异性DNA结合染料 | 第19-20页 |
| 1.4.2 TaqMan探针 | 第20页 |
| 1.4.3 分子信标 | 第20页 |
| 1.4.4 杂交探针 | 第20-21页 |
| 1.4.5 复合探针 | 第21页 |
| 1.5 荧光定量PCR技术的应用 | 第21-22页 |
| 1.5.1 荧光定量PCR技术在病原微生物检测方面的应用 | 第21页 |
| 1.5.2 荧光定量PCR技术在细胞因子基因表达定量检测上的应用 | 第21页 |
| 1.5.3 荧光定量PCR技术在肿瘤研究中的应用 | 第21-22页 |
| 1.6 研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-32页 |
| 2.1 材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 病毒、细胞及临床病料 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第24页 |
| 2.2.2 PoRV的培养 | 第24页 |
| 2.2.3 病毒半数组织感染量（TCID50）的测定 | 第24页 |
| 2.2.4 病毒核酸的提取 | 第24-26页 |
| 2.2.5 阳性标准质粒的制备 | 第26-28页 |
| 2.2.6 荧光定量RT-PCR标准曲线的建立 | 第28-29页 |
| 2.2.7 特异性试验 | 第29页 |
| 2.2.8 敏感性试验 | 第29页 |
| 2.2.9 重复性试验 | 第29页 |
| 2.2.10 临床样品检测 | 第29-30页 |
| 2.2.11 人工动物感染试验 | 第30页 |
| 2.2.12 应用荧光定量PCR方法检测仔猪排毒情况 | 第30-31页 |
| 2.2.13 组织切片的制备 | 第31页 |
| 2.2.14 染色 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-40页 |
| 3.1 PoRV TCID50的测定结果 | 第32页 |
| 3.2 标准质粒的制备 | 第32页 |
| 3.3 荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第32-33页 |
| 3.4 特异性试验结果 | 第33-34页 |
| 3.5 敏感性试验结果 | 第34-35页 |
| 3.6 重复性试验结果 | 第35-36页 |
| 3.7 临床样品检测结果 | 第36页 |
| 3.8 人工动物感染试验结果 | 第36-40页 |
| 3.8.1 临床症状表现 | 第36-37页 |
| 3.8.2 解剖病变 | 第37页 |
| 3.8.3 荧光定量RT-PCR检测仔猪粪便排毒量 | 第37-38页 |
| 3.8.4 病理学检测 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 4.1 荧光定量PCR技术讨论 | 第40页 |
| 4.2 仔猪感染轮状病毒排毒规律的讨论 | 第40-41页 |
| 4.3 猪轮状病毒致病特性研究 | 第41-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录 | 第48-49页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第49页 |
