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RAGE在间歇缺氧致动脉粥样硬化作用中的体外研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
中英文略缩词表第9-10页
第1章 前言第10-12页
第2章 实验材料第12-15页
    2.1 实验细胞和慢病毒第12页
    2.2 实验仪器第12-13页
    2.3 实验试剂第13-14页
    2.4 主要试剂配制第14-15页
第3章 实验方法及步骤第15-24页
    实验技术路线图第15-16页
    3.1 THP-1 细胞的培养第16页
        3.1.1 THP-1 细胞的复苏及培养、传代第16页
        3.1.2 THP-1 细胞的培养第16页
        3.1.3 THP-1 细胞的传代第16页
        3.1.4 细胞冻存第16页
    3.2 PMA诱导分化THP-1 细胞为巨噬细胞第16-17页
    3.3 间歇缺氧处理第17页
    3.4 THP-1 细胞的RAGE、NF-KB、AGES与IH时间表达关系第17-19页
        3.4.1 Western Blot法验证IH与THP-1 细胞RAGE、NF-kB p65表达的时间关系第17-18页
        3.4.2 ELISA检测IH后上清液AGE产生与时间关系第18-19页
    3.5 SHRNA/RAGE慢病毒转染及稳定细胞株筛选第19-22页
        3.5.1 嘌呤霉素筛选试验第19-20页
        3.5.2 慢病毒感染THP-1 细胞及稳定细胞株筛选第20页
        3.5.3 qPCR检测各稳定细胞株中RAGE基因mRNA表达第20-22页
        3.5.4 Western blot检测各稳定细胞株中RAGE表达第22页
    3.6 实验分组第22页
    3.7 WESTERN BLOT检测RAGE在IH条件下对THP-1 细胞单核细胞趋化指标(MCP-1、CCR2)、巨噬细胞分化指标(CD14、CD68)的影响第22-23页
    3.8 油红O染色第23页
    3.9 统计学处理第23-24页
第4章 实验结果第24-33页
    4.1 RAGE、NF-KB P65在间歇缺氧(IH)条件下的表达与时间的关系第24-25页
    4.2 AGES在间歇缺氧条件下的表达与时间的关系第25页
    4.3 PMA诱导分化THP-1 细胞为巨噬细胞第25-26页
    4.4 SHRNA/RAGE慢病毒转染及稳定细胞株筛选第26-28页
        4.4.1 WB验证慢病毒转染THP-1 细胞株RAGE蛋白表达情况第26-27页
        4.4.2 qPCR验证慢病毒转染THP-1 细胞株RAGE mRNA表达情况第27-28页
    4.5 WERSTERN-BLOT检测RAGE对间歇缺氧条件下的单核细胞趋化(MCP-1、CCR-2)、巨噬细胞分化(CD14、CD68)表达的影响第28-31页
    4.6 油红O染色RAGE在IH条件下对泡沫细胞生成的影响第31-33页
第5章 讨论第33-37页
第6章 结论第37-38页
第7章 不足与展望第38-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-43页
综述 OSAS 患者持续气道正压通气与心血管事件的关系第43-50页
    参考文献第47-50页

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