摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
中英文略缩词表 | 第9-10页 |
第1章 前言 | 第10-12页 |
第2章 实验材料 | 第12-15页 |
2.1 实验细胞和慢病毒 | 第12页 |
2.2 实验仪器 | 第12-13页 |
2.3 实验试剂 | 第13-14页 |
2.4 主要试剂配制 | 第14-15页 |
第3章 实验方法及步骤 | 第15-24页 |
实验技术路线图 | 第15-16页 |
3.1 THP-1 细胞的培养 | 第16页 |
3.1.1 THP-1 细胞的复苏及培养、传代 | 第16页 |
3.1.2 THP-1 细胞的培养 | 第16页 |
3.1.3 THP-1 细胞的传代 | 第16页 |
3.1.4 细胞冻存 | 第16页 |
3.2 PMA诱导分化THP-1 细胞为巨噬细胞 | 第16-17页 |
3.3 间歇缺氧处理 | 第17页 |
3.4 THP-1 细胞的RAGE、NF-KB、AGES与IH时间表达关系 | 第17-19页 |
3.4.1 Western Blot法验证IH与THP-1 细胞RAGE、NF-kB p65表达的时间关系 | 第17-18页 |
3.4.2 ELISA检测IH后上清液AGE产生与时间关系 | 第18-19页 |
3.5 SHRNA/RAGE慢病毒转染及稳定细胞株筛选 | 第19-22页 |
3.5.1 嘌呤霉素筛选试验 | 第19-20页 |
3.5.2 慢病毒感染THP-1 细胞及稳定细胞株筛选 | 第20页 |
3.5.3 qPCR检测各稳定细胞株中RAGE基因mRNA表达 | 第20-22页 |
3.5.4 Western blot检测各稳定细胞株中RAGE表达 | 第22页 |
3.6 实验分组 | 第22页 |
3.7 WESTERN BLOT检测RAGE在IH条件下对THP-1 细胞单核细胞趋化指标(MCP-1、CCR2)、巨噬细胞分化指标(CD14、CD68)的影响 | 第22-23页 |
3.8 油红O染色 | 第23页 |
3.9 统计学处理 | 第23-24页 |
第4章 实验结果 | 第24-33页 |
4.1 RAGE、NF-KB P65在间歇缺氧(IH)条件下的表达与时间的关系 | 第24-25页 |
4.2 AGES在间歇缺氧条件下的表达与时间的关系 | 第25页 |
4.3 PMA诱导分化THP-1 细胞为巨噬细胞 | 第25-26页 |
4.4 SHRNA/RAGE慢病毒转染及稳定细胞株筛选 | 第26-28页 |
4.4.1 WB验证慢病毒转染THP-1 细胞株RAGE蛋白表达情况 | 第26-27页 |
4.4.2 qPCR验证慢病毒转染THP-1 细胞株RAGE mRNA表达情况 | 第27-28页 |
4.5 WERSTERN-BLOT检测RAGE对间歇缺氧条件下的单核细胞趋化(MCP-1、CCR-2)、巨噬细胞分化(CD14、CD68)表达的影响 | 第28-31页 |
4.6 油红O染色RAGE在IH条件下对泡沫细胞生成的影响 | 第31-33页 |
第5章 讨论 | 第33-37页 |
第6章 结论 | 第37-38页 |
第7章 不足与展望 | 第38-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-43页 |
综述 OSAS 患者持续气道正压通气与心血管事件的关系 | 第43-50页 |
参考文献 | 第47-50页 |