| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 引言 | 第13页 |
| 1.2 白蚁肠道共生微生物及其生理功能 | 第13-15页 |
| 1.3 白蚁的木质纤维素酶分解系统 | 第15-17页 |
| 1.3.1 低等白蚁的木质纤维素分解系统 | 第15-16页 |
| 1.3.2 高等白蚁的木质纤维素分解系统 | 第16-17页 |
| 1.4 白蚁及其共生微生物纤维素酶、半纤维素酶研究概况 | 第17-22页 |
| 1.4.1 木质纤维素降解酶类及其功能 | 第17-19页 |
| 1.4.2 白蚁宿主来源的纤维素酶 | 第19-20页 |
| 1.4.3 白蚁共生微生物的纤维素酶以及半纤维素酶 | 第20-22页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 黑胸散白蚁共生疣微菌TSB-47木质纤维素酶基因的多样性及木聚糖酶Xyn1959的酶活特性研究 | 第23-52页 |
| 2.1 材料 | 第23-28页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要试剂、培养基以及缓冲液的配制 | 第24-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-34页 |
| 2.2.1 Opitutaceae sp.TSB-47基因组DNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.2 Opitutaceae sp.TSB-47基因组测序 | 第28页 |
| 2.2.3 纤维素、半纤维素酶的系统发育分析 | 第28页 |
| 2.2.4 纤维素酶以及半纤维素酶基因重组表达质粒的构建 | 第28-29页 |
| 2.2.5 Xyn1959木聚糖酶的表达以及纯化 | 第29-31页 |
| 2.2.6 重组Xyn1959木聚糖酶酶学性质研究 | 第31-34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-49页 |
| 2.3.1 Opitutaceae sp.TSB-47的基因组DNA | 第34页 |
| 2.3.2 Opitutaceae sp.TSB-47的基因组注释与分析 | 第34-37页 |
| 2.3.3 Opitutaceae sp.TSB-47纤维素酶以及半纤维素酶的多样性分析 | 第37-41页 |
| 2.3.4 Opitutaceae sp.TSB-47内切葡聚糖酶的系统发育分析 | 第41页 |
| 2.3.5 Opitutaceae sp.TSB-47木聚糖酶的系统发育分析 | 第41-42页 |
| 2.3.6 纤维素酶以及半纤维素酶基因重组表达质粒的构建 | 第42页 |
| 2.3.7 Xyn1959木聚糖酶基因全长的克隆 | 第42-44页 |
| 2.3.8 Xyn1959木聚糖酶基因的异源表达、纯化 | 第44-45页 |
| 2.3.9 重组Xyn1959木聚糖酶活性分析 | 第45-49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-52页 |
| 第三章 黑胸散白蚁肠道GHF7纤维素酶基因的克隆、表达以及酶活特性研究 | 第52-71页 |
| 3.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 3.1.1 白蚁的采集和饲养 | 第52页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第52-53页 |
| 3.2 实验方法 | 第53-57页 |
| 3.2.1 黑胸散白蚁肠道不同样品DNA的提取 | 第53页 |
| 3.2.2 黑胸散白蚁肠道GHF7纤维素酶基因的定位 | 第53页 |
| 3.2.3 黑胸散白蚁全肠cDNA的制备 | 第53-54页 |
| 3.2.4 GHF7基因的PCR扩增和RT-PCR扩增 | 第54-55页 |
| 3.2.5 GHF7基因DNA文库以及cDNA文库的构建 | 第55页 |
| 3.2.6 GHF7基因的系统发育分析 | 第55页 |
| 3.2.7 重组RcGHF7-RT33蛋白的表达以及纯化 | 第55-56页 |
| 3.2.8 RcGHF7-RT33的β-葡萄糖苷酶特性研究 | 第56-57页 |
| 3.3 实验结果 | 第57-68页 |
| 3.3.1 黑胸散白蚁肠道GHF7基因的定位 | 第57页 |
| 3.3.2 黑胸散白蚁全肠GHF7基因的多样性分析 | 第57-60页 |
| 3.3.3 黑胸散白蚁肠道已表达GHF7基因的多样性分析 | 第60-62页 |
| 3.3.4 黑胸散白蚁肠道GHF7纤维素酶基因RcGHF7-RT33的多重比对 | 第62-64页 |
| 3.3.5 重组RcGHF7-RT33蛋白表达以及纯化 | 第64-66页 |
| 3.3.6 重组RcGHF7-RT33的β-葡萄糖苷酶活性分析 | 第66-68页 |
| 3.4 讨论 | 第68-71页 |
| 第四章 海南象白蚁肠道共生细菌来源的EG酶的多样性与活性研究 | 第71-96页 |
| 4.1 实验材料 | 第71-72页 |
| 4.1.1 白蚁的采集和饲养 | 第71页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第71-72页 |
| 4.2 实验方法 | 第72-79页 |
| 4.2.1 海南象白蚁全肠Fosmid文库的构建 | 第72-75页 |
| 4.2.2 Fosmid文库中具有纤维素酶活性克隆的筛选 | 第75-76页 |
| 4.2.3 Fosmid文库中具有EG酶活性克隆的测序 | 第76页 |
| 4.2.4 EG酶基因的定位 | 第76-77页 |
| 4.2.5 海南象白蚁肠道不同部位EG酶基因文库的构建 | 第77页 |
| 4.2.6 海南象白蚁肠道不同部位EG酶基因文库的Rarefaction分析 | 第77页 |
| 4.2.7 海南象白蚁肠道EG酶基因的系统发育分析 | 第77页 |
| 4.2.8 NSEG5a基因的表达与纯化 | 第77页 |
| 4.2.9 重组NSEG5a的EG酶学特性研究 | 第77-79页 |
| 4.3 实验结果 | 第79-94页 |
| 4.3.1 海南象白蚁全肠Fosmid文库的构建 | 第79-82页 |
| 4.3.2 具有纤维素酶活性克隆的筛选 | 第82-83页 |
| 4.3.3 具有EG酶活性克隆的454测序及分析 | 第83-85页 |
| 4.3.4 GHF5内切-β-1,4-葡聚糖酶基因定位 | 第85-86页 |
| 4.3.5 海南象白蚁肠道不同部位EG基因的克隆 | 第86-88页 |
| 4.3.6 NSEG5a基因全长的克隆 | 第88-89页 |
| 4.3.7 NSEG5a的异源表达和纯化 | 第89-91页 |
| 4.3.8 NSEG5a重组酶的酶活特性研究 | 第91-94页 |
| 4.4 讨论 | 第94-96页 |
| 第五章 总结与展望 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-108页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109页 |
