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抑瘤素M与盐霉素联用对肝癌干细胞作用的研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
中英文对照表第12-13页
第一章 绪论第13-22页
    1.1 肝癌的简介第13页
    1.2 肿瘤干细胞第13-15页
        1.2.1 肿瘤干细胞的理论第13页
        1.2.2 肿瘤干细胞的分离第13-14页
        1.2.3 肿瘤干细胞的鉴定第14-15页
    1.3 肿瘤干细胞诱导分化治疗第15-17页
        1.3.1 诱导分化疗法的理论第15页
        1.3.2 诱导分化剂第15-16页
        1.3.3 肝癌诱导分化疗法在临床中的应用第16-17页
    1.4 抑瘤素M第17-19页
        1.4.1 抑瘤素M受体第17-18页
        1.4.2 抑瘤素M生物学功能研究进展第18-19页
    1.5 盐霉素第19-20页
        1.5.1 盐霉素对肿瘤干细胞作用的研究进展第19-20页
        1.5.2 盐霉素临床应用前景第20页
    1.6 实验立题依据第20-22页
第二章 材料与试剂第22-27页
    2.1 实验材料第22-24页
        2.1.1 细胞系第22页
        2.1.2 实验仪器第22-23页
        2.1.3 实验主要试剂第23-24页
        2.1.4 Q-PCR所用引物第24页
    2.2 主要试剂配制第24-27页
        2.2.1 PBS的配制第24-25页
        2.2.2 DMEM高糖培养液配制第25页
        2.2.3 DMEM/F12培养液的配制第25页
        2.2.4 0.25%胰酶-EDTA混合液配制(10×)第25页
        2.2.5 磁珠分选所用Buffer1的配制第25-26页
        2.2.6 磁珠分选所用Buffer 2 的配制第26页
        2.2.7 磁珠分选所用Buffer 3 的配制第26页
        2.2.8 磁珠分选用DNase I的配制第26页
        2.2.9 药物溶液的配制第26-27页
第三章 实验方法第27-38页
    3.1 CD133~+ HepG2肝癌干细胞的分离、培养及鉴定第27-30页
        3.1.1 免疫磁珠法筛选CD133~+HepG2肝癌干细胞第27-28页
        3.1.2 CD133~+ HepG2肝癌干细胞的培养第28-29页
        3.1.3 CD133~+ HepG2肝癌干细胞的鉴定第29-30页
    3.2 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞增殖的影响第30-31页
    3.3 联合用药对CD133~+HepG2肝癌干细胞凋亡的影响第31-32页
        3.3.1 Annexin V -FITC-PI双染法检测细胞凋亡第31页
        3.3.2 细胞凋亡线粒体膜电位检测(JC-1)第31页
        3.3.3 Western Blot检测caspase3蛋白的表达第31-32页
    3.4 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞侵袭能力的影响第32-33页
    3.5 联合用药诱导CD133~+ HepG2肝癌干细胞分化相关标志物的检测第33-37页
        3.5.1 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞中CD133表达水平的影响第33页
        3.5.2 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞中干性相关基因表达水平的影响第33-35页
        3.5.3 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞AFP、ALB表达水平的影响第35-37页
    3.6 统计学分析第37-38页
第四章 实验结果第38-50页
    4.1 CD133~+ HepG2肝癌干细胞的分离、培养及鉴定第38-40页
        4.1.1 CD133~+ HepG2肝癌干细胞的筛选第38页
        4.1.2 CD133~+HepG2肝癌干细胞的培养第38-39页
        4.1.3 CD133~+ HepG2肝癌干细胞的鉴定第39-40页
    4.2 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞增殖的影响第40-42页
    4.3 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞凋亡的影响第42-45页
        4.3.1 Annexin V -FITC/PI双染法检测细胞凋亡第42-43页
        4.3.2 细胞凋亡线粒体膜电位检测(JC-1)第43-44页
        4.3.3 Western Blot检测cleaved caspase3蛋白的表达第44-45页
    4.4 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞侵袭能力的影响第45-46页
    4.5 联合用药诱导CD133~+HepG2肝癌干细胞分化相关标志物的检测第46-50页
        4.5.1 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞中CD133表达水平的影响第46-47页
        4.5.2 联合用药对CD133~+HepG2肝癌干细胞中干性相关基因表达水平的影响第47-48页
        4.5.3 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞AFP、ALB表达水平的影响第48-50页
第五章 讨论第50-52页
第六章 结论第52-53页
参考文献第53-57页
致谢第57页

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