| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 中英文对照表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-22页 |
| 1.1 肝癌的简介 | 第13页 |
| 1.2 肿瘤干细胞 | 第13-15页 |
| 1.2.1 肿瘤干细胞的理论 | 第13页 |
| 1.2.2 肿瘤干细胞的分离 | 第13-14页 |
| 1.2.3 肿瘤干细胞的鉴定 | 第14-15页 |
| 1.3 肿瘤干细胞诱导分化治疗 | 第15-17页 |
| 1.3.1 诱导分化疗法的理论 | 第15页 |
| 1.3.2 诱导分化剂 | 第15-16页 |
| 1.3.3 肝癌诱导分化疗法在临床中的应用 | 第16-17页 |
| 1.4 抑瘤素M | 第17-19页 |
| 1.4.1 抑瘤素M受体 | 第17-18页 |
| 1.4.2 抑瘤素M生物学功能研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 盐霉素 | 第19-20页 |
| 1.5.1 盐霉素对肿瘤干细胞作用的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.5.2 盐霉素临床应用前景 | 第20页 |
| 1.6 实验立题依据 | 第20-22页 |
| 第二章 材料与试剂 | 第22-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第22页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.3 实验主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 Q-PCR所用引物 | 第24页 |
| 2.2 主要试剂配制 | 第24-27页 |
| 2.2.1 PBS的配制 | 第24-25页 |
| 2.2.2 DMEM高糖培养液配制 | 第25页 |
| 2.2.3 DMEM/F12培养液的配制 | 第25页 |
| 2.2.4 0.25%胰酶-EDTA混合液配制（10×） | 第25页 |
| 2.2.5 磁珠分选所用Buffer1的配制 | 第25-26页 |
| 2.2.6 磁珠分选所用Buffer 2 的配制 | 第26页 |
| 2.2.7 磁珠分选所用Buffer 3 的配制 | 第26页 |
| 2.2.8 磁珠分选用DNase I的配制 | 第26页 |
| 2.2.9 药物溶液的配制 | 第26-27页 |
| 第三章 实验方法 | 第27-38页 |
| 3.1 CD133~+ HepG2肝癌干细胞的分离、培养及鉴定 | 第27-30页 |
| 3.1.1 免疫磁珠法筛选CD133~+HepG2肝癌干细胞 | 第27-28页 |
| 3.1.2 CD133~+ HepG2肝癌干细胞的培养 | 第28-29页 |
| 3.1.3 CD133~+ HepG2肝癌干细胞的鉴定 | 第29-30页 |
| 3.2 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞增殖的影响 | 第30-31页 |
| 3.3 联合用药对CD133~+HepG2肝癌干细胞凋亡的影响 | 第31-32页 |
| 3.3.1 Annexin V -FITC-PI双染法检测细胞凋亡 | 第31页 |
| 3.3.2 细胞凋亡线粒体膜电位检测（JC-1） | 第31页 |
| 3.3.3 Western Blot检测caspase3蛋白的表达 | 第31-32页 |
| 3.4 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞侵袭能力的影响 | 第32-33页 |
| 3.5 联合用药诱导CD133~+ HepG2肝癌干细胞分化相关标志物的检测 | 第33-37页 |
| 3.5.1 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞中CD133表达水平的影响 | 第33页 |
| 3.5.2 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞中干性相关基因表达水平的影响 | 第33-35页 |
| 3.5.3 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞AFP、ALB表达水平的影响 | 第35-37页 |
| 3.6 统计学分析 | 第37-38页 |
| 第四章 实验结果 | 第38-50页 |
| 4.1 CD133~+ HepG2肝癌干细胞的分离、培养及鉴定 | 第38-40页 |
| 4.1.1 CD133~+ HepG2肝癌干细胞的筛选 | 第38页 |
| 4.1.2 CD133~+HepG2肝癌干细胞的培养 | 第38-39页 |
| 4.1.3 CD133~+ HepG2肝癌干细胞的鉴定 | 第39-40页 |
| 4.2 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞增殖的影响 | 第40-42页 |
| 4.3 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞凋亡的影响 | 第42-45页 |
| 4.3.1 Annexin V -FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第42-43页 |
| 4.3.2 细胞凋亡线粒体膜电位检测（JC-1） | 第43-44页 |
| 4.3.3 Western Blot检测cleaved caspase3蛋白的表达 | 第44-45页 |
| 4.4 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞侵袭能力的影响 | 第45-46页 |
| 4.5 联合用药诱导CD133~+HepG2肝癌干细胞分化相关标志物的检测 | 第46-50页 |
| 4.5.1 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞中CD133表达水平的影响 | 第46-47页 |
| 4.5.2 联合用药对CD133~+HepG2肝癌干细胞中干性相关基因表达水平的影响 | 第47-48页 |
| 4.5.3 联合用药对CD133~+ HepG2肝癌干细胞AFP、ALB表达水平的影响 | 第48-50页 |
| 第五章 讨论 | 第50-52页 |
| 第六章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
