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长链非编码RNA 00301、00511及XIST在非小细胞肺癌中的作用及其机制研究

论文创新点第5-6页
中英文简称对照第6-8页
摘要第8-11页
Abstract第11-14页
引言第19-23页
第一章 LINC00301在非小细胞肺癌中的作用及其机制研究第23-80页
    1.1 材料与方法第25-51页
        1.1.1 实验材料第25-32页
            1.1.1.1 肺组织样品采集及细胞系购买第25页
            1.1.1.2 主要试剂第25-26页
            1.1.1.3 主要仪器设备第26-27页
            1.1.1.4 主要试剂配制第27-32页
        1.1.2 实验方法第32-51页
            1.1.2.1 细胞培养第32-33页
            1.1.2.2 细胞转染第33页
            1.1.2.3 总RNA提取第33-34页
            1.1.2.4 qRT-PCR检测LNC00301的表达第34-35页
            1.1.2.5 CCK8法检测细胞的增殖能力第35-36页
            1.1.2.6 EdU染色检测细胞增殖能力第36-37页
            1.1.2.7 Transwell migration检测细胞迁移能力第37页
            1.1.2.8 Transwell invasion检测细胞侵袭能力第37-38页
            1.1.2.9 荧光原位杂交实验(FISH)第38-39页
            1.1.2.10 细胞总蛋白的提取第39-40页
            1.1.2.11 Western印迹分析第40-43页
            1.1.2.12 平板克隆形成试验第43-44页
            1.1.2.13 凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)第44-46页
            1.1.2.14 染色质免疫共沉淀(ChIP)第46-47页
            1.1.2.15 质粒的构建和鲁米诺发光检测第47-48页
            1.1.2.16 免疫组织化学第48-49页
            1.1.2.17 人肺癌裸鼠原位移植模型的建立实验第49-50页
            1.1.2.18 生物信息学预测第50-51页
    1.2 数据分析第51页
    1.3 结果第51-76页
        1.3.1 LINC00301在NSCLC中的表达水平及其临床意义第51-54页
        1.3.2 LINC00301对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭的作用第54-56页
        1.3.3 LINC00301促进NSCLC细胞的体内生长第56-58页
        1.3.4 LINC00301的细胞定位以及在组蛋白修饰中的作用第58-60页
        1.3.5 LINC00301与EZH2特异性的结合第60-62页
        1.3.6 LINC00301募集EZH2与EAF2基因启动子处,促进EAF2基因启动子发生H3K27me3,抑制EAF2基因转录第62-64页
        1.3.7 LINC00301通过调控EAF2/HIF1α信号途径促进NSCLC的增殖、迁移和侵袭第64-68页
        1.3.8 HIF1α在NSCLC中高度表达并与预后密切相关第68-71页
        1.3.9 LINC00301通过作为ceRNA缓解miR-1276对HIF1α的靶向抑制,促进NSCLC的增殖、迁移和侵袭第71-76页
    1.4 讨论第76-80页
第二章 LINC00511在非小细胞肺癌中的作用及其机制研究第80-104页
    2.1 材料与方法第82-85页
        2.1.1 实验材料第82页
            2.1.1.1 肺组织样品采集及细胞系购买第82页
            2.1.1.2 主要试剂第82页
            2.1.1.3 主要仪器设备第82页
            2.1.1.4 主要试剂配制第82页
        2.1.2 实验方法第82-85页
            2.1.2.1 细胞培养第82-83页
            2.1.2.2 细胞转染第83页
            2.1.2.3 总RNA提取第83页
            2.1.2.4 qRT-PCR检测LINC00511的表达第83页
            2.1.2.5 CCK8法检测细胞的增殖能力第83页
            2.1.2.6 EdU染色检测细胞增殖能力第83页
            2.1.2.7 Transwell migration检测细胞迁移能力第83页
            2.1.2.8 Transwell invasion检测细胞侵袭能力第83页
            2.1.2.9 Hoechst染色法检测细胞凋亡水平第83-84页
            2.1.2.10 提取细胞的总蛋白质第84页
            2.1.2.11 Western印迹分析第84页
            2.1.2.12 平板克隆形成试验第84页
            2.1.2.13 染色质免疫共沉淀(ChIP)第84页
            2.1.2.14 质粒的构建和鲁米诺发光检测第84页
            2.1.2.15 免疫组织化学第84页
            2.1.2.16 人肺癌裸鼠原位移植模型的建立实验第84页
            2.1.2.17 生物信息学预测第84-85页
    2.2 数据分析第85页
    2.3 结果第85-102页
        2.3.1 LINC00511在NSCLC中的表达水平及其临床意义第85-88页
        2.3.2 LINC00511对NSCLC细胞增殖和细胞周期的影响第88-91页
        2.3.3 LINC00511对NSCLC细胞迁移和侵袭的影响第91-92页
        2.3.4 LINC00511对NSCLC细胞凋亡的影响第92-94页
        2.3.5 LINC00301促进NSCLC细胞的体内生长第94-95页
        2.3.6 LINC00511在NSCLC细胞中通过直接结合EZH2来抑制P57的表达第95-99页
        2.3.7 p57的沉默部分介导LINC00511的促癌效率第99-101页
        2.3.8 p57在肺癌中的预后意义第101-102页
    2.4 讨论第102-104页
第三章 XIST在非小细胞肺癌中的作用及其机制研究第104-115页
    3.1. 材料与方法第105-107页
        3.1.1 实验材料第105页
            3.1.1.1 肺组织样品采集及细胞系购买第105页
            3.1.1.2 主要试剂第105页
            3.1.1.3 主要仪器设备第105页
            3.1.1.4 主要试剂配制第105页
        3.1.2 实验方法第105-107页
            3.1.2.1 细胞培养第105页
            3.1.2.2 细胞转染第105页
            3.1.2.3 总RNA提取第105-106页
            3.1.2.4 qRT-PCR检测XIST的表达第106页
            3.1.2.5 CCK8法检测细胞的增殖能力第106页
            3.1.2.6 EdU染色检测细胞增殖能力第106页
            3.1.2.7 Transwell migration检测细胞迁移能力第106页
            3.1.2.8 Transwell invasion检测细胞侵袭能力第106页
            3.1.2.9 提取细胞的总蛋白质第106页
            3.1.2.10 Western印迹分析第106页
            3.1.2.12 平板克隆形成试验第106页
            3.1.2.13 染色质免疫共沉淀(ChIP)第106-107页
            3.1.2.14 人肺癌裸鼠原位移植模型的建立实验第107页
            3.1.2.15 生物信息学预测第107页
    3.2. 数据分析第107页
    3.3. 结果第107-113页
        3.3.1 XIST在NSCLC中的表达水平及其临床意义第107-110页
        3.3.2 XIST对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭、细胞周期和体外生长的影响第110-111页
        3.3.3 XIST通过直接结合EZH2抑制NSCLC细胞KLF2的表达第111-112页
        3.3.4 KLF2的沉默部分介导XIST的促癌效率第112-113页
    3.4. 讨论第113-115页
总结第115-116页
参考文献第116-122页
综述第122-135页
    参考文献第130-135页
攻博期间发表的科研成果目录第135-138页
致谢第138-139页

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