论文创新点 | 第5-6页 |
中英文简称对照 | 第6-8页 |
摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
引言 | 第19-23页 |
第一章 LINC00301在非小细胞肺癌中的作用及其机制研究 | 第23-80页 |
1.1 材料与方法 | 第25-51页 |
1.1.1 实验材料 | 第25-32页 |
1.1.1.1 肺组织样品采集及细胞系购买 | 第25页 |
1.1.1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
1.1.1.3 主要仪器设备 | 第26-27页 |
1.1.1.4 主要试剂配制 | 第27-32页 |
1.1.2 实验方法 | 第32-51页 |
1.1.2.1 细胞培养 | 第32-33页 |
1.1.2.2 细胞转染 | 第33页 |
1.1.2.3 总RNA提取 | 第33-34页 |
1.1.2.4 qRT-PCR检测LNC00301的表达 | 第34-35页 |
1.1.2.5 CCK8法检测细胞的增殖能力 | 第35-36页 |
1.1.2.6 EdU染色检测细胞增殖能力 | 第36-37页 |
1.1.2.7 Transwell migration检测细胞迁移能力 | 第37页 |
1.1.2.8 Transwell invasion检测细胞侵袭能力 | 第37-38页 |
1.1.2.9 荧光原位杂交实验(FISH) | 第38-39页 |
1.1.2.10 细胞总蛋白的提取 | 第39-40页 |
1.1.2.11 Western印迹分析 | 第40-43页 |
1.1.2.12 平板克隆形成试验 | 第43-44页 |
1.1.2.13 凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA) | 第44-46页 |
1.1.2.14 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第46-47页 |
1.1.2.15 质粒的构建和鲁米诺发光检测 | 第47-48页 |
1.1.2.16 免疫组织化学 | 第48-49页 |
1.1.2.17 人肺癌裸鼠原位移植模型的建立实验 | 第49-50页 |
1.1.2.18 生物信息学预测 | 第50-51页 |
1.2 数据分析 | 第51页 |
1.3 结果 | 第51-76页 |
1.3.1 LINC00301在NSCLC中的表达水平及其临床意义 | 第51-54页 |
1.3.2 LINC00301对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭的作用 | 第54-56页 |
1.3.3 LINC00301促进NSCLC细胞的体内生长 | 第56-58页 |
1.3.4 LINC00301的细胞定位以及在组蛋白修饰中的作用 | 第58-60页 |
1.3.5 LINC00301与EZH2特异性的结合 | 第60-62页 |
1.3.6 LINC00301募集EZH2与EAF2基因启动子处,促进EAF2基因启动子发生H3K27me3,抑制EAF2基因转录 | 第62-64页 |
1.3.7 LINC00301通过调控EAF2/HIF1α信号途径促进NSCLC的增殖、迁移和侵袭 | 第64-68页 |
1.3.8 HIF1α在NSCLC中高度表达并与预后密切相关 | 第68-71页 |
1.3.9 LINC00301通过作为ceRNA缓解miR-1276对HIF1α的靶向抑制,促进NSCLC的增殖、迁移和侵袭 | 第71-76页 |
1.4 讨论 | 第76-80页 |
第二章 LINC00511在非小细胞肺癌中的作用及其机制研究 | 第80-104页 |
2.1 材料与方法 | 第82-85页 |
2.1.1 实验材料 | 第82页 |
2.1.1.1 肺组织样品采集及细胞系购买 | 第82页 |
2.1.1.2 主要试剂 | 第82页 |
2.1.1.3 主要仪器设备 | 第82页 |
2.1.1.4 主要试剂配制 | 第82页 |
2.1.2 实验方法 | 第82-85页 |
2.1.2.1 细胞培养 | 第82-83页 |
2.1.2.2 细胞转染 | 第83页 |
2.1.2.3 总RNA提取 | 第83页 |
2.1.2.4 qRT-PCR检测LINC00511的表达 | 第83页 |
2.1.2.5 CCK8法检测细胞的增殖能力 | 第83页 |
2.1.2.6 EdU染色检测细胞增殖能力 | 第83页 |
2.1.2.7 Transwell migration检测细胞迁移能力 | 第83页 |
2.1.2.8 Transwell invasion检测细胞侵袭能力 | 第83页 |
2.1.2.9 Hoechst染色法检测细胞凋亡水平 | 第83-84页 |
2.1.2.10 提取细胞的总蛋白质 | 第84页 |
2.1.2.11 Western印迹分析 | 第84页 |
2.1.2.12 平板克隆形成试验 | 第84页 |
2.1.2.13 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第84页 |
2.1.2.14 质粒的构建和鲁米诺发光检测 | 第84页 |
2.1.2.15 免疫组织化学 | 第84页 |
2.1.2.16 人肺癌裸鼠原位移植模型的建立实验 | 第84页 |
2.1.2.17 生物信息学预测 | 第84-85页 |
2.2 数据分析 | 第85页 |
2.3 结果 | 第85-102页 |
2.3.1 LINC00511在NSCLC中的表达水平及其临床意义 | 第85-88页 |
2.3.2 LINC00511对NSCLC细胞增殖和细胞周期的影响 | 第88-91页 |
2.3.3 LINC00511对NSCLC细胞迁移和侵袭的影响 | 第91-92页 |
2.3.4 LINC00511对NSCLC细胞凋亡的影响 | 第92-94页 |
2.3.5 LINC00301促进NSCLC细胞的体内生长 | 第94-95页 |
2.3.6 LINC00511在NSCLC细胞中通过直接结合EZH2来抑制P57的表达 | 第95-99页 |
2.3.7 p57的沉默部分介导LINC00511的促癌效率 | 第99-101页 |
2.3.8 p57在肺癌中的预后意义 | 第101-102页 |
2.4 讨论 | 第102-104页 |
第三章 XIST在非小细胞肺癌中的作用及其机制研究 | 第104-115页 |
3.1. 材料与方法 | 第105-107页 |
3.1.1 实验材料 | 第105页 |
3.1.1.1 肺组织样品采集及细胞系购买 | 第105页 |
3.1.1.2 主要试剂 | 第105页 |
3.1.1.3 主要仪器设备 | 第105页 |
3.1.1.4 主要试剂配制 | 第105页 |
3.1.2 实验方法 | 第105-107页 |
3.1.2.1 细胞培养 | 第105页 |
3.1.2.2 细胞转染 | 第105页 |
3.1.2.3 总RNA提取 | 第105-106页 |
3.1.2.4 qRT-PCR检测XIST的表达 | 第106页 |
3.1.2.5 CCK8法检测细胞的增殖能力 | 第106页 |
3.1.2.6 EdU染色检测细胞增殖能力 | 第106页 |
3.1.2.7 Transwell migration检测细胞迁移能力 | 第106页 |
3.1.2.8 Transwell invasion检测细胞侵袭能力 | 第106页 |
3.1.2.9 提取细胞的总蛋白质 | 第106页 |
3.1.2.10 Western印迹分析 | 第106页 |
3.1.2.12 平板克隆形成试验 | 第106页 |
3.1.2.13 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第106-107页 |
3.1.2.14 人肺癌裸鼠原位移植模型的建立实验 | 第107页 |
3.1.2.15 生物信息学预测 | 第107页 |
3.2. 数据分析 | 第107页 |
3.3. 结果 | 第107-113页 |
3.3.1 XIST在NSCLC中的表达水平及其临床意义 | 第107-110页 |
3.3.2 XIST对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭、细胞周期和体外生长的影响 | 第110-111页 |
3.3.3 XIST通过直接结合EZH2抑制NSCLC细胞KLF2的表达 | 第111-112页 |
3.3.4 KLF2的沉默部分介导XIST的促癌效率 | 第112-113页 |
3.4. 讨论 | 第113-115页 |
总结 | 第115-116页 |
参考文献 | 第116-122页 |
综述 | 第122-135页 |
参考文献 | 第130-135页 |
攻博期间发表的科研成果目录 | 第135-138页 |
致谢 | 第138-139页 |