氯霉素人工抗原的合成及活性检测的研究
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第9-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-28页 |
| 1.1 氯霉素简介 | 第14-16页 |
| 1.1.1 氯霉素的理化性质 | 第15页 |
| 1.1.2 氯霉素的作用机理 | 第15-16页 |
| 1.2 氯霉素的应用范围 | 第16页 |
| 1.3 氯霉素的药代动力学 | 第16-17页 |
| 1.4 氯霉素药物的毒副作用 | 第17-19页 |
| 1.4.1 氯霉素对造血系统的影响 | 第18页 |
| 1.4.2 氯霉素引起的其它不良反应 | 第18-19页 |
| 1.5 各国对氯霉素残留的规定 | 第19页 |
| 1.6 氯霉素残留的现状 | 第19-20页 |
| 1.7 氯霉素检测进展 | 第20-26页 |
| 1.7.1 微生物测定法 | 第20-22页 |
| 1.7.2 色谱法 | 第22-24页 |
| 1.7.3 免疫分析法 | 第24-26页 |
| 1.8 本课题研究的目的与意义 | 第26-27页 |
| 1.9 本课题研究的内容 | 第27-28页 |
| 第二章 氯霉素人工抗原的合成与鉴定 | 第28-49页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第28-31页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第29-30页 |
| 2.1.3 主要溶液配制 | 第30-31页 |
| 2.2 标准曲线的建立 | 第31-35页 |
| 2.2.1 BSA标准曲线 | 第31页 |
| 2.2.2 OVA标准曲线 | 第31-32页 |
| 2.2.3 CAP标准曲线 | 第32-33页 |
| 2.2.4 CAP-HS-Na标准曲线 | 第33页 |
| 2.2.5 BSA考马斯亮蓝法标准曲线 | 第33-34页 |
| 2.2.6 OVA考马斯亮蓝法标准曲线 | 第34-35页 |
| 2.3 重氮化法合成氯霉素人工抗原 | 第35-36页 |
| 2.3.1 反应流程图 | 第35页 |
| 2.3.2 反应步骤及条件的优化 | 第35-36页 |
| 2.4 混合酸酐法合成氯霉素人工抗原 | 第36-38页 |
| 2.4.1 反应流程图 | 第36-37页 |
| 2.4.2 反应步骤及条件的优化 | 第37-38页 |
| 2.5 碳二亚胺法合成氯霉素人工抗原 | 第38-40页 |
| 2.5.1 反应流程图 | 第38-39页 |
| 2.5.2 反应步骤及条件的优化 | 第39-40页 |
| 2.6 氯霉素人工抗原的鉴定 | 第40-41页 |
| 2.6.1 紫外分光光度法鉴定人工抗原 | 第40-41页 |
| 2.6.2 SDS-PAGE电泳法鉴定人工抗原 | 第41页 |
| 2.7 结果与分析 | 第41-47页 |
| 2.7.1 人工抗原的紫外扫描结果 | 第41-43页 |
| 2.7.2 人工抗原的电泳鉴定结果 | 第43-44页 |
| 2.7.3 人工抗原的偶联条件优化结果 | 第44-47页 |
| 2.8 本章小结 | 第47-49页 |
| 第三章 氯霉素多克隆抗体的制备与ELISA的建立 | 第49-62页 |
| 3.1 实验试剂与仪器 | 第49-50页 |
| 3.1.1 实验试剂与材料 | 第49-50页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第50页 |
| 3.1.3 ELISA相关试剂配置 | 第50页 |
| 3.2 抗氯霉素多克隆抗体的制备 | 第50-51页 |
| 3.3 间接ELISA法的建立 | 第51-54页 |
| 3.3.1 测定血清抗体效价 | 第52页 |
| 3.3.2 血清抗体最佳稀释倍数的确定 | 第52页 |
| 3.3.3 包被抗原的最佳浓度 | 第52页 |
| 3.3.4 包被温度与时间的优化 | 第52-53页 |
| 3.3.5 封闭液的选择 | 第53页 |
| 3.3.6 一抗作用时间的优化 | 第53页 |
| 3.3.7 酶标二抗作用时间的优化 | 第53页 |
| 3.3.8 底物显色时间的优化 | 第53页 |
| 3.3.9 建立抗体的竞争抑制曲线 | 第53-54页 |
| 3.3.10 交叉反应率 | 第54页 |
| 3.4 结果与分析 | 第54-61页 |
| 3.4.1 血清抗体效价 | 第54-55页 |
| 3.4.2 血清抗体最佳稀释倍数 | 第55页 |
| 3.4.3 包被抗原的最佳浓度 | 第55-56页 |
| 3.4.4 包被温度与时间的优化结果 | 第56-57页 |
| 3.4.5 封闭液的选择 | 第57页 |
| 3.4.6 一抗作用时间优化结果 | 第57-58页 |
| 3.4.7 酶标二抗作用时间优化结果 | 第58-59页 |
| 3.4.8 底物作用时间优化结果 | 第59页 |
| 3.4.9 抗体的竞争抑制曲线的建立 | 第59-60页 |
| 3.4.10 交叉反应率 | 第60-61页 |
| 3.5 本章小结 | 第61-62页 |
| 第四章 讨论 | 第62-66页 |
| 4.1 人工抗原合成方法的选择 | 第62-63页 |
| 4.2 载体蛋白的选择 | 第63页 |
| 4.3 免疫条件的选择 | 第63-64页 |
| 4.4 ELISA方法的探讨 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第74页 |
