| 摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 论文中的英文缩写及中文对照表 | 第13-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-25页 |
| 1.1 禽呼肠孤病毒研究的进展 | 第17-20页 |
| 1.1.1 禽呼肠孤病毒的简介 | 第17-18页 |
| 1.1.2 ARV的形态和结构 | 第18-19页 |
| 1.1.3 ARV的增殖特性 | 第19页 |
| 1.1.4 禽呼肠孤病毒的诊断与防治 | 第19-20页 |
| 1.2 鸡Toll样受体的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.2.1 Toll样受体的概念 | 第20页 |
| 1.2.2 Toll样受体的结构与分类 | 第20-21页 |
| 1.2.3 鸡Toll样受体的功能 | 第21-22页 |
| 1.3 SYBR Green Ⅱ实时荧光定量PCR | 第22-23页 |
| 1.3.1 SYBR Green Ⅱ实时荧光定量PCR原理 | 第22-23页 |
| 1.3.2 SYBR Green Ⅱ实时荧光定量PCR应用 | 第23页 |
| 1.4 本课题研究的意义 | 第23-25页 |
| 第二章 鸡TLR3、TLR5、TLR7、TLR15、TLR21 mRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第25-37页 |
| 2.1 材料与方法 | 第26-30页 |
| 2.1.1 主要仪器与试剂 | 第26页 |
| 2.1.2 引物设计与合成 | 第26-27页 |
| 2.1.3 SPF鸡脾脏RNA抽提与反转录 | 第27-28页 |
| 2.1.4 标准品制备 | 第28-29页 |
| 2.1.5 目的基因条件的优化 | 第29页 |
| 2.1.6 目的基因标准曲线试验 | 第29页 |
| 2.1.7 溶解曲线试验 | 第29-30页 |
| 2.1.8 敏感性试验 | 第30页 |
| 2.1.9 重复性试验 | 第30页 |
| 2.2 结果 | 第30-36页 |
| 2.2.1 RNA抽提结果 | 第30-31页 |
| 2.2.2 质粒标准品的制备结果 | 第31页 |
| 2.2.3 real-time PCR条件优化结果 | 第31-32页 |
| 2.2.4 各个目的基因标准曲线的制作结果 | 第32-33页 |
| 2.2.5 溶解曲线试验结果 | 第33-34页 |
| 2.2.6 各个基因的敏感性试验结果 | 第34-36页 |
| 2.2.7 重复性试验结果 | 第36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-37页 |
| 第三章 禽呼肠孤病毒感染体外鸡胚成纤维细胞后Toll样受体mRNA转录水平的变化 | 第37-45页 |
| 3.1 材料与方法 | 第39-41页 |
| 3.1.1 病毒 | 第39页 |
| 3.1.2 主要试验试剂和仪器 | 第39页 |
| 3.1.3 细胞的制备与培养 | 第39页 |
| 3.1.4 呼肠孤病毒TCID50测定 | 第39页 |
| 3.1.5 呼肠孤病毒感染方法 | 第39-40页 |
| 3.1.6 收集细胞样品 | 第40页 |
| 3.1.7 CEF细胞的RNA抽提与反转录 | 第40页 |
| 3.1.8 样品测定 | 第40页 |
| 3.1.9 数据统计分析 | 第40-41页 |
| 3.2 结果 | 第41-44页 |
| 3.2.1 ARV病毒结构蛋白6C基因的相对转录变化 | 第41页 |
| 3.2.2 ARV S1133株感染CEF后鸡Toll样受体的转录水平变化 | 第41-43页 |
| 3.2.3 不同接种剂量ARV感染CEF细胞24h后鸡Toll样受体的表达变化 | 第43-44页 |
| 3.3 讨论 | 第44-45页 |
| 第四章 ARV感染对SPF鸡组织器官中5种鸡Toll样受体mRNA相对转录的影响 | 第45-70页 |
| 4.1 材料与方法 | 第47-48页 |
| 4.1.1 主要试剂和仪器 | 第47页 |
| 4.1.2 试验动物 | 第47页 |
| 4.1.3 ARV感染SPF鸡试验 | 第47页 |
| 4.1.4 SPF鸡剖检及组织样品采集 | 第47页 |
| 4.1.5 采集样品的RNA抽提和反转录 | 第47-48页 |
| 4.1.6 试验样品的Real-time PCR测定 | 第48页 |
| 4.1.7 试验数据处理和分析 | 第48页 |
| 4.2 结果 | 第48-67页 |
| 4.2.1 SPF鸡感染呼肠孤病毒后的临床表现 | 第48-54页 |
| 4.2.1.1 SPF鸡体重及各个器官的变化情况 | 第48-53页 |
| 4.2.1.2 SPF鸡感染ARV后各个器官的临床表现 | 第53-54页 |
| 4.2.2 关节中5种鸡Toll样受体mRNA相对转录量的变化 | 第54-56页 |
| 4.2.3 心脏中5种鸡Toll样受体mRNA相对转录量的变化 | 第56-58页 |
| 4.2.4 肝脏中5种鸡Toll样受体mRNA相对转录量的变化 | 第58-60页 |
| 4.2.5 脾脏中5种鸡Toll样受体mRNA相对转录量的变化 | 第60-62页 |
| 4.2.6 胸腺中5种鸡Toll样受体mRNA相对转录量的变化 | 第62-64页 |
| 4.2.7 法氏囊中5种鸡Toll样受体mRNA相对转录量的变化 | 第64-65页 |
| 4.2.8 外周血淋巴细胞中5种鸡Toll样受体基因mRNA相对转录量的变化 | 第65-67页 |
| 4.3 讨论 | 第67-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 个人简历 | 第77页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第77页 |
