摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
中英文缩略语表 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-38页 |
1 前言 | 第14-15页 |
2 肌肉发生 | 第15-24页 |
2.1 肌肉发生概述 | 第15页 |
2.2 胚胎期骨骼肌发育 | 第15-16页 |
2.3 出生后骨骼肌生长 | 第16-17页 |
2.4 调控肌细胞分化的关键因子家族 | 第17-22页 |
2.4.1 生肌调节因子 | 第17-20页 |
2.4.2 肌肉增强因子 | 第20-22页 |
2.5 骨骼肌发育网络调控机制 | 第22-24页 |
3 表观遗传与组蛋白修饰 | 第24-36页 |
3.1 表观遗传 | 第24-25页 |
3.2 组蛋白修饰 | 第25-29页 |
3.2.1 组蛋白乙酰化与去乙酰化 | 第26-27页 |
3.2.2 组蛋白甲基化与去甲基化修饰 | 第27-29页 |
3.3 组蛋白修饰与肌肉分化 | 第29-36页 |
3.3.1 组蛋白乙酰化/去乙酰化酶与肌肉分化 | 第30-31页 |
3.3.2 组蛋白甲基化修饰/去甲基化修饰与肌肉分化 | 第31-36页 |
4 本研究的目的与意义 | 第36-38页 |
第二章 Suv39h1的组织表达模式分析 | 第38-46页 |
1 前言 | 第38页 |
2 材料和方法 | 第38-42页 |
2.1 试验材料 | 第38页 |
2.2 主要试剂、溶液和仪器 | 第38-40页 |
2.2.1 主要试剂 | 第38-39页 |
2.2.2 缓冲液及常用试剂的配置 | 第39页 |
2.2.3 主要仪器设备 | 第39-40页 |
2.3 试验方法 | 第40-42页 |
2.3.1 猪组织总RNA的提取 | 第40页 |
2.3.2 cDNA第一链的合成 | 第40-41页 |
2.3.3 猪Suv39h1基因的分离及生物信息学分析 | 第41-42页 |
2.3.4 定量PCR | 第42页 |
2.3.5 统计分析方法 | 第42页 |
3 结果及分析 | 第42-45页 |
3.1 猪Suv39h1基因的分离及生物信息学分析 | 第42-43页 |
3.2 Suv39h1在组织中的表达模式分析 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-46页 |
4.1 Suv39h1在哺乳动物中具有高度保守性 | 第45页 |
4.2 Suv39h1的组织表达模式分析 | 第45-46页 |
第三章 组蛋白甲基化酶Suv39h1调控成肌细胞分化的表观机制研究 | 第46-88页 |
1 前言 | 第46-47页 |
2 材料和方法 | 第47-58页 |
2.1 试验材料 | 第47-51页 |
2.2 主要试剂、溶液和仪器 | 第51-53页 |
2.2.1 试剂 | 第51页 |
2.2.2 常用试剂配制 | 第51-52页 |
2.2.3 主要仪器设备 | 第52-53页 |
2.3 试验方法 | 第53-58页 |
2.3.1 基因的克隆及载体构建 | 第53-54页 |
2.3.2 细胞转染 | 第54页 |
2.3.3 定量PCR | 第54页 |
2.3.4 免疫荧光 | 第54-55页 |
2.3.5 哺乳动物双杂交系统分析 | 第55页 |
2.3.6 双荧光素酶活性的检测 | 第55页 |
2.3.7 单层贴壁细胞总蛋白的提取 | 第55-56页 |
2.3.8 免疫沉淀与Western Bloting | 第56-57页 |
2.3.9 EMSA及染色质免疫沉淀 | 第57-58页 |
3 结果与分析 | 第58-84页 |
3.1 基因分离,载体构建及鉴定 | 第58-61页 |
3.1.1 猪HP1的分离及生物信息学分析 | 第58-59页 |
3.1.2 超表达载体的构建及鉴定 | 第59-60页 |
3.1.3 Mef2c启动子载体,突变载体的构建及鉴定 | 第60-61页 |
3.2 组蛋白甲基化酶Suv39h1对成肌细胞分化的影响 | 第61-75页 |
3.2.1 干扰效率及超表达效率分析 | 第61-62页 |
3.2.2 超表达及干扰Suv39h1对猪肌卫星细胞增殖的影响 | 第62-66页 |
3.2.3 超表达及干扰Suv39h1对猪肌卫星细胞分化的影响 | 第66-68页 |
3.2.4 超表达及干扰Suv39h1对C2C12细胞增殖的影响 | 第68-71页 |
3.2.5 超表达及干扰Suv39h1对C2C12细胞分化的影响 | 第71-75页 |
3.3 组蛋白甲基化酶Suv39h1对MEF2C在成肌细胞分化过程中的作用 | 第75-84页 |
3.3.1 Suv39h1,HP1和MEF2C在C2C12细胞分化过程中的细胞定位 | 第75页 |
3.3.2 Suv39h1、HP1与MEF2C在C2C12细胞体内相互作用 | 第75-78页 |
3.3.3 Suv39h1, HP1影响MEF2靶基因转录活性研究分析 | 第78-81页 |
3.3.4 HP1调控Mef2c表达的机理研究 | 第81-84页 |
4 讨论 | 第84-88页 |
4.1 Suv39h1调节成肌细胞细胞周期 | 第84-85页 |
4.2 Suv39h1影响成肌细胞分化 | 第85-86页 |
4.3 Suv39h1通过与MEF2C的相互作用影响成肌细胞分化 | 第86-87页 |
4.4 Suv39h1通过调节MEF2C靶基因的转录活性影响成肌细胞分化 | 第87页 |
4.5 HP1调节Mef2c的表达影响细胞分化 | 第87页 |
4.6 小结 | 第87-88页 |
第四章 结语 | 第88-89页 |
1 研究结论 | 第88页 |
2 创新性 | 第88页 |
3 研究不足之处 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-104页 |
附录 | 第104-107页 |
致谢 | 第107-108页 |