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组蛋白甲基化酶Suv39h1调节成肌细胞分化的表观遗传机制研究

摘要第7-10页
ABSTRACT第10-12页
中英文缩略语表第13-14页
第一章 文献综述第14-38页
    1 前言第14-15页
    2 肌肉发生第15-24页
        2.1 肌肉发生概述第15页
        2.2 胚胎期骨骼肌发育第15-16页
        2.3 出生后骨骼肌生长第16-17页
        2.4 调控肌细胞分化的关键因子家族第17-22页
            2.4.1 生肌调节因子第17-20页
            2.4.2 肌肉增强因子第20-22页
        2.5 骨骼肌发育网络调控机制第22-24页
    3 表观遗传与组蛋白修饰第24-36页
        3.1 表观遗传第24-25页
        3.2 组蛋白修饰第25-29页
            3.2.1 组蛋白乙酰化与去乙酰化第26-27页
            3.2.2 组蛋白甲基化与去甲基化修饰第27-29页
        3.3 组蛋白修饰与肌肉分化第29-36页
            3.3.1 组蛋白乙酰化/去乙酰化酶与肌肉分化第30-31页
            3.3.2 组蛋白甲基化修饰/去甲基化修饰与肌肉分化第31-36页
    4 本研究的目的与意义第36-38页
第二章 Suv39h1的组织表达模式分析第38-46页
    1 前言第38页
    2 材料和方法第38-42页
        2.1 试验材料第38页
        2.2 主要试剂、溶液和仪器第38-40页
            2.2.1 主要试剂第38-39页
            2.2.2 缓冲液及常用试剂的配置第39页
            2.2.3 主要仪器设备第39-40页
        2.3 试验方法第40-42页
            2.3.1 猪组织总RNA的提取第40页
            2.3.2 cDNA第一链的合成第40-41页
            2.3.3 猪Suv39h1基因的分离及生物信息学分析第41-42页
            2.3.4 定量PCR第42页
            2.3.5 统计分析方法第42页
    3 结果及分析第42-45页
        3.1 猪Suv39h1基因的分离及生物信息学分析第42-43页
        3.2 Suv39h1在组织中的表达模式分析第43-45页
    4 讨论第45-46页
        4.1 Suv39h1在哺乳动物中具有高度保守性第45页
        4.2 Suv39h1的组织表达模式分析第45-46页
第三章 组蛋白甲基化酶Suv39h1调控成肌细胞分化的表观机制研究第46-88页
    1 前言第46-47页
    2 材料和方法第47-58页
        2.1 试验材料第47-51页
        2.2 主要试剂、溶液和仪器第51-53页
            2.2.1 试剂第51页
            2.2.2 常用试剂配制第51-52页
            2.2.3 主要仪器设备第52-53页
        2.3 试验方法第53-58页
            2.3.1 基因的克隆及载体构建第53-54页
            2.3.2 细胞转染第54页
            2.3.3 定量PCR第54页
            2.3.4 免疫荧光第54-55页
            2.3.5 哺乳动物双杂交系统分析第55页
            2.3.6 双荧光素酶活性的检测第55页
            2.3.7 单层贴壁细胞总蛋白的提取第55-56页
            2.3.8 免疫沉淀与Western Bloting第56-57页
            2.3.9 EMSA及染色质免疫沉淀第57-58页
    3 结果与分析第58-84页
        3.1 基因分离,载体构建及鉴定第58-61页
            3.1.1 猪HP1的分离及生物信息学分析第58-59页
            3.1.2 超表达载体的构建及鉴定第59-60页
            3.1.3 Mef2c启动子载体,突变载体的构建及鉴定第60-61页
        3.2 组蛋白甲基化酶Suv39h1对成肌细胞分化的影响第61-75页
            3.2.1 干扰效率及超表达效率分析第61-62页
            3.2.2 超表达及干扰Suv39h1对猪肌卫星细胞增殖的影响第62-66页
            3.2.3 超表达及干扰Suv39h1对猪肌卫星细胞分化的影响第66-68页
            3.2.4 超表达及干扰Suv39h1对C2C12细胞增殖的影响第68-71页
            3.2.5 超表达及干扰Suv39h1对C2C12细胞分化的影响第71-75页
        3.3 组蛋白甲基化酶Suv39h1对MEF2C在成肌细胞分化过程中的作用第75-84页
            3.3.1 Suv39h1,HP1和MEF2C在C2C12细胞分化过程中的细胞定位第75页
            3.3.2 Suv39h1、HP1与MEF2C在C2C12细胞体内相互作用第75-78页
            3.3.3 Suv39h1, HP1影响MEF2靶基因转录活性研究分析第78-81页
            3.3.4 HP1调控Mef2c表达的机理研究第81-84页
    4 讨论第84-88页
        4.1 Suv39h1调节成肌细胞细胞周期第84-85页
        4.2 Suv39h1影响成肌细胞分化第85-86页
        4.3 Suv39h1通过与MEF2C的相互作用影响成肌细胞分化第86-87页
        4.4 Suv39h1通过调节MEF2C靶基因的转录活性影响成肌细胞分化第87页
        4.5 HP1调节Mef2c的表达影响细胞分化第87页
        4.6 小结第87-88页
第四章 结语第88-89页
    1 研究结论第88页
    2 创新性第88页
    3 研究不足之处第88-89页
参考文献第89-104页
附录第104-107页
致谢第107-108页

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