| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩略词 | 第10-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 重金属污染的生物学现状 | 第12-15页 |
| 1.1.1 重金属污染的毒理学研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.2 重金属毒理研究的分子生物学及细胞生物学进展 | 第13-15页 |
| 1.2 细胞凋亡研究进展 | 第15-19页 |
| 1.2.1 内源性凋亡途径 | 第16页 |
| 1.2.2 外源性凋亡途径 | 第16-17页 |
| 1.2.3 内质网应激—Ca~(2+)途径 | 第17-19页 |
| 1.3 铅胁迫诱导细胞凋亡的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.4 日本三角涡虫与重金属研究 | 第21-23页 |
| 1.4.1 涡虫的研究进展 | 第22页 |
| 1.4.2 涡虫毒理学研究现状 | 第22-23页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-36页 |
| 2.1 日本三角涡虫的采集与饲养 | 第24页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第24-26页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.2.2 主要仪器及设备 | 第25页 |
| 2.2.3 主要溶液配制 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-36页 |
| 2.3.1 实验处理方法 | 第26-27页 |
| 2.3.2 总RNA提取与cDNA合成 | 第27-28页 |
| 2.3.3 Q-RTPCR检测Caspase-3、Caspase-8、CaM基因mRNA表达水平 | 第28-30页 |
| 2.3.4 Elisa法检测Cyt-c蛋白含量 | 第30-32页 |
| 2.3.5 Western blot检测cleaved Caspase-3, cleaved Caspase-8, p-CaM蛋白表达水平 | 第32-33页 |
| 2.3.6 组织Ca~(2+)浓度测定 | 第33-34页 |
| 2.3.7 Caspase-3活性测定 | 第34-35页 |
| 2.3.8 LSCM(Laser scanning confocal mocroscopy)检测细胞凋亡 | 第35页 |
| 2.3.9 统计学分析 | 第35-36页 |
| 第3章 铅胁迫诱导日本三角涡虫细胞凋亡途径中关键基因及蛋白的表达变化 | 第36-48页 |
| 3.1 实验结论 | 第36-45页 |
| 3.1.1 铅胁迫下涡虫行为与形态变化 | 第36页 |
| 3.1.2 Q-RT PCR结果稳定性与可靠性分析 | 第36-38页 |
| 3.1.3 铅胁迫对涡虫Cyt-c蛋白表达量的影响 | 第38页 |
| 3.1.4 铅胁迫对涡虫Caspase-3mRNA及cleaved Caspase-3蛋白表达量的影响 | 第38-40页 |
| 3.1.5 铅胁迫对涡虫Caspase-8 mRNA及cleaved Caspase-8蛋白表达量的影响 | 第40-41页 |
| 3.1.6 铅胁迫对涡虫细胞内Ca~(2+)浓度的影响 | 第41-42页 |
| 3.1.7 铅胁迫对涡虫CaMmRNA及p-CaM蛋白表达量的影响 | 第42-43页 |
| 3.1.8 铅胁迫对涡虫Caspase-3活性的影响 | 第43-44页 |
| 3.1.9 铅胁迫对涡虫细胞凋亡的影响 | 第44-45页 |
| 3.2 讨论 | 第45-48页 |
| 第4章 BAPTA-AM对铅胁迫诱导日本三角涡虫细胞凋亡的抑制作用 | 第48-60页 |
| 4.1 实验结果 | 第48-56页 |
| 4.1.1 BAPTA-AM对铅胁迫后涡虫细胞内Ca~(2+)水平的影响 | 第48-49页 |
| 4.1.2 BAPTA-AM处理对铅胁迫后涡虫细胞内p-CaM表达的影响 | 第49-51页 |
| 4.1.3 BAPTA-AM处理对铅胁迫后涡虫细胞内cleaved Caspase-8表达的影响 | 第51-52页 |
| 4.1.4 BAPTA-AM处理对铅胁迫后涡虫细胞内Cyt-c表达的影响 | 第52-54页 |
| 4.1.5 BAPTA-AM处理对铅胁迫后涡虫细胞内Caspase-3活性的影响 | 第54-55页 |
| 4.1.6 BAPTA-AM处理对铅胁迫后涡虫细胞凋亡的影响 | 第55-56页 |
| 4.2 讨论 | 第56-58页 |
| 4.3 存在的问题与展望 | 第58-60页 |
| 第5章 总结 | 第60-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
