一种辣椒疫霉菌新型ThDP-依赖型酶的结构和酶活性研究
| 英文缩略词及中文对照表 | 第4-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-27页 |
| 1.1 辣椒疫霉研究概述 | 第11-14页 |
| 1.1.1 辣椒疫病的病原特征 | 第11-12页 |
| 1.1.2 辣椒疫病的病害流行 | 第12页 |
| 1.1.3 辣椒疫病的发生规律和症状 | 第12-13页 |
| 1.1.4 辣椒疫霉病的防治 | 第13-14页 |
| 1.2 ThDP-依赖型酶生物学研究 | 第14-23页 |
| 1.2.1 ThDP的分子结构 | 第14-15页 |
| 1.2.2 ThDP-依赖型酶的功能特征 | 第15-16页 |
| 1.2.3 ThDP-依赖型酶参与的代谢调控 | 第16-17页 |
| 1.2.4 ThDP-依赖型酶在药物靶标中的应用 | 第17-18页 |
| 1.2.5 硫胺素结构类似物的定向调控 | 第18-21页 |
| 1.2.6 ThDP-依赖型酶的结构研究 | 第21-23页 |
| 1.3 蛋白质X衍射晶体学 | 第23-27页 |
| 1.3.1 蛋白质纯化 | 第23-24页 |
| 1.3.2 蛋白质结晶 | 第24-25页 |
| 1.3.3 蛋白质结构测定 | 第25-27页 |
| 研究目的和意义 | 第27-28页 |
| 2 材料和方法 | 第28-43页 |
| 2.1 试验材料 | 第28-31页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第28页 |
| 2.1.2 生化试剂 | 第28页 |
| 2.1.3 相关耗材和仪器 | 第28-29页 |
| 2.1.4 相关试剂的配制 | 第29-31页 |
| 2.2 试验方法 | 第31-43页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第31-32页 |
| 2.2.2 重组质粒的构建 | 第32-35页 |
| 2.2.3 重组蛋白的表达与纯化 | 第35-39页 |
| 2.2.4 酶性质研究 | 第39-40页 |
| 2.2.5 重组蛋白突变体研究 | 第40-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-58页 |
| 3.1 PcUE1生物信息学分析 | 第43-46页 |
| 3.1.2 PcUE1蛋白的理化性质 | 第44页 |
| 3.1.3 PcUE1功能域分析 | 第44-45页 |
| 3.1.4 PcUE1系统进化分析 | 第45-46页 |
| 3.2 PcUE1基因克隆 | 第46-47页 |
| 3.3 PcUE1的表达与纯化 | 第47-49页 |
| 3.4 PcUE1蛋白晶体生长和优化 | 第49-50页 |
| 3.5 重组蛋白晶体X射线衍射与数据收集 | 第50-51页 |
| 3.6 PcUE1结构解析 | 第51-52页 |
| 3.7 PcUE1的整体结构 | 第52-54页 |
| 3.8 PcUE1的底物筛选和鉴定 | 第54-56页 |
| 3.8.1 PcUE1的底物筛选 | 第54-55页 |
| 3.8.2 PcUE1的底物鉴定 | 第55-56页 |
| 3.9 PcUE1突变体构建 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 4.1 PcUE1的序列分析 | 第58页 |
| 4.2 PcUE1的表达、纯化和晶体培养 | 第58-59页 |
| 4.3 PcUE1的三维结构分析和特异性 | 第59页 |
| 4.4 PcUE1催化特性 | 第59-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
