| 摘要 | 第4-13页 |
| abstract | 第13-23页 |
| 缩略语 | 第27-29页 |
| 前言 | 第29-33页 |
| 第一部分 Smac与内质网应激相关蛋白在白内障及正常人晶状体上皮细胞内表达的差异 | 第33-46页 |
| 1 材料与方法 | 第33-36页 |
| 1.1 材料 | 第33-35页 |
| 1.2 实验方法 | 第35-36页 |
| 2 实验结果 | 第36-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 4 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 第二部分 Smac基因过表达及干扰慢病毒载体构建及体外转染HLE-B3的实验研究 | 第46-100页 |
| 第一节 人晶状体上皮细胞Smac过表达及干扰载体的构建 | 第46-66页 |
| 1 实验材料 | 第46-48页 |
| 1.1 主要试剂 | 第46-47页 |
| 1.2 实验仪器 | 第47页 |
| 1.3 实验试剂配制 | 第47-48页 |
| 2 实验方法 | 第48-57页 |
| 2.1 构建GTP-SMAC过表达载体 | 第48-54页 |
| 2.2 构建 PM7.1-SAMC 干扰载体 | 第54-57页 |
| 3 结果 | 第57-66页 |
| 3.1 Smac过表达载体鉴定 | 第57-61页 |
| 3.2 Smac干扰载体鉴定 | 第61-66页 |
| 第二节 Smac基因过表达和干扰载体的慢病毒包装及滴度测定 | 第66-75页 |
| 1 实验材料 | 第66-69页 |
| 1.1 细胞系、质粒和菌种 | 第66页 |
| 1.2 主要试剂及耗材 | 第66页 |
| 1.3 实验仪器 | 第66-67页 |
| 1.4 主要试剂的配置 | 第67-69页 |
| 2 实验方法 | 第69-71页 |
| 2.1 HEK293TF细胞系的培养 | 第69页 |
| 2.2 细胞冻存 | 第69页 |
| 2.3 细胞复苏 | 第69页 |
| 2.4 病毒包装 | 第69-70页 |
| 2.5 慢病毒浓缩纯化 | 第70页 |
| 2.6 慢病毒滴度测定 | 第70-71页 |
| 3 结果 | 第71-75页 |
| 3.1 病毒包装 | 第71-72页 |
| 3.2 慢病毒滴度测定 | 第72-75页 |
| 第三节 Smac基因过表达和干扰载体体外稳定转染HLE-B3的筛选及目的蛋白的表达 | 第75-98页 |
| 1 材料与方法 | 第75-86页 |
| 1.1 材料 | 第75-80页 |
| 1.2 方法 | 第80-86页 |
| 1.3 统计学分析 | 第86页 |
| 2 结果 | 第86-94页 |
| 2.1 体外培养的HLE-B3形态观察 | 第86-87页 |
| 2.2 慢病毒转染 | 第87-88页 |
| 2.3 嘌呤霉素筛选 | 第88页 |
| 2.4 CCK-8法检测各组细胞存活率 | 第88-89页 |
| 2.5 QPCR检测Smac基因表达情况 | 第89-91页 |
| 2.6 Western blot检测Smac蛋白表达情况 | 第91-92页 |
| 2.7 Western-blot检测筛选阳性细胞传代后Smac蛋白的表达 | 第92-94页 |
| 3 讨论 | 第94-97页 |
| 4 结论 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-100页 |
| 第三部分 Smac基因过表达及干扰对HLE-B3内质网应激及其介导的细胞凋亡的影响及作用机制 | 第100-136页 |
| 1 材料与方法 | 第100-115页 |
| 1.1 实验材料 | 第100-108页 |
| 1.2 实验方法 | 第108-114页 |
| 1.3 统计学分析 | 第114-115页 |
| 2 结果 | 第115-126页 |
| 2.1 CCK-8 法测定H_2O_2对细胞的抑制作用 | 第115页 |
| 2.2 H_2O_2处理后细胞的形态学改变 | 第115-116页 |
| 2.3 CCK-8法测定细胞生长率 | 第116-117页 |
| 2.4 RT-PCR测各蛋白mRNA表达水平 | 第117-120页 |
| 2.5 Wsetern blot检测各组细胞蛋白表达 | 第120-124页 |
| 2.6 免疫共沉淀 | 第124页 |
| 2.7 质谱分析 | 第124-126页 |
| 3 讨论 | 第126-131页 |
| 4 结论 | 第131-133页 |
| 参考文献 | 第133-136页 |
| 全文结论 | 第136-137页 |
| 综述 内质网应激的相关机制及其在眼科疾病中的作用 | 第137-157页 |
| 参考文献 | 第150-157页 |
| 个人简历 | 第157-158页 |
| 致谢 | 第158页 |
